Note: Descriptions are shown in the official language in which they were submitted.
10~1S~7
~ a présente invention a pour objet de nou~eaux dérivés
de l'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-(amino 4-thiazolyl acétamido)
céphalosporanique de formule I:
NH-R
N
~ ~ (I)
cH2~ H \ ~ S ~ CH2-0-C-NH-R
C02A
dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un groupement
facile~ent éliminable par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse,
R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ayant de 1
à 4 atomes de carbone et A représente soit un atorne ~'hydrogène,
soit un équivalent de métal alcalin alcalino-terreux ou de magné-
sium, soit un équivalent de base organique aminée.
Comme groupement facilement éliminable par hydrolyse
acide ou par hydrogénolyse que peut représenter R, on peut citer
les groupements tert-butoxy carbonyle, trityle, benzyle, dibenzyle,
trichloroéthyle, carbobenzyloxy, formyle ou phtaloyle.
Parmi les valeurs de R1, on peut citer les radicaux
méthyle, éthyle, propyle, isorpopyle, butyle, sec-butyle, tert-
butyle.
Parmi les valeurs de A, on peut citer notamment un
équivalent de sodium, de potassium, de lithium, de calcium ou de
magnésium; parmi les bases organique~ qui peuvent etre représentée~
par A, on peut citer la triméthylamine, la triéthylamine, la
méthylamine, la propylamine, la N,N-diméthyl éthanol amine ou la
tris-(hydroxyméthyl) méthylamine.
~ 'invention a notamment pour objet les prodults de
formule I dans laquelle R est choisi dans le groupe constitué par
. .
`; ' 1094547
les groupements tert-bu-toxy carbonyle, trityle, dibenzyle
trichloro éthyle et carbobenzyloxy~
~ 'invention a notamment encore pour objet les produits
de formule I, dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou
un groupement trityle, R1 représente un atome d'hydrogène ou un
radical méthyle et A représente un atome d'hydrogène.
Parmi les produits de formule générale I, on peut citer
en parti.culier les produits décrits ci-après dans les exe~ples et
particulièrement l'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7 ~ -/2-(2-amino
4-thiazolyl) acétamido/ ceph-3-ème 4-carboxylique.
Il est entendu que les produits de formule I précédem-
ment cités peuvent exister:
- Soit sous la forme indiquée par ladite formule I;
- Soit SOU8 la forme de produits de forrnule Iz: .
N
)~
S N-H
CH2-1-NH (Iz)
o F~ ~CH2 0- 1 1-NH-~
C 02A o
dan~ laquelle R, R1 et A ont la signification précitée.
~ 'invention a également pour objet un procédé de prépa-
ration de ces nouveaux dérivés de l'acide 3-carbaMoyloxyméthyl 7-
(amino 4-thiazolyl acétamido) céphalosporanique de formule I. Ce
procédé de préparation est caractérisé en ce que l'on traite:
- Soit l'acide 7-amino céphalo~poranique de formule II:
~9~S4~
~I2N ~ S~ (II)
O '~ \~\CH20Ac
C02H
d'abord par un alcoolate de ~étal alcalin dans un alcool inférieur,
puis par un acide de formule III:
NH-R'
S N (III)
CH2-C02H
ou par un dérivé fonctionnel de cet acide de formule III, formule,
dans laquelle R' représente un groupement facilement éliminable
par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse, pour obtenir un produit
de formule IV:
NH-R'
~
(IV)
CH2-C-NH ~ S ~
O ~ ~\CH20I-I
C02A'
dans laquelle A' représente un atome de métal alcalin,
: - Soit un produit de formule V:
: .
~ 4S47
NH-R'
)~
O (V)
O \~\~ C1120~-CH3
' 2~ ~
par un alcoolate de rnétal alcalin dans un alcool inférieur, pour
obtenir un produit de f`ormule IV, produit de formule IV gue l'on
traite ensuite:
- Soit par un isocyanate de formule:
R2-N = C = O
dans laquelle R2 représente un substituant facilement éliminable
par hydrolyse, pour obtenir un produit de formule VI:
NM-R'
S ~N
~ ~ ~ S (VI)
0~ f' CH2~ NHR2
C 02A l
produit que l'on traite par un agent d'hydrolyse, puis éventuel-
lement par un acide lorsque l'on a utilisé un agent d'hydrolyse
ba3i~ue, pour obtenir un produit de formule Ia:
~0~5~7
NH-R'
N (Ia)
\-- / ,,
- \ C~2~ NH ~ ~S~
N
O ~ \~ CH20Ç-NH2
C02~
dans laquelle R' a la si~nification précitée et correspondant à un
produit de formule I, dans laquelle R représente un groupement
facilement éliminable par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse,
R1 et A représentent chacun un atome d'hydrogène;
- Soit par un isocyanate de formule:
R'1-N = C = O
dans laquelle R'1 représente un radical alkyle ayant de 1 à 4
atomes de carbone, pour obtenir un produit I'a:
NH-R'
S N
CH2- ~ , S
C02H ~ ~I R 1
dans laquel].e R' et R'1 ont la signification pr~citée et correspon-
dant à un prodult de formule I, dans laquelle R représente un
groupement facilement éliminable par hydrolyse acide ou par hydro-
génolyse, Rl représente un radical alkyle ayant de 1 à 4 atomesde carbone et A représente un atome d'hydrogène, produits de
formules Ia et I'a que l'on hydrolyse le cas échéant en milieu
` ~09~S~7
acide ou hydrogénolyse, pour obt~nir respectivement les produits
de formule Ib:
NH2
)~
S ~7
C92-If-NH ~
CH2h~-NEI2
C2H
correspondant à un produit de formule I, dans laquelle R, R1 et A
représentent chacun un atome d'hydrogène, et I'b:
NH2
S~
(I'b)
C~:~2-f-NH ~S
O ~ C~20~-NH-R
02H
dans laquelle R'l a la signification précitée et correspondant à
un produit de formule I, dans laquelle R et A représentent chacun
un atome d'hydrogène et R1 représente un radical alkyle ayant de
1 à 4 atomes de carbone et que, le cas échéant, on salifie les
produits de formules Ia, I'a, Ib et I'~ par les méthodes usuelles.
Dans un mode préférentiel d'exécution du procédé,
pour obtcnir le produit de formule IV, on traite le produit de
formule II par le méthylate de sodium dans le méthanol, mais on
peut également utiliser d'autres alcoolates de métaux alcalins,
tels que le tert-butylate de potassium. On peut également
utiliser un alcool comportant de ~ à 3 atomes de carbone.
On traite ensuite par un dérivé fonctionnel de l'acide
--6--
- 10~?45~7
de formule gén~rale III, tel que le chlorure ou l'anhydride
d'acide, ce dernier pouvant atre forlDé in situ par action du
chloroformiate d'isobutyle sur l'acide. On peut également
utiliser d'autres halogénures ou encore d'autres anhydrides
formés in situ par action d'autres chloroformiates d'alcoyle,
d'un dialcoylcarbodiimide ou d'un dicycloalcoyle carbodiimide,
tel que le dicyclohexylcarbodiimide. On peut également utiliser
d'autres dérivés d'acides, tels que l'azide d'acide, :L'amide
d'acide ou un ester d'acide formé, par exemple, avec l'hydroxy
succinimide, le paranitrophénol ou le 2-4 di-nitrophénol. Dans
le cas où la réaction s'effectue avec un halogénure de l'acide
de formule générale III ou avec un anhydride, on procède, de
préférence, en présence d'un agent basique.
Cornme agent basique, on peut choisir, par exemple, un
carbonate acide ou un carbonate de métal alcalin ou une base
organique tertiaire, telle que le méthyl morpholine, la pyridine
ou une trialcoylamine, telle que la triéthylamine.
Le produit de formule IV peut également être obtenu en
traitant le produit de formule V par un alcoolate alcalin, tel
que le méthylate de sodium dans un alcool comportant de 1 à 3
atomes de carbone.
~'action de l'isocyanate de formule:
R2 N C O
sur le produit de formule IV, est réalisée, de préférence, dans
un solvant ou un mélange de solvants inertes. On utilise préfé-
rentiellement le chlorure de methylène, mais on peut egalement
utiliser le diméthylformamide ou le tétrahydrofuranne. On peut
également opérer dans l'isocyanate pur.
~'hydrolyse du produit de formule VI est ensuite effec-
tuée préférentiellement en milieu basique, par du carbonate acide
de sodium dans l'eau. On peut cependant utiliser du carbonate
- 109~5~7
~cide de potassium ou un carbonate de métal alcalin dans l'eau
ou dans un ~élange alcool-eau. On traite ensuite préferentielle-
ment le sel obtenu par l'acide chlorhydrique dilué, pour obtenir
le produit de formule Ia. On peut également utiliser l'acide
sulfurique ou phosphorique.
On peut cependant également hydrolyser le produit de
for~ule VI en milieu acide, pour obtenir directement un produit
de formule Ia. On utilise alors un milieu tamponnée légère~ent
acide.
L'action de l'isocyanate de formule:
R'1-N = C = O
sur le produit de formule IV, est conduite, de préférence, dans
le diméthylformamide, mais on peut également utiliser le chlorure
de méthylène, le tétrahydrofuranne ou un mélange de ces solvants.
On peut également opérer dans l'isocyanate pur.
Comme agent d'hydrolyse acide auquel on soumet le cas
échéant les produits de formule Ia ou I'a, on peut citer l'acide
trifluoroacétique, l'acide forMique ou l'acide acétique. Ces
acides peu~ent être employés anhydres ou en présence d'eau.
Comme agent d'hydrogénolyse, on peut citer notamment le système
zinc-acide acétique.
On utilise, de préférence, un agent d'hydrolyse acide,
tel que l'acide trifluoroacétique anhydre ou le~ acides formique
ou acétique aqueux, pour éliminer les groupements tert-butoxycar-
bonyle ou trityle.
On utilise, de préférence, le ~ystème zinc-acide acé-
tique pour éliminer le groupe trichloroéthyle et l'hydrogénation
catalytique pour éliminer les groupes benzyle, dibenzyle et
carbobenzyloxy.
~ es produits de formules Ia, I'a, Ib et I'b peuvent être
salifiés selon les méthodes usuelles. ~a salification peut, par
109~5~7
exemple, être obtenue par action sur ces acides d'une base
minérale, telle que, par exemple, l'hydroxyde de sodium ou de
potassium ou le carbonate ou le carbonate acide de sodium ou
d'une base or~anique comme la triéthylamine.
Cette salification est réalisée, de préférence, dans
un solvant ou un mélange de solvants, tels que l'eau, le méthanol,
l'éthanol, l'acétone ou le dioxanne.
Le substituant R2 facilement éliminable par hydrolyse,
est choisi préférentiellement dan~ le groupe forrné par les
radicaux trichloroacétyle, benzyle, p-méthoxy benzyle, chlorosul-
fonyle.
~ es produits de formule générale I possèdent une très
bonne activité antibiotique d'une part sur les bactéries gram (+),
telles que 1~9 staphylocoques, les streptocoques et notamment
sur les staphylocoques pénicillino-résistants et d'autre part,
sur les bactéries gram (-) notamment sur les bactéries coliformes,
les klebsiella, les proteu~ et les salmonella.
Ces propriétés rendent aptes lesdits produits pharma-
ceutiquement acceptables à être utilisés comme médicaments dans
- 20 le traitement des maladies à germes sensibles et plus particulière-
ment dans celui des staphy30coccies, telles que septicémies à
staphylocoques, staphylococcies malignes de la face ou cutanées,
pyodermite, plaies septiques ou suppurantes, anthrax, pligmons,
érésipèles, staphylococcies aigu8s primitives ou post grippales,
bronchopneumonie~, suppurations pulmonaires.
Ces produits pharmaceutiquement acceptables peuvent
également 8tre utllisés comme médicaments dans le traitement des
colibacilloses et infections associées, dans les infections à
Proteus, à Klebsiella et à Salmonella et dans d'autres affections
provoquées par des bactéries à gram (-).
: ~es produits de formule I, tels que définis ci-des~us,
10~45~7
pharmaceutiquement acceptables, et, notam~ent, ceux décrits
dan~ les exemples, peuvent être employés pour la préparation de
compositions pharmaceutiques renfermant, à titre de principe
actif, l'un au moins desdits produits.
Ces compositions peuvent etre administrées par voie
buccale, rectale, parentérale ou par voie locale en application
topique sur la peau et les muqueu~es.
Elles peuvent être solides ou liquides et ~e présenter
SOU9 les forme~ pharmaceutiques couramment utilisées en médecine
humaine, comme, par exemple, les comprimés, simple~ ou dragéifiés,
le~ gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations
lnjectables, les pommades, les crèmes, les gel~; elles sont
préparées selon les méthodes usuelles. ~e ou les principes
actifs peuvent y être incorporé~ à des excipients habituellement
employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc,
la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium,
le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras
d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les
glycols, les divers agents mouillants, dispersant3 ou émulsifiants,
les conservateurs.
La dose administrée est variable selon l'affection
traitée, le su~et en cause, la voie d'administration et le pro-
duit considéré. Elle peut être, par exemple, compri~e entre
0,250 g et 4 g par jour, par voie orale, chez l'homme avec le
produit décrit à l'exemple 2 ou encore comprise entre 0,500 g et
1 g, trois fois par jour, par voie intramu~culaire, avec le pro-
duit décrit à l'exemple 4.
Le procédé de l'invention permet d'obtenir, à titre de
produits industriels nouveaux et notamment à titre de produits
intermédiaires necessaires à la préparation des produits de
formule I~ les produits de formule générale:
.
- ~094547
NH~R'
S\5(~
CH2-~-NH ~ S ~
N ~ CH2-B
C02A l
dans laquelle R' représente un groupement facilement éliminable
par hydrolyse acide ou hydrogénoly~e, A' représente un atome de
métal alcalin et B représente un atome d'hydrogène ou un radical
-~-NH-R2
- dans lequel R2 repré~ente un groupement facilement éliminable par
hydrolyse .
~ es produits de formule III peuvent être préparés par
les réactions classiques de protection de la fonction amine
appliquées à l'acide 2-amino 4-thiazolyl acétique ou a un de se~
ester. Un exemple d'une telle préparation est décrit dans la
partie expérimentale.
hes produits de formule V sont préparé~ par action d'un
produit de formule III sur l'acide 7-amino céphalosporanique. Un
e~emple d'une telle préparation est décrit dans la partie expé-
rimentale.
Les exemples suivant~ illustrent l'invention sans
toutefoi~ lui conférer aucun caractère limi-tatif.
Exemple 1 : Acide 3-carbamoyloxvméthyl 7~ -/2-(2-tritylamino 4-
thiazol~ acétamido/ ceph-3-ème 4-carboxyllque
Stade A : Sel de sodium de l'acide 3-hydrox~méthyl 7~ -/2-(2-tri-
_______ ________~___________________ ____ ____ ___ ____________
t~lamino 4-thiazol~l) acétamido~ ce~h-3-ème 4-c~rbox~ ue:
~ ____~___________ ____________ ___ ___________ ____ __ _,
- ` 11
. . _ _
10~4S~7
1) 2~ g d'acide 7-amino céphalosporanique sont mis en
suspension dan~ 1250 cm3 de méthanol ~ec. On ajoute progre~sive-
ment à -20C, 10 g de méthylate de sodium SOU9 atmosphère inerte
et sous agitation. ~e mélange e3t agité 7 heures à -14C, puis
on sature de gaz carbonique par addition de carboglace
2) On prépare séparé~ent l'anhydride mixte de l'acide
2-tritylamino 4-thiazolyl acétique en procédant comme suit:
12,5 cm3 de N-méthyl morpholine sont ajoutés à une
suspension agitée à température ambiante de 44,5 g d'acide 2-
tritylamino 4-thiazolyl acétique dans 900 cm3 de tétrahydrofuranne.
Le mélange e~t refroidi à -25~C et on ajoute 14,5 cm3 de chloro-
formiate d'isobutyle en agitant vigoureusement et en maintenant la
température à -20C. On ~iltre trois minutes après la fin de
l'addition. ~a phase liquide est ajoutée aussitôt au milieu
réactionnel obtenu dan~ 1), qui est agité à -20C. On ajoute
de m~me les lavages et on poursuit l'agitation à -20C pendant
30 minutes. On ~aintient ensuite à +5C une nuit.
On verse le mélange réactionnel très lentement dans
environ 10 litres d'éther isopropylique ~ec. On laisse reposer
la suspension 2 heures. On filtre, lave à l'éther isopropylique,
sèche. On obtient 48,2 g de produit attendu.
Stade B : Acide 3-carbamo~lox~méthyl 7@ -~2-l2-trit~lamino 4-
_______ _______________ ___ ____ ___ __ __ ______ _________ .
thiazol~ll acétamido~ ce~h-3-ème 4-carbox~ ue:
- _______ _ __________ ___ ________________ ;_ __
8 g de pxoduit brut obtenu au stade précédent sont
ajoutés, à température ambiante et sous agitation à une æolution
de 8 cm3 d'isocyanate de trichloroacétyle dan~ 160 cm3 de chlorure
de méthylène ~ec. On agite le mélange réactionnel 15 minute~,
puis ajoute 1,6 litre dlune solution de carbonate acide de sodiu~
à 6~ dans l'eau. On poursuit l'agitation une nuit à température
~0 ambiante. On extrait à l'acétate d'éthyle et élimine la phase
organique obtenue. On acidifie la phase aqueuse par de l'acide
chlorhydrique 6 N jusqu'à pH 2 en pré~ence d'acétate d'éthyle.
-12-
~0~5~7
La phase organique est lavée à l'eau, séchée et concentrée ~OU8
pression réduite jusqu'à 30 cm3. Le produit est précipité par
addition d'éther isopropylique, filtré et séché.
On obtient 2,7 g de p~oduit attendu fondant avec décom-
po~ition aux environs de 200C.
SPectre-ultra-violet : (dans alcool éthylique et diméthyl sulfo-
xyde).
Max. = 265 nm; El = 142 (~ ~ 9300).
Chromatographie sur couche mince : (acétate d'éthyle-alcool éthy-
lique-~au-acide acétique) (50-45-4~ Rf = 0,40.
Exemple 2 : Acide 3-carbamoyloxy~néthyl 7~ -/2-(2-amino 4-thiazolyl)
acétamido/ ceph-3-ème 4-carboxylique
On chauffe à 50C, 475 mg de produit obtenu à l'exemple 1
et 4,75 cm3 d'acide acétique à 8% d'eau. On agite deux heures
à cette température. Après refroidi~ement, on ajoute 47,5 cm3
d'éther isopropylique. On triture et agite 30 minutes. On
redissout dans 6 cm3 d'acide acétique à 8% d'eau et agite en
présence de charbon actif~ On filtre et ajoute 90 cm3 d'éther
isopropylique, on filtre le produit précipité.
On obtient 182 mg de produit attendu fondant à une
température supérieure à Z60C.
Spectre Ultra-Yiolet : (dans alcool éthylique et diméthyl sulfo-
xyde).
Max. = 257 nm; E = 250.
Chromatographie sur couche mince : (acétate d'éthyle-alcool éthy-
lique-eau) (6-2-2): Rf c 0,22.
Exemple 3 : Acide 3-méthylcarbamo~loxyméthyl 7~ -/2-(2-tritylamino
4-thlazolyl) acétamidol cePh-3-ème 4-carboxylique
On mélange 80U~ azote 5 cm3 de diméthylformamide, 0,5 cm3
d'isocyanate de méthyle et à +5C, on introduit 1 g du produit
brut obtenu au stade A de l'exemple 1. ~orsque la moitié du
produit a été introduite, on ajoute 0,5 cm3 d'isocyanate de méthyle.
". lO9~S4~
Après 30 ~inutes à t5C, on rajoute 0,5 cm3 d'iso-
cyanate de méthyle. Après deux heure~ d'agitation à température
ambiante, on verse dans une aolution aqueuse de carbonate acide
de sodium (75 cm3 à 6%), extrait à l'acétate d'éthyle, lave au
carbonate acide de sodium. On rassemble les phases aqueuses,
ajoute de l'acétate d'éthyle, acidifie à pH 2 par de l'acide
chlohydrique 6 N. On décante, extrait à l'acétate d'éthyle,
lave à l'eau sèche, concentre à ~ec, empate le résidu par l'éther
i~opropylique, essore, reprend au chlorure de méthylène, décolore
par action du charbon aotif, essore, concentre, précipite par de
l'éther isopropylique et obtient 331 mg de produit fondant aux
en~irons de 210C.
Chromatographie ~ur couche mince : (acétate d'éthyle-acide acéti-
que-eau) (80-15-5): Rf = 0,42.
Exemple 4 . Acide 3-méthylcarba~oyloxyméthyl 7~-/2-(2-amino 4-
thia~olyl) acétamido/ ceph-3-ème 4-carbox,yli~e
On introduit 305 mg de produit obtenu à l'exemple 3
dans 4,5 cm3 d'acide acétique à 8~o d'eau. On chauffe à 50C et
agite deux heures. On ver~e le mélange dan~ 45 cm3 d'éther i30-
propylique, agite 30 minutes, essore, lave à l'éther isopropylique.
On obtient 180 mg de produit.
Spectre Ultra-Violet : (dans alcool éthylique et diméthylsulfoxyde).
Max. : 256 n,; E1 = 212.
Chromatographie ~ur couche mince : (acétate d'éthyle-alcool éthy-
lique-eau) (6-2-2): Rf = 0,33.
Exemple 5 : Sel de sodium de l'acida 3-h~ oxyméthyl 7~-/2-(2-tri-
tylamino 4~thiazolyl) acétamido~ ceph-3-ème 4-carboxylique
On mélange en atmo~phère inerte 300 mg d'acide 7~-12-
(2-tritylamino 4-thiazolyl) acétamido/ 3-acétoxy méthyl ceph-3-ème
4-carboxylique et 14 cm3 de méthanol. On refroidit à -18C et
agite rapidement 70 mg de méthylate de sodium en poudre. On agite
pendant 8 heure~ à -13C, pui~ ajoute de la carboglaae jusqu'à
-14-
, ~
10~45~7
saturation en gaz carbonique et ensuite 9~ cm3 d'éther isorpo-
pylique. Aprè~ repos, on essore et lave à l'éther isopropylique.
On obtient 304 mg de produit attendu contenant de~
matières minérales; le produit est purifié par dissolution dans le
tétrahydrofuranne et filtration.
Par chromatographie en couche mince (acétate d'éthyle-
acide acétique-eau) (80-15-5), on obtient le produit attendu.
Rf = 0,24.
~ 'acide 7~-/2-(2-tritylamino 4-thiazolyl) acétamido/
3-acétoxyméthyl ceph-3-ème 4-carboxylique utilisé au départ de
l'exemple 5, a été préparé comme suit:
Stade A : ~cide 2-trit~lamino 4-thiazol~l acéti~ue
_______ ____________ ________________ _____ _ __
On mélange 930 mg de 2-amino 4-thiazolyl acétate d'éthyle,
25 cm3 de chloroforme sec et 0,8 cm3 de triéthylamine et 1,65 g de
chlorure de trityle. On agite trois heures, ajoute 3 cm3 d'acide
chlorhydrique N et 5 cm3 d'eau, agite, décante, ajoute 5 cm3 d'aci-
de chlorhydrique N et 5 cm3 d'eau, décante, sèche et concentr~
à ~ec.
On a~oute au résidu 10 cm3 de dioxanne et 6 cm3 de
soude N, agite à 50C, puis une nuit à température ambiante,
chas~e le solvant, dilue à l'eau, lave à l'éther, acidifie avec
0,5 cm3 d'acide acétique, laisse cristalliser, essore et obtient
1,33 g d'acide 2-tritylamino 4-thiazolyl acétique attendu, que
l'on peut purifier par empâtage à l'éther. F = 220C.
Stade B : Acide 7~-/2-(2-trlt~lamino 4-thiazol~ acétamido~ 3-
_______ _______ ___________ ________________ __________ ___
acetox~ méth~l ce~h-3_eme 4-carbox~ ue:
On mélange 801 mg d'acide 2-tritylamino 4-thiazolyl
acétique, 10 cm3 de tétrahydrofuranne sec et 2 cm3 d'une solution
molaire de N-méthyl morpholino dans le tétrahydrofuranne. On
agite, refroidit à -20C et ajoute lentement 2 cm3 d'une solution
molaire de chloroformiate d'isobutyle dans le tétrahydrofuranne,
-15-
- 10945~7
agite et ajoute une solution de 544 mg d'acide 7-amino cépha-
losporanique dans 2,4 cm3 d'une solution molaire N-méthyl mor-
pholine dans le tétrahydrofuranne et 10 cm3 d'eau. On agite en
laissant réchauffer, élimine le solvant, dilue dans l'eau, ajoute
2 cm3 d'acide chlorhydrique 2 N, essore, sèhce et isole 1,~6 g
de l'acide attendu.
Exemple 6:
On a réalisé une préparation pour injection de formule:
- Acide 3-carbomoyloxyméthyl 7~-/2-(2-amino 4-thiazolyl) acétami-
do/ oeph-3-eme 4-carboxylique ............................... .500 mg;
- Excipient aqueux stérile q. s. p. ......................... ...5 cm3.
xem~le 7:
On a ~réparé des gélules répondant à la formule:
- Acide 3-carbamoyloxyméthyl 7~-/2-(2-amino 4-thiazolyl) acétami-
do/ ceph-3-ème 4-carboxylique ..... ~............................... 250 mg;
- Excipient q. s. pour une gélule terminée à ................ 400 mg.
Etude pharmaco1o~ique
Etude pharmacologique des produits de l'invention
A) Activité in vitro:
_________________
; Méthode des dilutions en milieu li~uide:
----,----_____________
On prépare une série de tubes dans lesquels on répartit
une même quantité de milieu nutriti~ stérile. On distribue dans
chaque tube des quantités croissantes du produit à étudier, puis
chaque tube est ensemencé avec une souche bactérienne. Après
incubation de 24 heures ou 48 heures à l'étuve à 37C, l'inhibi-
tion de la croi~ance egt appréciée par tran~illumina-tion, ce (lui
permet de déterminer les concentrations minimales inhibitrices
(G. M. I.) exprimées en ~g/cm3.
~es résultats suivants ont été obtenus:
-16-
10~4547
Produit de l'exem}~le 2
. . .___ . .. ....... ... .. .
C M I en_U~
24 H 48 H
______________________________________________. __________ _______
Staphylococcus aureus UC 1061 Pen. sensible 2 2
______________________________________________ .__________ _______ ~
Staphylococcus aureux UC 1128 Pen. ré~istant 2 3
______________________________________________. __________ ________
Staphylococcus aureus Exp. n ~4 146 ......... 2 3
______________________________________________. .__________ _______
Staphylococcus aureux A~CC 6538 .............. 1 1
______________________________________________. __________ _______
Streptococcus pyogenes A 561 ................. 0,1 0,1
__ __________________________________________. _______ __ ________
Streptococcus faecalis 5432 .................. 5 20
______________________________________________ __________ _______
Bacillus subtilis A~CC 6633 .................. 0,2 0,2
; ____________________ _________________________ __________ ________
ERcherichia Coli S~ UC 1020 .................. 2 2
______________________________________________ __________ ________
:: Escherichia Coli RT UC 1261 .................. 2 2
_____________________ _______________________ ___________ ________
Escherichia Coli Exp. ~026B6 ................. 5 5
____________________________________________ __________ _ _____
Escherichia Coli RG R 55 123 D ............... 20 20
__________________________ ___ _______________ ___________ ___ ____
Salmonella Typhimurium ~20 .................... 2 2
______________________________________________ ___________ ________
Klebsiella pneumoniae Exp. 52 145 ............. 1 1
_______________________________ _____________ ___________ ________
Klebsiella pneumonlae 2536 R .................. 5 5
: -17-
" .
lO9~S~7
Produit de l'exem~le 4
_________________ ____
C M. I e~ g/m]
24 H 48 H
______________________________________________ _________ _______
Staphylococcus aureus UC 1061 Pen. sensible 3 5
______________________________________________ _________ ________
Staphylococcus aureus UC 1128 Pen. résistant 1010
_________________________________ _ ________ _ _________ ________
Staphylococcus aureus Exp. n~ 54 146 ......... 5 10
_____________________________ _______________ _________ ________
Staphylococcus aureus A~CC 6538 .............. 2 3
______________________________________________ ______ _ ________
Steptococcus pyogenes A 561 .................. 0,2 0,~
___________ ___________ _____________________ _________ ________ .,
Bacillus subtilis A~CC 6633 .................. 0,5 0,~
______________ ______________________________ _________ ________
Escherichia Coli ST UC 1020 .................. 3 3
______________________________________________ ___ ____ ________
E~cherichia Coli R~ ua 1261 .................. 2 3
________________ ____________________________ _______ _______
Escherichia Coli Exp. T026B6 ....................10 10
___________________ __________________________ _________ ________
Escherichia Coli RG R 55 123 D ................. 20 20
l _____________________________~ _____________ _________ ______~_
Klebsiella pneumoniae Exp. 52 145 ............... 2 2
___________________ _________________________ _________ ________
Proteus mirabilis (Indol -) A 235 ............... 5 5
_____________________________________________ _________ _._______
Salmonella Typhimurium 420 ...................... .
--18--
- 10~ 5~7
B) Activité in vivo:
_
1) Etude d'une sta~lococcie ex~erlmentale:
On a étudié l'action du p~oduit de l'exemple 2 sur une
staphylococcie expérimentale de la souris. On a infecté des lots
de dix ~ouris mâles d'un poids moyen de 22,5 g, par injection
intrapéritonéale, à l'aide de 0,5 ml d'une culture de 24 heures
de staphylococcus aureus 54 146,en bouillon nutritif Pasteur
diluée au 1/4,5 avec de l'eau di~tillée. On a administré par
injection sous-cutanée, une heure, cinq heures et vingt-quatres
heures après l'infection une quantité déterminée de produit.
On a noté la mortalité pendant huit jours.
~ es résultats ont été les suivants:
Dose admini~trée Mortalité aprèsSouris
à ------- ~~~~~ r--- survivante~
chaque injection 6 H 45 21 H 30 52 H au 8ème jour
___.._____________________. .________. ________ _____ ____. _________
Témoins ..... 0................ 1 9 0/10
_________________________. ._________ ________ _____ ______________
0,25 ~g 1 9/10
_________________________. .__ ______ ____~___ _____ ______________
200,5 mg 10/10
_____ ___________________. ._________ ________ _____ ________ _____
- 1 mg 10/10
______ ..__________________, ._________ ________ _____ ______________
2 mg 10/10
2) Infection ex~érimentale à Proteus Mirabilis:
_ _ _ _ _ _ _
~; On a étudie l'action du produit de l'exemple 2 sur une
infection expérimentale à Proteus Mirabilis de la souris. On a
infect~ des lots de dix ~ouris mâles d'un poind moyen de 21,5 g
par injeetion intrapéritonéale de 0,5 ml d'une culture de 24 heures
en bouillon nutritif Pasteur de la souche de Proteu-s Mirabilis
n A 235 diluée au 1/4 par de l'eau distillée.
..
-1 9-
, ,
~09~5~7
On a ad~inistré, par injection sou~-cutanée, une heure,
cinq heure~ et vingt-quatre heures après l'infection, une
quantité déterminée de produit.
On a noté la mortalité pendant huit jours.
~es résultats ont été les quivants:
. ~
Dose administrée M~rtalité après Souris
à ______________________ survivante 9
chaque injection 23 ~ 45 24 H 26 146 H au 8ème jour
__________ ______________ _________ ____ ____ ______ ______________ .,
Témoins ...... ~............. 1C 0/10
__________________________ ______~__ ____ ____ _ ___ _________,.____
0,05 mg 3 1 1 3 2/10
__________________________ ________ ____ ____ ______ ______________
0,1 mg 1 9/10
__________________________ _________ ____. ____ ___~__ ______________
0,25 mg 10/10
__________________________ ________ ____. ____ ______ ______________
0,5 mg _ _ 10/10
3) Infec_ion ex~erimentale à Esche_ichia Coli ~026B_:
On a étudié l'action du produit de l'exemple 2 sur une
infection expérimentale d'Escheri¢hia Coli de la ~ouris. On a
infecté des lot~ de dix souris mâles d'un poids moyen de 22,5 g
par injection intrapéritonéale de 0,5 ml d'une culture de 24 heures
en bouillon nutritii~ de la souche Escherichia Coli T026B6 diluée
au 1/6 par de l'eau distillée.
On a administré par injection sous-cutané une heure,
cinq heures et vingt-quatre heures après l'injection, une quantité
déterminée de produit7
On a noté la mortalité pendant huit jours.
~ e~ resultats ont été les suivants:
-20-
. .
1094S~
Dose admini~trée Mortalité après Souris
à _____________________________ survivantes
chaque in~ecti.on 21 H 3C 23~1 25 H 10 46 H 52 H au 8è~e jour
___,._____________ ________ ___ ____~ ____ _____. .______________. ,
~émoin9 ... ~ ...... î C 0/10
---------------------------------- ------~ -------- --------~---- ------------------. ~----------------------------~ l
o, 5 mg 1 1 1 11 5/1 0
_________________ _______ ___ ____~__ ____ ____, .______________
1 mg . 10/10
_________________ _____ __ ____ ._______ ____. ____ _______________
2 mg . lo/10
_________________ ________ ____ _______ ____. __~. ______________
3 m~ _ 1 1 0/1 0
--Zl--
