Note: Descriptions are shown in the official language in which they were submitted.
l~)9i249
La presente invention a pour objet de nouveauxdêrives d'amino-acide.
Elle a plus particulièrement pour objet de nouveaux
derives de la glutamine, acyles par un acide acetique substi-
tue.
L'invention concerne specifiquement un procede
d'obtention des composes de formule generale I:
A - B - fH - CONH - CIH - CH2 CH2 CONH2
R COORl
dans laquelle A est un radical cyclique hexagonal
choisi dans le groupe constitue par cyclohexyle et phenyle,
B est un radical cyclique hexagonal choisi dans le
groupe constitue par cyclohexyle, cyclohexenyle, cyclohexa-
dienyle, phenyle et phenyle substitu~ par un ou plusieurs halo-
genes, trifluoromethyle, trifluoromethoxy, trifluoromethylthio,
alcoxy inferieur, methylene dioxy, (alcoyl inferieur) thio,
alcenyl oxy inferieur ou alcoyle inferieur,
R est de l'hydrogene ou un radical alcoyle inferieur,
et Rl est de l'hydrogene, un cation monovalent derive
d'une base therapeutiquement compatible, minerale ou organique,
un alcoyle inferieur ou un alcoyle substitue par un ou plu-
sieurs hydroxyles ou un ou plusieurs groupes amines,
qui consiste a condenser un acide acetique substitue
de formule generale II:
A - B - CH - COOH II
R
dans laquelle A, B et R sont definis comme prece-
demment,
ou un de ses derives fonctionnels, avec la glutamine ou un de
ses derives fonctionnels de formule generale III:
Z49
2HN CIH CH2 CH2 CONH2 III
COORl
dans laquelle Rl garde les mêmes significations que
precedemment, pour former le derive de formule generale I
desire, que l'on peut le cas echeant, salifier par addition
d'une base minerale ou organique ou d'un acide mineral ou orga-
nique, esterifier par action d'un reactif alcoylant, transeste-
rifier par action d'un hydroxy alcanol ou dedoubler en ses
isomeres optiques.
Parmi les acides qu'il est possible d'utiliser pour
former un sel, on peut citer parmi les acides mineraux, l'acide
chlorhydrique, l'acide sulfurique, l'acide phosphorique; parmi
les acides organiques, l'acide formique, l'acide acetique,
l'acide di~thylamino propionique, l'acide oxalique, l'acide
fumarique, l'acide malique, l'acide citrique, l'acide tartri-
que, l'acide benzoïque, l'acide salicylique, l'acide pyrroli-
done carboxylique, l'acide thiazole-5 carboxylique, l'acide
isonicotinique ou l'acide glycyrrhetique.
L'invention s'etend aussi aux formes optiquement
actives des composes de formule generale I soit que la gluta-
mine soit sous forme racemique ou sous forme optiquementactive, soit que la chafne acetique comporte un atome de
carbone asymetrique lorsque R est un radical alcoyle inferieur,
soit encore lorsque A et/ou B sont des cycles non aromatiques.
Parmi les bases minerales ou organiques utilisables
en vue de la formation d'un sel, on peut citer les bases deri-
v~es de metaux alcalins tels que le sodium, le potassium ou le
lithium, les bases alcalino-terreuses telles que le calcium ou
le strontium, la magnesie, l'alumine; on peut citer egalement
les bases organiques telles que la dimethylamine, la triethyl-
amine, l'ethanolamine, la benzylamine, la choline ou la betaïne.
1091249
Parmi les reactifs qu'il est possible d'utiliser pourun dedoublement,on citera plus particulièrement les bases opti-
quement actives comme par exemple la brucine, la strychnine,
la sparteine, la l-ephedrine ou le d-threo l-p.nitro phenyl 2-
dimethylamino propane-1,3-diol.
Dans les definitions qui precèdent, le terme alcoyle
inferieur designe une chafne hydrocarbonee saturee ayant de
1 à 6 atomes de carbone en cha~ne droite ou ramifiee comme par
exemple un methyle, un propyle, un isopropyle, un isobutyle,
un ter-butyle, un neo-pentyle ou n-hexyle.
Le terme alcenyle inferieur designe une chaSne hydro-
carbonee insaturee ayant de 2 à 10 atomes de carbone portant
une ou plusieurs double liaisons comme un radical allyle, but-
2-enyle, dimethyl allyle, allenyle, penta 2,4-dienyle ou tri-
allyl methyle.
Le terme alcoyle substitue par un ou plusieurs
hydroxyles designe soit un alcanol inferieur, comme par exemple
~-hydroxy ethyle, propanol-2, hydroxy-l butane, soit un polyol
comme par exemple un radical a-glyceryle, ~-glyceryle, 3,4-
dihydroxybutyle, erythrityle, glucityle ou d-ribityle.
Le terme alcoyle substitue par un radical amine desi-
gne une cha~ne alcoyle inferieur substituee par un ou plusieurs
groupements amino, alcoylamino, dialcoylamino ou alcoylène
amino, comme par exemple methylamino, diethylamino, diiso-
propylamino, piperidino ethyl, morpholino ethyl ou (N-ethyl
pyrrolidinyl-2) methyl.
Les composes de la presente invention manifestent des
proprietes pharmacologiques interessantes et notamment des
proprietes anti-inflammatoires remarquables.
En outre, les composes de formule generale I possè-
dent un interêt therapeutique supplementaire dO au fait qu'ils
lO91Z49
sont depourvus a un degre significatif de proprietes ulcero-
gènes.
Leur faible toxicite permet d'envisager un traitement
de longue duree sans craindre l'apparition d'effets secondaires
fâcheux. Les composes de formule generale I se differencient
donc de la plupart des anti-inflammatoires de structure steroï-
dienne ou aromatique dont l'usage est limite soit dans le temps
soit par la posologie par la crainte d'apparition de lesions
gastriques ou renales.
L'invention s'etend aussi a un procede d'obtention de
la L-N-(biphenyl-4-yl acetyl) glutamine et de son chlorhydrate,
caracterise en ce que l'on fait reagir un halogenure de l'acide
(biphenyl-4-yl) acetique et la L-glutamine pour obtenir la L-N-
(biphenyl-4-yl acetyl) glutamine que l'on peut, si necessaire,
salifier par addition d'acide chlorhydrique.
L'invention s'etend a un procede d'obtention de la
L-N- ~-m~thyl (biphenyl-4-yl acetyl ~ glutamine, caracterise en
ce que l'on fait reagir un halogenure de ~-methyl (biphenyl-4-
yl) acetyle avec la L-glutamine, pour obténir la L-N-(a-methyl
biphenyl-4-yl acétyl) glutamine.
L'invention s'etend ~ un procede de preparation de la
L-N- ~p.cyclohexyl phenyl) acety ~ glutamine, caracterise en ce
que l'on fait reagir un halogenure de (p.cyclohexyl phenyl)
acetyle avec la L-glutamine pour obtenir la L-N- ~p.cyclohexyl
phenyl) acety ~ glutamine.
L'invention s'etend a un procede de preparation de la
L-N- ~-methyl (p.cyclohexyl phenyl) acety ~ glutamine, caracte-
rise en ce que l'on fait reagir un halogenure de a-methyl
(p.cyclohexyl phenyl) acetyle avec la L-glutamine pour obtenir
la L-N- ~-methyl (p.cyclohexyl phenyl) acety ~ glutamine.
L'invention s'etend encore â un procede d'obtention
de la L-N- ~-methyl (4-cyclohexyl cyclohex-l-enyl) acety ~
`` lO91Z49
glutamine, caracteris~ en ce que l'on fait reagir un halogenure
de 2-(4-cyclohexyl cyclohex-l-enyl) acetyle avec la L-glutamine
pour obtenir la L-N- ~-methyl (4-cyclohexyl cyclohex-l-enyl)
acety ~ glutamine que l'on peut, si necessaire, convertir en
son sel de sodium par action de l'hydroxyde de sodium.
L'invention s'etend encore a un procede d'obtention
du L-N-(biphenyl-4-yl acetyl) glutaminate d'ethyle, caracterise
en ce que l'on soumet la L-N-(biphenyl-4-yl acetyl) glutamine
a l'action du sulfate d'ethyle en presence d'ethanolate de
sodium.
L'invention s'etend aussi aux N-acyl-glutamines de
formule g~n~rale I:
A - B - ICH - CONH - CH - CH2 CH2 CONH2
R COORl
dans laquelle les substituants A, B, R et Rl sont
definis comme ci-dessus,
chaque fois qu'elles sont obtenues selon le procede decrit
precedemment.
On peut citer a titre de composes actuellement
preferes les compos~s suivants:
- le L-N-(biphenyl-4-yl acetyl) glutaminate d'ethyle;
- la L-N-(biphenyl-4-yl acetyl) glutamine et son chlorhydrate;
- la L-N- ~-methyl (biphenyl-4-yl acetyl ~ glutamine;
- la L-N- ~ p.cyclohexyl phenyl) acety ~ glutamine;
- la L-N- ~-methyl (4-cyclohexyl cyclohex-l-enyl) acety
glutamine,
- la L-N- ~-methyl (p.cyclohexyl phenyl) acety ~ glutamine.
Les produits de depart de formule generale II sont
des produits connus. Ils peuvent notamment etre obtenus selon
les procedes decrits dans le brevet britannique 971,700 pour
les composes de formule generale II pour lesquels B est un
radical phenyle.
-- 5
lO91Z49
Les composes de formule generale II pour lesquels B
est un radical cyclohexyle ou cyclohexenyle peuvent être
obtenus selon le procede decrit dans le brevet français No.
2,059,544. Les composes de formule generale II pour lesquels
B est un radical cyclohexadienyle sont obtenus au depart d'une
4-cyclohexylcyclohex-3-ene l-one par deshydrogenation. Les
composes de formule generale II pour lesquels A et B sont des
radicaux phenyle ou phenyle substitues peuvent être obtenus par
le procede decrit dans le brevet français 1,460,659.
Les derives de glutamine de formule generale III
peuvent être la L.glutamine, la D.glutamine, la DL.glutamine
ou un ester d'alcoyle inferieur d'une des formes optiques de
glutamine.
Les exemples suivants illustrent l'invention. Ils
ne la limitent en aucune façon.
EXEMPLE 1
L-N-(~-methyl biphenyl-4-yl acetyl) glutamine
Dans un ballon a trois tubulures, on introduit
successivement sous agitation 1098 de L (t) glutamine et 37 ml
d'une solution 2N d'hydroxyde de sodium, puis apres complete
dissolution et refroidissement a ~ 10 par interposition d'un
bain d'eau glacee, 1893 de chlorure de ~-methyl (biphenyl-4-yl
acetyle). On maintient la temperature du milieu reactionnel a
10 pendant toute la duree de cette addition. Le chlorure
d'acide disparaft progressivement. Apres 7 heures de reaction
sous agitation, on dilue le melange r~actionnel avec 2 litres
d'eau et on amene le pH a 1 par addition d'acide chlorhydrique
concentre.
Le melange est alors mis sous agitation pendant une
heure tout en refroidissant aux environs de 0. Le precipite
apparu est ensuite separe par filtration, lave a l'eau jusqu'a
1~91249
disparition des ions chlores et seche sous vide. On obtient
ainsi 18g8 de produit brut que l'on purifie par recristalli-
sation du benzène. On recueille alors 9g de L-N-(~-methyl
biphenyl-4-yl acetyl) glutamine pure, fondant a 148-150. Le
rendement est de 34%.
Spectre IR: absence de bande carbonyle correspondant
au carbonyle du chlorure d'acide de depart.
Analyse C20H22N24 = 354-41
Le compose cristallise en retenant un peu d'eau.
C H N%
Calcule 67.78 6.25 7.90
Trouve 66.48 6.32 7.76
Le chlorure de a-methyl (biphenyl-4-yl acetyle) peut
être obtenu de la maniere suivante:
On met en suspension dans 225 ml de benzene 16g7
d'acide a-methyl biphényl-4-yl acétique puis 16g3 de penta-
chlorure de phosphore par petites portions. Une fois cette
addition achevée, on poursuit l'agitation de la suspension
pendant 4 heures. On obtient ainsi une solution totale du
melange. On distille ensuite le solvant sous pression réduite.
Le résidu sec est lavé trois fois au benzene et cristallise par
repos. On recueille par filtration 18g3 du chlorure d'acide
que l'on seche sommairement et utilise sans autre purification
pour le stade ultérieur de la synthese.
EXEMPLE II
L-N-(biphényl-4-yl acetyl) glutamine
En operant selon le mode operatoire de l'exemple I et
en utilisant 5g75 de chlorure d'acide (biphenyl-4-yl) acetique
et 3g65 de L-glutamine comme matieres premieres, on obtient 6g7
de L-N-(biphenyl-4-yl acetyl) glutamine brute. Celle-ci apres
recristallisation du benz~ne, fournit 5g2 de compose pur
fondant a 203-204.
-- 7
lO91Z49
Analyse:Cl9H20N24 = 340.38
C H N%
Calcule 67.05 5.92 8.23
Trouve 67.08 5.95 8.00
Spectre IR: compatible avec la structure.
EXEMPLE III
L-N-(biphenyl-4-yl acetyl) glutaminate d'ethyle
Dans un ballon tricol pourvu d'une amenee de gaz
inerte, on introduit Og23 de sodium finement decoupe puis 50 ml
d'ethanol. Une fois la reaction terminee, on ajoute 3940 de
L-N-(biphenyl-4-yl acetyl) glutamine obtenue a l'exemple II.
Il se forme une suspension de L-N-(biphenyl-4-yl ac~tyl) gluta-
minate de sodium que l'on dilue par addition supplementaire de
50 ml d'ethanol. On ajoute alors goutte a goutte 197 de sul-
fate d'ethyle et porte le melange au reflux du solvant pendant
2 heures et demi. La solution claire obtenue est refroidie à
temperature ordinaire et le solvant est evapore a sec sous
vide. Le residu est repris par 50 ml d'eau. La fraction inso-
luble est separee par filtration, lavee a l'eau et sechee. On
recueille ainsi 295 de L-N-(biphenyl-4-yl acetyl) glutaminate
d'ethyle, fondant a 160 environ. Apres recristallisation de
l'ethanol, le produit pur fond a 166.
EXEMPLE IV
L-N- ~ p.cyclohexyl phenyl) acety ~ glutamine
Par application du mode operatoire de l'exemple I, au
depart de 2192 de L-glutamine et de 34957 de chlorure de (p.
cyclohexyl phenyl) acetyle, on obtient 1898 de L-N- ~ p.cyclo-
hexyl phenyl) acety ~ glutamine brute qui fournit apres recris-
tallisation d'un melange eau-acetone, un premier jet pesant 9g8
de point de fusion 172. Son pouvoir rotatoire est ~ ~ 2D2 ~
174 (C=l % DMSO)
lO~Z49
AnalyseCl9H26N24 ~ 346-42
C H N%
Calcule65.88 7.56 8.09
Trouve65.31 7.38 8.04
Spectre IR: en accord avec la structure.
EXEMPLE V
L-N- ~ -methyl (p.cyclohexyl phenyl) acety ~ glutamine
En utilisant le mode operatoire de l'exemple I au
depart de 6943 de L-glutamine et de 1192 de chlorure de 2-(p.
cyclohexyl phenyl) propionyle, on obtient 695 de L-N- ~-methyl
(p.cyclohexyl phenyl) acety ~ glutamine brute. On peut, en
outre, recuperer 496 de l'acide de depart des liqueurs meres
benzeniques.
Le produit brut est redissout dans le minimum de
benzene chaud et filtre a chaud. Par refroidissement, le
produit se separe sous forme cristallisee. On laisse reposer
une nuit en glaciere et on separe par filtration puis sechage
591 de produit pur. La L-N- ~-methyl (p.cyclohexyl phenyl)
acety ~ glutamine fond a 155-156. Le produit cristallise avec
1/2 molecule d'eau.
Analyse C20H284N2 - 360-47 + l/2 mol eau
C H N%
Calcule 65.02 7.64 7.58
Trouve 64.94 7.38 7.81
Spectre IR: bande carbonyle a 1705 cm~1
bandes imino (NH) a 3420, 3340 et
3240 cm~1
bande amide a 1650 cm l
bande amide secondaire a 1510 cm l
absence de bande carbonyle dûe au chlorure d'acide
de depart.
1091249
EXEMPLE VI
L-N- ~-methyl (4-cyclohexyl cyclohex-l-enyl) acety
glutamine
En utilisant le mode operatoire de l'exemple I au
depart de 18985 de chlorure de 2-(4-cyclohexyl cyclohex-l-enyl)
propionyle et de 10995 de L-glutamine, on obtient 798 de L-N-
~-methyl (4-cyclohexyl cyclohex-l-enyl) acety ~ glutamine
fondant a 170.
On dissout ensuite 3965 du produit brut dans 20 ml
d'hydroxyde de sodium 0.005 N. Le produit se dissout complete-
ment. On evapore le solvant sous vide. On obtient ainsi le
L-N- ~-methyl (4-cyclohexyl cyclohex-l-enyl) acety ~ glutami-
nate de sodium.
Analyse C20H32N24 - 364.49
C H N%
Calcule 65.91 8.85 7.68
Trouve65.98 8.55 7.56
Spectre IR: bandes a 2500-3100 cm 1 (hydroxyle du
carboxyle)
bande a 1730 cm 1 (carbonyle du
carboxyle)
bande a 1595 cm 1 (amide primaire)
bande a 1540 cm 1 (amide secondaire)
EXEMPLE VII
Etude pharmacologique des composés de l'invention
A) Recherche d'une activite ulcerigene
Methode
On constitue des lots de rats m~les de souche Sprague
Dowley pesant environ 170 9 au jour de l'essai, et on les main-
tient dans une piece a temperature constante entre 18-20. Les
animaux sont nourris avec une alimentation riche en glucides
pendant la periode d'essai. Un lot reçoit exclusivement le
sirop de gomme utilise comme solvant. Les autres lots reçoi-
-- 1 0 --
~09lZ49
vent par voie orale une fois par jour pendant 4 jours lescomposes à tester à la dose de 40 ou de 80 mg/kg en suspension
dans le sirop de gomme. Un autre lot reçoit a titre de compa-
raison de l'indom~thacine à la dose de 3 mg/kg.
18 Heures apres la derniere administration, les rats
sont tues et les estomacs et intestins grêles sont prelevés,
laves à l'eau et etales. On recherche d'une maniere syste-
matique les lesions eventuelles des muqueuses gastriques et
intestinales a l'aide d'une loupe binoculaire. On etablit le0 code suivant pour l'appreciation des lesions:
pour un simple oedeme
~+ pour une lesion superficielle punctiforme ou pour
un simple sillon
~-l pour une lesion superficielle etendue
~t~t pour une lesion profonde
On ajoute en outre 1/4 de + pour toute lesion
hemorragique.
L'index ulcereux est donc etabli sur chaque estomac
en multipliant le nombre de lesions par le nombre de ainsi
determines. Une valeur moyenne est calculee selon la m~thode
statistique de Student pour chaque lot. Dans ces conditions,
la comparaison entre les differents agents anti-inflammatoires
tient compte a la fois du nombre ou du pourcentage d'animaux
leses et aussi de l'index ulcereux qui reflete la severite des
lesions lorsqu'elles sont presentes.
Resultats
Les resultats obtenus montrent qu'aux doses utili-
sees, les composes, objet de la presente invention, ont une
action ulcerigene tres faible sur la muqueuse gastrique. Les
lesions occasionnees apres un traitement de 4 jours sont du
même ordre de grandeur que celles provoqu~es par l'Indometha-
cine a la dose de 3 mg/kg. On observe, en outre, aucune lesion
-- 1 1 -
loalz4s
de la muqueuse intestinale. Au contraire, les essais paral-
leles effectues avec une dose de 20 mg/kg d'acide niflumique,
montrent une nette action aggressive a la fois sur la muqueuse
gastrique et sur la muqueuse intestinale. On constate que tous
les estomacs presentent des ulcerations et la severite des
ulcerations se revele être 10 fois plus grande que celle des
composes de l'invention.
En outre, l'acide niflumique provoque chez tous les
animaux des ulcerations de la muqueuse intestinale prenant tres
frequemment la forme de sillons plus ou moins etendus pouvant
aller jusqu'à la perforation. Le tableau ci-apres rassemble
les principaux resultats.
B) Action anti-inflammatoire
L'action anti-inflammatoire des composes selon l'in-
vention a et~ mise en evidence par les techniques suivantes:
a) oedeme a la Carraghenine (methode de Winter,
Proceed. Soc. Exp. Biol. Med. 111 (1962) 544)
La dose active moyenne sur ce test des composes de
l'invention est de l'ordre de 40 mg/kg alors que celle de la
phenylbutazone est de 80 mg/kg environ.
b) oedeme au Kaolin (methode de Hillebrecht,
Arzneimittel Forsch. 4 (1954) 607)
A une dose totale de 190 mg/kg, les composes de
l'invention diminuent d'environ 50% l'oedeme cause par une
injection intra-plantaire de Kaolin. L'activite sur ce test
est du même ordre de grandeur que la phenylbutazone.
c) erytheme aux rayons ultra-violet (methode de
J.C. Le Douarec, Rev. Franç. Etudes Clin. 13 (1968) 631)
A la dose de 24 mg/kg par voie buccale, les composes
de l'invention diminuent de 50% l'erytheme provoque par les
rayons ultra-violet.
- 12 -
109~Z49
X o o o--,,, o
X +,- . o~ o
C~ ~ _ ~ ~ 0 Ln oo
o o o ~ o ~ o
o +, o ~ oZ +~ Z o +, oZ
LLI 00 Ln O ~ V ~S~ U~LLI
11~ O _ N .... S
1-- hl N 1~ 0LO O Ln O
Cl~ ~ ~ N 15~ t~ O ~ ~
~0 CC
~ ~' ~
U~ O O
C:l~ +1 +1 +1 +1 0+1 +1 1_
Ct~ ~ N N C~l N V ~ ~
C~ . 1
., ~ r~ _ co -o ~ o
~n E +l +l +l +l . +l +l O
N ~ d O OC~
, +l ~ 11~ Lt~ d- d V ~ U~(r)
E c~
~D ~t ~O _ r
+l +l +l +l +l +l
~ N I~ I~ I~ -- ~ Z
i-
x x ~ z
I~J ~ E a) _ ~ z '1:
S ~ ~ o a~ ~ v a~ ~ ~ ~, ~ ~,
~ o o ~ ~ ~ ~:
I_ a) -- ~7) ~ ~) ~ I ~7 ~
'C-~ ~ a) E E ~ E z E I-- E
~ o ~L E o o o o oa) o s ~ ~
I_ ~ O Q ~ ~ ~ CO~ N O O
L ~I E E u z
-- 1 3
109124~
C) Toxicite aiguë
Les composes de l'invention ont ete administres a
doses croissantes a des lots de 10 souris de souche Swiss CD
pesant environ 20 9, par voie buccale. Les doses administrees
s'êchelonnent entre 1 et 4 g/kg. Apres 8 jours d'observation,
on denombre les morts eventuelles. La toxicite s'avere etre
tres faible. Même à la dose de 4 g/kg, la dose lethale moyenne
n'est pas atteinte.
EXEMPLE VIII
Compositions pharmaceutiques
1) Comprimes a 150 mg de L-N-(a-methyl biphenyl-4-yl acetyl)
glutamine par unite
L-N-(oL-methyl biphenyl-4-yl acetyl) glutamine ......... 1500 9
amidon de bl~ .......................................... 1200 9
talc ................................................... 250 9
stearate de magnesium .................................. 160 9
ethyl cellulose ........................................ 35 9
carboxymethyl cellulose ................................ 25 9
carbonate de calcium ................................... 330 9
Pour 10,000 comprimes environ finis a 350 mg.
2) Solution injectable de L-N-~-methyl (cyclohexyl cyclohex-
l-enyl) acety~7 glutaminate de sodium
L-N-~-methyl (cyclohexyl cyclohex-l-enyl)
acety~7 glutaminate de sodium ........................ 52 9
p.hydroxy benzoate de methyle .......................... 0.1 9
p.hydroxy benzoate de propyle .......................... 0.3 9
chlorure de sodium ..................................... 8 9
eau distillee q.s.p..................................... 1000 ml
a repartir en ampoules de 4 ml.
-- 14
1091249
Solution injectable de L-N-(a-methyl biphenyl-4-yl acetyl)
glutamine
L-N-(a-methyl biphenyl-4-yl acetyl) glutamine .......... 60 g
bicarbonate de sodium .................................. 15 g
eau distillee q.s.p. .................................. 450 ml
Le melange est maintenu sous agitation jusqu'a com-
plete dissolution puis filtr~ sur plaque de verre fritte. On
ajoute au filtrat une solution de 0.4g de p.hydroxybenzoate de
methyle dans 550 ml d'eau.
Les solutions reunies sont filtrees a nouveau puis
reparties en ampoules de 4 ml.
- 15 -