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DERIVES D'AMINOACIDES ET LEUR APPLICATION A TITRE DE MEDICAMENTS
La présente invention concerne de nouveaux dérivés d'aminoacides et leur
application à
titre de médicaments. Ces dérivés présentent une activité inhibitrice des
enzymes
NO-synthases produisant le monoxyde d'azote NO et / ou (au choix)
- soit une activité piégeuse des formes réactives de l'oxygène (ROS pour
"reactive
oxygen species ") ;
- soit une activité régénératrice d'antioxydants comme le glutathion ou
d'entités
piégeuses des formes réactives de l'oxygène (ROS pour "reactive oxygen
species")
et d'une façon plus générale une influence dans le statut rédox des groupement
thiols.
1o L'invention concerne donc en particulier les dérivés correspondant à la
formule générale
(I) définie ci-après, leurs méthodes de préparation, les préparations
pharmaceutiques les
contenant et leur utilisation à des fins thérapeutiques, en particulier leur
utilisation en
tant qu'inhibiteurs des NO-synthases et / ou (au choix)
- soit en tant qu'entités piégeuses des ROS ;
- soit en tant qu'agents permettant la régénération d'antioxydants comme le
glutathion ou d'entités piégeuses des ROS et intervenant d'une façon plus
générale
dans le statut rédox des groupement thiols.
Compte tenu du rôle potentiel du NO, des ROS et du métabolisme du glutathion
en
physiopathologie, les nouveaux dérivés décrits répondant à la formule générale
(I)
2o peuvent produire des effets bénéfiques ou favorables dans le traitement de
pathologies
où le monoxyde d'azote, les ROS et le métabolisme du glutathion ainsi que le
statut
rédox des groupement thiols sont impliqués, et notamment
~ troubles cardiovasculaires et cérébrovasculaires comprenant par exemple
l'athérosclérose, la migraine, l'hypertension artérielle, le choc septique,
les infarctus
cardiaques ou cérébraux d'origine ischémique ou hémorragiques, les ischémies
et les
thromboses ;
~ troubles du système nerveux central ou périphérique comme par exemple les
maladies neurodégénératives où l'on peut notamment citer les infarctus
cérébraux,
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l'hémorragie sub arachnoïde, le vieillissement, les démences séniles, y
compris la
maladie d'Alzheimer, la chorée de Huntington, la maladie de Parkinson,
l'ataxie de
Freiderich, la maladie de Creutzfeld Jacob et les maladies à prions, la
sclérose
latérale amyotrophique mais aussi la douleur, les traumatismes cérébraux ou de
la
moelle épinière, l'addiction aux opiacées, à l'alcool et aux substances
induisant une
accoutumance, les troubles de l'érection et de la reproduction, les désordres
cognitifs, les encéphalopathies, les encéphalopathies d'origine virale ou
toxique, la
dépression, l'anxiété, la schizophrénie, l'épilepsie, les troubles du sommeil,
les
troubles alimentaires (anorexie, boulimie...) ;
l0 ~ troubles du muscle squelettique et des jonctions neuromusculaires
(myopathie,
myosite) ainsi que les maladies cutanées ;
~ les maladies prolifératives et inflammatoires comme par exemple
l'athérosclérose,
l'hypertension pulmonaire, la détresse respiratoire, la glomérulonéphrite, la
cataracte,
l'hypertension portale, le psoriasis, l'arthrose et l'arthrite rhumatoïde, les
fibroses,
les amyloïdoses, les inflammations du système gastro-intestinal (colite,
maladie de
Crohn) ou du système pulmonaire et des voies aériennes (asthme, sinusites,
rhinites)
ainsi que les hypersensibilités de contact ou retardées ;
~ les transplantations d'organes ;
~ les maladies auto-immunes et virales comme par exemple le lupus, le sida,
les
2o infections parasitaires et virales, le diabète et ses complications
incluant les
rétinopathies, les néphropathies et les polyneuropathies, la sclérose en
plaques, les
myopathies ;
~ le cancer ;
~ les maladies génétiques autosomiques comme la maladie d'Unverncht-Lunborg ;
~ les maladies neurologiques associées à des intoxications (empoisonnement au
Cadmium, inhalation de n-hexane, pesticide, herbicide), à des traitements
(radiothérapie) ou à des désordres d'origine génétique (maladie de Wilson) ;
~ l'impuissance liée au diabète ;
~ toutes les pathologies caractérisées par une production ou un
dysfonctionnement de
3o monoxyde d'azote et/ou de ROS ou du métabolisme du glutathion et du statut
rédox
des groupement thiols.
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Dans l'ensemble de ces pathologies, il existe des évidences expérimentales
démontrant
l'implication du monoxyde d'azote ou d'un dysfonctionnement du métabolisme du
glutathion (Kerwin et al., Nitric oxide : a new paradigm for second
messengers, J. Med.
Chem. 38, 4343-4362, 1995 ; Packer et al., Alpha-lipoic acid as biological
antioxidant,
Free Radical Biology & Medicine 19, 227-250, 1995). Dans ce contexte, les
médicaments pouvant inhiber la formation du monoxyde d'azote, piéger les ROS
ou
rétablir la fonctionnalité biologique des groupements thiols ou du glutathion
peuvent
apporter des effets bénéfiques.
La demanderesse a déjà décrit dans des demandes de brevet antérieures des
composés
1o comportant à la fois des propriétés inhibitrices des NO-synthases et des
propriétés de
piégeage des ROS (cf. les demandes PCT WO 98/42696, WO 98/58934, WO 00/02860,
WO 00/17190 et WO 00/17191). Elle a également décrit plus récemment dans la
demande PCT WO 00/59899 des dérivés de l'acide lipoïque présentant à la fois
des
propriétés inhibitrices des NO-synthases et des propriétés régénératrice
d'antioxydants
ou d'entités piégeuses des ROS et d'une façon plus générale une influence dans
le statut
rédox des groupement thiols.
Les composés de l'invention répondent à la formule générale (I)
D\ /'NH
'NI~H
V
A-X-N ~W-Y-A'
R' ~ ~O
(I)
dans laquelle
R' représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ;
2o A et A' représentent un atome d'hydrogène ou l'un des radicaux suivants
- un radical
R~
RZ I RS
N
R3
R4 ~ R6
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dans lequel R2, R3, R4, R5, R6 représentent, indépendamment, un atome
d'hydrogène,
un halogène, le groupe OH, un radical alkyle, alkoxy, cyano, nitro ou NRgR9,
Rg et R9 représentant, indépendamment, un atome d'hydrogène, un radical alkyle
ou un
groupe -CORIO,
ou bien R8 et R9 formant ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle
éventuellement
substitué comptant de 4 à 7 chaînons et de 1 à 3 hétéroatomes incluant l'atome
d'azote
déjà présent, les hétéroatomes supplémentaires étant choisis indépendamment
dans le
groupe constitué des atomes O, N et S, ledit hétérocycle étant par exemple
azétidine,
pyrrolidine, pipéridine, pipérazine, morpholine ou thiomorpholine,
l0 Rlo représentant un atome d'hydrogène, un radical alkyle, alkoxy ou
NR11R12,
R1' et R12 représentant, indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical
alkyle,
ou bien R11 et R12 formant ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle
éventuellement substitué comptant de 4 à 7 chaînons et de 1 à 3 hétéroatomes
incluant
l'atome d'azote déjà présent, les hétéroatomes supplémentaires étant choisis
indépendamment dans le groupe constitué des atomes O, N et S, ledit
hétérocycle étant
par exemple azétidine, pyrrolidine, pipéridine, pipérazine, morpholine ou
thiomorpholine,
R~ représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou un groupe -COR13,
R13 représentant un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou alkoxy ou NRl4Rls,
2o R14 et R15 représentant indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical
alkyle, ou
bien R14 et R15 formant ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle
éventuellement
substitué comptant de 4 à 7 chaînons et de 1 à 3 hétéroatomes incluant l'atome
d'azote
déjà présent, les hétéroatomes supplémentaires étant choisis indépendamment
dans le
groupe constitué des atomes O, N et S, ledit hétérocycle étant par exemple
azétidine,
pyrrolidine, pipéridine, pipérazine, morpholine ou thiomorpholine,
et S2 n'existe pas, ou représente une liaison, O ou S ou encore un radical
NR~6, dans
lequel R16 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ;
- ou un radical
R' 7
Q
Ris /
RI9
dans lequel R17, R~g et R19 représentent, indépendamment, un hydrogène, un
halogène,
le groupe OH ou SRZO ou un radical alkyle, alkényle ou alkoxy ou un radical
NRZ~R22,
R2o représentant un atome d'hydrogène ou un radical alkyle,
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R21 et R22 représentant, indépendamment, un atome d'hydrogène, un radical
alkyle ou
un groupe -COR23,
ou bien R21 et R22 formant ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle
éventuellement substitué comptant de 4 à 7 chaînons et de 1 à 3 hétéroatomes
incluant
l'atome d'azote déjà présent, les hétéroatomes supplémentaires étant choisis
indépendamment dans le groupe constitué des atomes O, N et S, ledit
hétérocycle étant
par exemple azétidine, pyrrolidine, pipéridine, pipérazine, morpholine ou
thiomorpholine,
R23 représentant un atome d'hydrogène, un radical alkyle, alkoxy ou NR24R2s
1o R24 et R25 représentant, indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical
alkyle,
ou bien R24 et RZS formant ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle
éventuellement substitué comptant de 4 à 7 chaînons et de 1 à 3 hétéroatomes
incluant
l'atome d'azote déjà présent, les hétéroatomes supplémentaires étant choisis
indépendamment dans le groupe constitué des atomes O, N et S, ledit
hétérocycle étant
par exemple azétidine, pyrrolidine, pipéridine, pipérazine, morpholine ou
thiomorpholine,
et Q représente -OR26, -SR26 ou un radical phényle substitué par un ou
plusieurs
substituants choisis parmi un halogène, le groupe OH, un radical alkyle,
alkoxy, cyano,
vitro ou NRgR9,
2o R26 représentant un atome d'hydrogène ou un radical alkyle,
R8 et R9 représentant, indépendamment, un atome d'hydrogène, un radical alkyle
ou un
groupe -CORS°,
ou bien R8 et R9 formant ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle
éventuellement
substitué comptant de 4 à 7 chaînons et de 1 à 3 hétéroatomes incluant l'atome
d'azote
déjà présent, les hétéroatomes supplémentaires étant choisis indépendamment
dans le
groupe constitué des atomes O, N et S, ledit hétérocycle étant par exemple
azétidine,
pyrrolidine, pipéridine, pipérazine, morpholine ou thiomorpholine,
Rl° représentant un atome d'hydrogène, un radical alkyle, alkoxy ou
NRl ~R12,
Rl1 et R12 représentant, indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical
alkyle,
ou bien R11 et R~2 formant ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle
éventuellement substitué comptant de 4 à 7 chaînons et de 1 à 3 hétéroatomes
incluant
l'atome d'azote déjà présent, les hétéroatomes supplémentaires étant choisis
indépendamment dans le groupe constitué des atomes O, N et S, ledit
hétérocycle étant
par exemple azétidine, pyrrolidine, pipéridine, pipérazine, morpholine ou
thiomorpholine,
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-6-
- ou un radical
RZ~ Hs
I
O ~ T
I/ CH3
H3C ~ ~O
C H3
dans lequel R2~ représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou un
radical
aralkyle,
T représentant un radical -(CH2)m avec m = 1 ou 2 ;
- ou un radical
R2s
N
T
dans lequel R2g représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle,
aminoalkyle,
alkylaminoalkyle, dialkylaminoalkyle ou aralkyle dont le groupement aryle est
éventuellement substitué par un ou des substituants choisis indépendamment
parmi le
groupe OH, un atome halogène, un radical alkyle, alkoxy, nitro ou -
NR29R3°, dans
1o lequel R29 et R3° représentent, indépendamment, un atome
d'hydrogène, un radical
alkyle ou un groupe -COR31, ou bien R29 et R3° forment ensemble avec
l'atome d'azote
un hétérocycle éventuellement substitué comptant de 4 à 7 chaînons et de 1 à 3
hétéroatomes incluant (atome d'azote déjà présent, les hétéroatomes
supplémentaires
étant choisis indépendamment dans le groupe constitué des atomes O, N et S,
ledit
hétérocycle étant par exemple azétidine, pyrrolidine, pipéridine, pipérazine,
morpholine
ou thiomorpholine,
R3 ~ représentant un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou alkoxy ou
NR32R33,
R32 et R33 représentant, indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical
alkyle,
ou bien R32 et R33 formant ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle
2o éventuellement substitué comptant de 4 à 7 chaînons et de 1 à 3
hétéroatomes incluant
l'atome d'azote déjà présent, les hétéroatomes supplémentaires étant choisis
indépendamment dans le groupe constitué des atomes O, N et S, ledit
hétérocycle étant
par exemple azétidine, pyrrolidine, pipéridine, pipérazine, morpholine ou
thiomorpholine,
T représentant un radical -(CH2)m avec m = 1 ou 2 ;
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- ou un radical
34
N ~ R
C ~ , N 35
T ~ R
dans lequel R34 et R35 représentent indépendamment un atome d'hydrogène ou un
radical alkyle ou aralkyle dont le groupement aryle est éventuellement
substitué par un
ou plusieurs substituants tels que le groupe OH, les radicaux alkyle,
halogène, nitro,
alkoxy ou -NR36R3~, dans lequel R36 et R37 représentent, indépendamment, un
atome
d'hydrogène, un radical alkyle ou un groupe -COR3g, ou bien R36 et R37 forment
ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle éventuellement substitué comptant
de 4 à
7 chaînons et de 1 à 3 hétéroatomes incluant l'atome d'azote déjà présent, les
hétéroatomes supplémentaires étant choisis indépendamment dans le groupe
constitué
1o des atomes O, N et S, ledit hétérocycle étant par exemple azétidine,
pyrrolidine,
pipéridine, pipérazine, morpholine ou thiomorpholine,
R3g représentant un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou alkoxy ou
NR39R4°,
R39 et R4° représentant, indépendamment, un atome d'hydrogène ou un
radical alkyle,
ou bien R39 et R4° formant ensemble avec l'atome d'azote un hétérocycle
éventuellement substitué comptant de 4 à 7 chaînons et de 1 à 3 hétéroatomes
incluant
l'atome d'azote déjà présent, les hétéroatomes supplémentaires étant choisis
indépendamment dans le groupe constitué des atomes O, N et S, ledit
hétérocycle étant
par exemple azétidine, pyrrolidine, pipéridine, pipérazine, morpholine ou
thiomorpholine,
2o T représentant un radical -(CHZ)m avec m = 1 ou 2 ;
ou un radical
41
R -J
N
I
H
dans lequel R41 représente un atome d'hydrogène, le groupe OH, ou un radical
alkyle ou
alkoxy ;
- ou enfin un radical
SAS
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_g_
D représente un radical alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de
carbone,
aryle carbocyclique ou hétérocyclique à 5 ou 6 chaînons contenant de 1 à 4
hétéroatomes choisis parmi O, S et N (et notamment les radicaux thiophène,
furanne,
pyrrole ou thiazole), ledit radical aryle carbocyclique ou hétérocyclique
étant
éventuellement substitué par un ou plusieurs groupes choisis indépendamment
parmi les
radicaux alkyle, alkényle ou alkoxy linéaires ou ramifiés ayant de 1 à 6
atomes de
carbone,
ou D représente un radical NR42R43, dans lequel R4z et R43 représentant,
indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, alkényle ou
alkynyle
1o linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone ou un radical cyano,
nitro ou
amino, ou R42 et R43 forment avec l'atome d'azote un hétérocycle non
aromatique de cinq
à six chaînons, les éléments de la chaîne étant choisis parmi un groupe
composé de
-CH2-, -NH-, -O- ou -S- ;
ou encore D représente un radical -SRS, dans lequel R~ représente un radical
alkyle
linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone éventuellement substitué
par un
groupe choisi parmi : -OH, halogène, amino, cyano et aralkyle ;
X représente un radical -(CHZ)n-, -(CHZ)n-CO-, -O-(CH2)p , -S-(CH2)p ,
-CH=CH-(CH2)p- ou -CH=CH-(CH2)n-CO-,
n étant un entier de 0 à 6
2o et p étant un entier de 1 à 6 ;
W représente -O- ou -NR4s-,
et R45 représentant un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ;
Y représente un radical choisi parmi -(CHZ)t-, -(CH2)q-O-, -(CH2)q-S- et -
(CH2)q-NR46-
et R46 représentant un atome d'hydrogène ou un radical alkyle,
t étant un entier de 0 à 6
et q étant un entier de 2 à 6 ;
V représente un radical choisi parmi les radicaux -(CH2)r-,
-(CH2)r0-(CH2)s-~ -(CH2)r-S-(CH2)s-~ -(CH2)r-S(O)-(CHZ)s- et -(CH2)r-S(O)z-
(CH2)s
r étant un entier de 1 à 6,
s étant un entier de 2 à 6 ;
étant entendu que l'un de A et A' représente un atome d'hydrogène et l'autre
ne
représente pas un atome d'hydrogène ;
ou sont des sels des composés de formule générale (I) telle qu'elle est
définie ci-dessus.
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-9-
Ces composés présentent une activité inhibitrice des enzymes NO-synthases
produisant
le monoxyde d'azote NO et / ou (au choix)
- soit une activité piégeuse des formes réactives de l'oxygène (ROS pour
"reactive
oxygen species ") lorsqu'aucun de A et de A' ne représente le radical
SAS
- soit une activité régénératrice d'antioxydants ou d'entités piégeuses des
formes
réactives de l'oxygène (ROS pour "reactive oxygen species") et d'une façon
plus
générale une influence dans le statut rédox des groupement thiols, ceci dans
le cas
particulier où l'un de A ou A' représente le radical
SAS
Par alkyle, lorsqu'il n'est pas donné plus de précision, on entend un radical
alkyle
linéaire ou ramifié comptant de 1 à 12 atomes de carbone, et de préférence de
1 à 6
atomes de carbone. Par alkényle, lorsqu'il n'est pas donné plus de précision,
on entend
un radical alkyle linéaire ou ramifié comptant de 1 à 6 atomes de carbone et
présentant
au moins une insaturation (double liaison). Par alkynyle, lorsqu'il n'est pas
donné plus
de précision, on entend un radical alkyle linéaire ou ramifié comptant de 1 à
6 atomes
de carbone et présentant au moins une double insaturation (triple liaison).
Par aryle,
lorsqu'il n'est pas donné plus de précision, on entend un radical aryle
carbocyclique. Par
aryle carbocyclique ou hétérocyclique, on entend un système carbocyclique ou
hétérocyclique comprenant au moins un cycle aromatique, un système étant dit
hétérocyclique lorsque l'un au moins des cycles qui le composent comporte un
hétéroatome (O, N ou S). Par haloalkyle, on entend un radical alkyle dont au
moins l'un
des atomes d'hydrogène (et éventuellement tous) est remplacé par un atome
halogène.
Par radicaux alkylthio, alkoxy, haloalkyle, haloalkoxy, aminoalkyle, alkényle,
alkynyle,
aralkyle, on entend respectivement les radicaux alkylthio, alkoxy, haloalkyle,
haloalkoxy, aminoalkyle, alkényle, alkynyle, aralkyle dont le radical alkyle a
la
signification indiquée précédemment.
Par alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone, on entend en
particulier
les radicaux méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, sec-
butyle et
tert-butyle, pentyle, néopentyle, isopentyle, hexyle, isohexyle. Enfin, par
halogène, on
entend les atomes de fluor, de chlore, de brome ou d'iode.
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- 10-
Dans certains cas, les composés selon la présente invention peuvent comporter
des
atomes de carbone asymétriques. Par conséquent, les composés selon la présente
invention ont deux formes énantiomères possibles, c'est-à-dire les
configurations "R" et
"S". La présente invention inclut les deux formes énantiomères et toutes
combinaisons
de ces formes, y compris les mélanges racémiques "RS". Dans un souci de
simplicité,
lorsqu'aucune configuration spécifique n'est indiquée dans les formules de
structure, il
faut comprendre que les deux formes énantiomères et leurs mélanges sont
représentés.
Dans la formule générale (I), lorsque A ou A' représente le radical
Rz~ H
I 3
T
I/ CH3
H3C ~ ~O
C H3
Rz' représentera de préférence un atome d'hydrogène ou un radical alkyle et T
1o représentera de préférence le radical -(CHz)z-.
De plus, lorsque A ou A' représente le radical
34
N ~ R
C ~ , N 35
T ~ R
R34 et R35 représenteront de préférence des radicaux choisis indépendamment
parmi un
atome d'hydrogène et un radical alkyle et T représentera de préférence le
radical
-(CHz)-.
De préférence également, les composés de formule générale (I) selon
l'invention
incluront au moins l'une des caractéristiques suivantes
~ un groupe A ou A' représentant l'un des radicaux suivants
- soit le radical
R7
Rz I RS
N
R3
R4 ~ R6
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dans lequel R2, R3, R4, R5, R6 représentent, indépendamment, un atome
d'hydrogène ou un radical alkyle ou alkoxy, R~ représente un atome d'hydrogène
et
S2 n'existe pas ou représente une liaison ou S ;
- soit le radical
Ri ~
Q
Rl g ~ /
R~9
dans lequel Q représente -OR26 ou -SR26 et R", R'8 et R'9 représentent
indépendamment un atome d'hydrogène, le groupe OH, SRz° ou NRZ'RZZ ou
un
radical alkyle ou alkoxy,
R26 représentant un atome d'hydrogène ou un radical alkyle,
RZ° représentant un atome d'hydrogène ou un radical alkyle,
l0 et RZ' et R2z représentant, indépendamment, un atome d'hydrogène ou un
radical
alkyle ;
- soit le radical
RZa
N
/
T
dans lequel Rz$ représentent un atome d'hydrogène ou un radical alkyle,
aminoalkyle, alkylaminoalkyle, dialkylaminoalkyle ou aralkyle dont le
groupement
aryle est éventuellement substitué par un ou des radicaux choisis
indépendamment
parmi un radical alkyle et le radical -NR29R3o dans lequel R29 et R3~
représentent,
indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical alkyle,
T représentant un radical -(CH2)m avec m = 1 ou 2 ;
soit enfin le radical
SAS
2o ~ D représentant un radical aryle carbocyclique ou hétérocyclique à 5 ou 6
chaînons
contenant de 1 à 4 hétéroatomes choisis parmi O, S et N, ledit radical aryle
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carbocyclique ou hétérocyclique étant éventuellement substitué par un ou
plusieurs
groupes choisis indépendamment parmi les radicaux alkyle, alkényle ou alkoxy
linéaires ou ramifiés ayant de 1 à 6 atomes de carbone,
ou encore D représentant un radical NR42R43, dans lequel R42 et R43
représentent,
indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, alkényle ou
alkynyle
linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone ou un radical cyano,
nitro ou
amino, ou R4Z et R43 forment avec l'atome d'azote un hétérocycle non
aromatique de
cinq à six chaînons, les éléments de la chaîne étant choisis parmi un groupe
composé de -CH2-, -NH-, -O- ou -S- ;
l0 ~ V représentant un radical -(CHZ)T , -(CH2)r O-(CH2)S ou -(CH2)r S-(CH2)S
, r étant
un entier de 1 à 6 et s un entier de 2 à 6 ;
~ W représentant -O- ou -NH- ;
~ X représentant un radical -(CH2)"-, -(CH2)"-CO-, -O-(CH2)p- ou -S-(CHZ)p , n
étant
un entier de 0 à 6 et p un entier de 1 à 6 ;
~ Y représentant un radical choisi parmi -(CHZ)t-, -(CH2)q-O- et -(CH2)g-NR46-
, Ra6
représentant un atome d'hydrogène ou un radical alkyle, t représentant un
entier de 0
à6etqunentierde2à6.
Plus préférentiellement, les composés de formule générale (I) selon
l'invention
incluront au moins l'une des caractéristiques suivantes
~ un groupe A ou A' représentant l'un des radicaux suivants
- soit le radical
R7
RZ I RS
N
R3
R4 ~ R6
dans lequel R2, R3, R4, R5, R6 représentent, indépendamment, un atome
d'hydrogène ou un radical alkyle ou alkoxy, R7 représente un atome d'hydrogène
et
S2 n'existe pas ou représente une liaison ou S ;
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-13-
- soit le radical
Ri7
Q
Ris /
R19
dans lequel Q représente OH et R", R'8 et R'9 représentent indépendamment un
atome d'hydrogène, le groupe OH, SRZ° ou NRz'R22 ou un radical alkyle
ou alkoxy,
RZ° représentant un radical alkyle,
RZ' et RZZ représentant, indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical
alkyle ;
- soit le radical
RZa
N
/
T
dans lequel R28 représentent un radical alkyle, aminoalkyle, alkylaminoalkyle,
dialkylaminoalkyle ou aralkyle ;
1o - soit enfin le radical
SAS
~ D représentant un radical aryle hétérocyclique à 5 chaînons contenant de 1 à
4
hétéroatomes choisis parmi O, S et N,
ou encore D représentant un radical NR42Ra3, dans lequel R4z et R43
représentent,
indépendamment, un atome d'hydrogène ou un radical alkyle linéaire ou ramifié
ayant de 1 à 6 atomes de carbone ou un radical nitro, ou R4z et R43 forment
avec
l'atome d'azote un hétérocycle non aromatique de cinq à six chaînons, les
éléments
de la chaîne étant choisis parmi un groupe composé de -CH2-, -NH-, -O- ou -S-
;
~ V représentant un radical -(CHZ)T , r étant un entier de 1 à 6 ;
~ W représentant -NH- ;
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-14-
X représentant un radical -(CHZ)"- ou -(CH2)"-CO-, n étant un entier de 0 à 6
;
Y représentant un radical choisi parmi -(CH2)t-, -(CH2)q O- et -(CHZ)9-NH-, t
représentant un entier de 0 à 6 et q un entier de 2 à 6.
Encore plus préférentiellement, les composés de formule générale (I) selon
l'invention
incluront au moins l'une des caractéristiques suivantes
~ un groupe A ou A' représentant l'un des radicaux suivants
- soit le radical
R7
RZ I RS
N
R3
R4 ~ R6
dans lequel RZ, R3, R4, R5, R6 représentent, indépendamment, un atome
d'hydrogène ou un radical alkyle ou alkoxy, R~ représente un atome d'hydrogène
et
1o S2 n'existe pas ou représente une liaison ou S ;
- soit le radical
R17
Q
RIg ~ /
R19
dans lequel Q représente OH et deux de R", R'8 et R'9 représentent des
radicaux
alkyle, le troisième étant choisi parmi un atome d'hydrogène et un radical
alkyle,
alkoxy ou alkylthio ;
- soit le radical
Rza
N
/
T
dans lequel RZ8 représentent un radical alkyle, aminoalkyle, alkylaminoalkyle
ou
dialkylaminoalkyle ;
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-15-
- soit enfin le radical
SAS
~ D représentant le radical -NH-NOZ.
~ V représentant un radical -(CHZ)T , r étant un entier de 1 à 5 et de
préférence un
entier de 2 à 4 ;
~ Y représentant un radical -(CH2)t-, t représentant un entier de 0 à 6.
En particulier, l'invention a pour objet les composés suivants décrits dans
les
exemples
- (2,5~-2-amino-N (4-anilinophényl)-5-{[imino(2-oxido-
2-oxohydrazino)méthyl]amino}pentanamide ;
- (2,5~-2-amino-5-{[imino(2-oxido-2-oxohydrazino)méthyl]amino}-N (1-méthyl-
2,3-dihydro-1H indol-5-yl)pentanamide ;
- acide (2,5~-2-[(3,5-ditert-butyl-4-hydroxybenzyl)amino]-S-{[imino(2-oxido-
2-oxohydrazino)méthyl]amino}pentanoïque ;
- (2S)-2- { [5-( 1,2-dithiolan-3-yl)pentanoyl] amino } -5- { [imino(2-oxido-
2-oxohydrazino)méthyl]amino}pentanoate de méthyle ;
- acide (2S)-2-{[5-(1,2-dithiolan-3-yl)pentanoyl]amino}-5-{[imino(2-oxido-
2-oxohydrazino)méthyl]amino}pentanoïque ;
ainsi que leurs sels.
L'invention a également pour objet, à titre de médicaments, les composés de
formule
2o générale (I) décrits précédemment ou leurs sels pharmaceutiquement
acceptables. Elle
concerne aussi des compositions pharmaceutiques contenant ces composés ou
leurs sels
pharmaceutiquement acceptables, avec un ou des excipients pharmaceutiquement
acceptables. Elle concerne encore l'utilisation de ces composés ou de leurs
sels
pharmaceutiquement acceptables pour fabriquer des médicaments destinés
1 ) à inhiber la NO synthase neuronale ou la NO synthase inductible ; à
inhiber la
péroxidation lipidique ; ou enfin à assurer la double fonction d'inhibition de
la
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NO synthase et d'inhibition de la peroxydation lipidique, ceci lorsqu'aucun de
A et de
A' ne représente le radical
SAS
2) à inhiber la NO synthase neuronale ou la NO synthase inductible ; à
régénérer les
antioxydants ou les entités piégeuses des ROS et d'une façon plus générale à
intervenir
dans le statut rédox des groupement thiols ; ou enfin à assurer la double
fonction
d'inhibition de la NO synthase et de régénération des antioxydants ou des
entités
piégeuses des ROS et d'une façon plus générale d'intervention dans le statut
rédox des
groupement thiols, ceci lorsque l'un de A et de A' représente le radical
SAS
De préférence, les composés de formule générale (I) précédemment définie ou
les sels
1o pharmaceutiquement acceptables de tels composés seront utilisés pour
préparer un
médicament destiné à traiter les troubles cardiovasculaires et
cérébrovasculaires ou les
troubles du système nerveux central ou périphérique.
Par sel pharmaceutiquement acceptable, on entend notamment des sels d'addition
d'acides inorganiques tels que chlorhydrate, bromhydrate, iodhydrate, sulfate,
phosphate, diphosphate et nitrate ou d'acides organiques tels que acétate,
maléate,
fumarate, tartrate, succinate, citrate, lactate, méthanesulfonate, p-
toluènesulfonate,
pamoate et stéarate. Entrent également dans le champ de la présente invention,
lorsqu'ils
sont utilisables, les sels formés à partir de bases telles que l'hydroxyde de
sodium ou de
potassium. Pour d'autres exemples de sels pharmaceutiquement acceptables, on
peut se
2o référer à "Salt selection for basic drags", Int. J. Pharm. (1986), 33, 201-
217.
La composition pharmaceutique peut être sous forme d'un solide, par exemple
des
poudres, des granules, des comprimés, des gélules, des liposomes ou des
suppositoires.
Les supports solides appropriés peuvent être, par exemple, le phosphate de
calcium, le
stéarate de magnésium, le talc, les sucres, le lactose, la dextrine, l'amidon,
la gélatine, la
cellulose, la cellulose de méthyle, la cellulose carboxyméthyle de sodium, la
polyvinylpyrrolidine et la cire.
Les compositions pharmaceutiques contenant un composé de l'invention peuvent
aussi
se présenter sous forme liquide, par exemple, des solutions, des émulsions,
des
suspensions ou des sirops. Les supports liquides appropriés peuvent être, par
exemple,
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l'eau, les solvants organiques tels que le glycérol ou les glycols, de même
que leurs
mélanges, dans des proportions variées, dans l'eau.
L'administration d'un médicament selon l'invention pourra se faire par voie
topique,
orale, parentérale, par injection intramusculaire, etc.
La dose d'administration envisagée pour médicament selon l'invention est
comprise
entre 0,1 mg à 10 g suivant le type de composé actif utilisé.
Conformément à l'invention, on peut préparer les composés de formule générale
(I) par
les procédés décrits ci-après.
Préuaration des comuosés de formule générale (I
Les composés de formule générale (I) peuvent être préparés selon différentes
stratégies
de synthèse qui sont décrites dans les schémas suivants
A)
HN~D
R45
V
(III) GpI.N~OH + H-N-Y-A' (IV)
Rl O
HN~D
'N( H
(II) V R
Gpi.N~N_Y_A~
R1 O
HN~D
'N( H
(I) V R 5
R N~N_1,_A,
H O
Schéma 1
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Les aminocarboxamides de formule générale (I), schéma 1, dans lesquels A', D,
V, Y et
R' sont tels que définis ci-dessus avec, en particulier, A représentant un
atome
d'hydrogène, X une liaison (-(CHz)n avec n = 0) et W = -NR45- sont préparés en
deux
étapes, à partir des aminoacides protégés (Gp, étant un groupe protecteur de
type
carbamate) de formule générale (III) et des amines de formule générale (IV).
Leur
condensation est effectuée dans les conditions classiques de la synthèse
peptidique
(M. Bodanszky et A. Bodanszky, The Practice of Peptide Synthesis, 145
(Springer-
Verlag, 1984)) dans le THF, le dichlorométhane, la pyridine ou le DMF en
présence
d'un réactif de couplage tel que le dicyclohexylcarbodümide (DCC), le 1,1'-
carbonyldümidazole (CDI) (J. Med. Chem. (1992), 35 (23), 4464-4472) ou le
chlorhydrate de 1-(3-diméthylaminopropyl)-3-éthylcarbodümide (EDC ou WSCI)
(John
Jones, The chemical synthesis of peptides, 54 (Clarendon Press, Oxford, 1991))
pour
conduire aux carboxamides de formule générale (II). La coupure du groupe
protecteur
Gp, est ensuite effectuée classiquement, par exemple en présence d'un acide
fort, d'une
amine secondaire ou dans des conditions d'hydrogénolyse, selon des méthodes
décrites
dans la littérature (T.W. Greene et P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic
Synthesis, Second edition (Wiley-Interscience, 1991)), pour conduire aux
composés
finaux de formule générale (I). Les synthèses des composés de formule générale
(III) et
(IV), non commerciaux, sont décrites plus loin.
2o B) Alternativement les dérivés d'aminoacides de formule générale (I)
peuvent être
préparés selon la stratégie décrite dans le schéma 2, dans lesquels A, D, V et
R' sont tels
que définis ci-dessus avec A' représentant un atome d'hydrogène, W = -O-,
Y = -(CH2)t- (t = 0), X = -(CH2)n-, -O-(CH2)p-, -S-(CH2)p ou -CH=CH-(CH2)p
(n étant ici un entier de 1 à 6) et Gpz étant un groupe alkyle ou arylalkyle.
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O HN D
(VI) A_X~-~
NH
H ~ (V)
V
A-X.N~OGp2
D j~
HN R' O
NH
(VII)
V
~~OGpz
R' O HN~D
(I)
V
A-X.N~OH
R' O
Schéma 2
Les dérivés d'aminoesters de formule générale (V) sont accessibles, au cours
d'une
étape d'amination réductrice, par la condensation des aldéhydes de formule
générale
(VI) et des a,-aminoesters de formule générale (VII). Cette condensation est
classiquement effectuée à 20 °C dans un solvant alcoolique tel que le
méthanol en
présence d'un agent déshydratant, comme les tamis moléculaires, et d'un agent
réducteur tel que, par exemple, NaBH3CN. Cette étape conduit au produit de
mono-alkylation de formule générale (V). La déprotection de la fonction acide
est
1o ensuite classiquement effectuée en fonction de la nature de Gpz, par
exemple, par
saponification à l'aide de LiOH ou bien selon des méthodes décrites dans la
littérature
(T.W. Greene et P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Second
edition
(Wiley-Interscience, 1991)), pour conduire aux aminoacides de formule générale
(I).
Les synthèses des composés de formule générale (VI) et (VII), non commerciaux,
sont
décrites plus loin.
C) Par ailleurs, les carboxamides de formule générale (I) peuvent aussi être
préparés
selon la stratégie décrite dans le schéma 3, dans lesquels A, D, V et R' sont
tels que
définis ci-dessus avec A' représentant un atome d'hydrogène, W = -O-, Y = -
(CH2)r
(t = 0), X = -(CH2)n-CO- ou -CH=CH-(CHZ)"-CO- (n étant un entier de 0 à 6) et
Gp2
2o étant un groupe alkyle ou arylalkyle.
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O HN~D
IX
A X~~
( NH
)
OH
V (VIII)
A-X~N~OGp2
HN~D Rl O
NH
(VII) V
~~OGp2
Ri O HN~D
(I)
V
A-X.N~
OH
R' O
Schéma 3
La condensation des acides carboxyliques de formule générale (IX) avec les
a-aminoesters de formule générale (VII) est effectuée dans les conditions
classiques de
la synthèse peptidique comme précédemment décrites. Le carboxamido-ester de
formule générale (VIII) intermédiairement obtenu est ensuite déprotégé selon
un
protocole décrit dans le schéma 2 pour conduire aux carboxamido-acides de
formule
générale (I). Les synthèses des composés de formule générale (IX), non
commerciaux,
sont décrites plus loin.
io Préparation des intermédiaires de formule générale (III
Les composés de formule générale (III) peuvent être préparés à partir des
intermédiaires de formule générale (IIL2) selon le schéma 1.1 où D, V et R'
sont tels
que définis ci-dessus, Gp, étant un groupe protecteur de type carbamate et Gpz
est un
groupement alkyle ou arylalkyle.
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D Gp 1. OGp2 L
IIL3 ~ R O HZN~~ (IILS)
( ) L NH
L
ou 1) GpNH~NGp
1) Ph-CO-NCS 2) H+ (IIL6)
(IIL4) 2) Base
RaaHal H
OZN.N~N.N.O (IIL7)
Déprotection
HN~D
'
(
N
H
(IILB) V
GpI.N~OGpz
I
l
R1 V
O
Gp 1.N~ OH
f1
R1
O
(III)
(IIL2)
~2
V
N
'i
Schéma 1.1
Les amines de formule générale (IIL2) peuvent être condensées sur des composés
de
formule générale (IIL3), dans lesquels L représente un groupe partant (un
radical
alkoxy, alkylthio, aralkylthio, acide sulfonique, halogénure, alcool arylique
ou tosyle),
par chauffage dans un alcool (par exemple dans du méthanol ou de
l'isopropanol),
éventuellement en présence de DMF, à une température comprise entre 20 et 100
°C
pour une durée généralement comprise entre quelques heures et une nuit, pour
conduire
aux intermédiaires de formule générale (IILB).
Dans les cas où D est une amine, les intermédiaires de formule générale (III)
sont des
1o guanidines. Celles-ci peuvent être préparées, par exemple, par la
condensation des
amines de formule générale (IIL2) avec les dérivés de formule générale (IILS)
ou
(IIL6). Les réactifs de formule générale (IILS) dans lesquels L représente,
par exemple,
un cycle pyrazole sont condensés sur les amines de formule générale (IIL2)
selon les
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conditions décrites dans la littérature (J. Org. Chem. (1992) 57, 2497-2502)
de même
pour les réactifs de formule générale (IIL6) dans lesquels L représente, par
exemple, un
cycle pyrazole et Gp le groupement Boc (Tetrahedron Lett. (1993) 34 (21), 3389-
3392)
ou bien lorsque L représente le groupement -N-S02-CF3 et Gp le groupement Boc
(J. Org. Chem. (1998) 63, 3804-3805). La déprotection de la fonction guanidine
peut
ensuite être effectuée, par exemple, en présence d'un acide fort tel que par
exemple
l'acide trifluoroacétique pour conduire aux intermédiaires de formule générale
(IILB).
Dans les cas où D = -NHN02, les intermédiaires de formule générale (IILB)
peuvent
être préparés, par exemple, par la condensation des amines de formule générale
(IIL2)
1o avec le réactif de formule générale (IIL7) (N-méthyl-N'-nitro-N-
nitrosoguanidine)
selon les conditions décrites dans la littérature (J. Amer. Chem. Soc. (1947),
69, 3028-
3030).
Dans les cas où D est un radical -SR44, les dérivés isothiourées de formule
générale
(IILB), sont préparés en 3 étapes à partir de l'amine primaire de formule
générale
(IIL2). La réaction du benzoylisothiocyanate sur l'amine de formule générale
(IIL2)
dans un solvant tel que, par exemple, l'acétone, conduit aux intermédiaires
benzoyl
thiourées qui sont ensuite classiquement hydrolysés par chauffage en milieu
basique.
Les thiourées ainsi obtenues sont ensuite alkylés par un dérivé halogéné R44-
Hal, par
chauffage dans un solvant inerte, pour conduire aux isothiourées de formule
générale
(IILB).
La déprotection de la fonction acide des intermédiaires de formule générale
(IILB) est
ensuite classiquement effectuée en fonction de la nature de Gp2, par exemple,
par
saponification à l'aide de LiOH ou bien selon des méthodes décrites dans la
littérature
(T.W. Greene et P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Second
edition
(Wiley-Interscience, 1991)).
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Préparation des intermédiaires de formule générale IVl
A) Lorsque A' est tel que défini ci-dessus, W = -NR45- et Y = -(CH2)t- (t =
0), les
amines de formule générale (IV) sont préparées selon les stratégies de
synthèse
suivantes
Les anilines de formule générale (IV), non commerciales, dérivés d'indoline ou
de
1,2,3,4-tétrahydroquinoline, schéma 2.1, dans lesquelles T et RZ8 sont tels
que définis ci-
dessus, peuvent être préparées à partir des dérivés nitro correspondants de
formule
générale (IV.1). La 6-nitro-1,2,3,4-tétrahydroquinoline est décrite dans
Can. J. Chem. (1952), 30, 720-722. L'alkylation de l'amine est classiquement
effectuée
1o par une base forte telle que, par exemple, NaH, dans un solvant aprotique
polaire tel
que, par exemple, le DMF en présence d'un dérivé halogéné RZ8-Hal, tels que
par
exemple, le chlorure de 3-diméthylaminopropane ou le bromure de benzyle. Le
dérivé
nitro de formule générale (IV.2) intermédiairement obtenu est ensuite réduit,
par
exemple, par le Nickel de Raney en présence d'hydrate d'hydrazine pour
conduire aux
anilines de formule générale (IV).
N0 2s
/T I ~ 2 R-Hal /T I ~ NOZ /T
\N ~ ~ \N ~ .-~ \N
H Rzs R2s
(IV.2) (IV)
(IV.1)
Schéma 2.1
Dans le cas particulier des dérivés phénoliques, les anilines de formule
générale (IV)
sont obtenues par hydrogénation, en présence de Pd/C, des dérivés nitrophénols
précurseurs. Les dérivés nitrés des di-alkylphénols sont accessibles selon une
méthode
2o décrite dans J. Org. Chem. (1968) 33 (1), 223-226.
Les intermédiaires de formule générale (IV) dans lesquels A' est une
diphénylamine,
sont accessibles à partir des méthodes décrites dans la littérature (Synthesis
(1990) 430 ;
Indian J. Chem. (1981) 20B, 611-613 ; J. Med. Chem. (1975) 18(4), 386-391) qui
passent par la réduction d'un intermédiaire nitrodiphénylamine. La réduction
de la
fonction nitro est effectuée classiquement par hydrogénation en présence d'une
quantité
catalytique de Pd/C pour accéder aux aminodiphénylamines de formule générale
(IV).
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Lorsque A' est un dérivé carbazole (S2 représente alors une liaison directe),
les
méthodes de préparation des aminocarbazoles de formule générale (IV) passent
par la
synthèse d'un intermédiaire nitrocarbazole. Ces méthodes sont décrites dans
Pharmazie
(1993) 48(11), 817-820 ; Synth. Commun. (1994) 24(1), 1-10 ; J. Org. Chem.
(1980) 45,
1493-1496 ; J. Org. Chem. (1964) 29(8), 2474-2476 ; Org. Prep. Proced. Int.
(1981)
13(6), 419-421 ou J. Org. Chem. (1963) 28, 884. La réduction de la fonction
nitro des
intermédiaires nitrocarbazoles est, dans ce cas, effectuée de préférence à
l'aide d'hydrate
d'hydrazine en présence de nickel de Raney.
Les intermédiaires de formule générale (IV) dans lesquels A' est un dérivé
1o phénothiazine (S2 représente un atome de soufre), sont accessibles à partir
de méthodes
de la littérature qui passent par la synthèse d'un dérivé nitrophénothiazine.
En particulier
la 3-nitrophénothiazine est décrite dans J. Org. Chem. (1972) 37, 2691. La
réduction de
la fonction nitro pour accéder aux aminophénothiazines de formule générale
(IV) est
effectuée classiquement par hydrogénation en présence d'une quantité
catalytique de
Pd/C dans un solvant tel que féthanol.
B) Alternativement lorsque Y = -(CH2)q-O- et W = -NR45-, les amines de formule
générale (IV), schéma 2.2 (dans lequel Alk représente un radical alkyle),
peuvent être
préparées à partir des hydroquinones de formule générale (IV.3) obtenues selon
la
littérature (J. Chem. Soc. Perkin 1 (1981) 303-306). La condensation sur des
2o halogènoesters commerciaux de formule générale (IV.4) est effectuée en
présence d'une
base telle que, par exemple K2C03, en chauffant dans un solvant polaire comme,
par
exemple, le THF pendant au moins 5 heures. Les esters de formule générale
(IV.S)
intermédiairement obtenus sont ensuite déprotégés (en milieu acide dans le cas
des
esters de tert-butyle) pour conduire aux acides de formule générale (IV.6).
Les
carboxamides primaires de formule générale (IV.7) sont préparés à l'aide d'une
solution
aqueuse concentrée d'ammoniaque, de DCC et HOBT dans un solvant tel que le
DMF.
L'étape de réduction est effectuée en milieu anhydre, par chauffage à 70-80
°C, en
présence d'un réactif sélectif des carboxamides tel que, par exemple, le
BH3.THF, dans
un solvant tel que, par exemple, le THF pour conduire aux amines de formule
générale
(IV).
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A'-OH + Hal-(CHz q_1 COZAIk ---~ A'-O-(CHz q-i COZAIk
(IV.3) (IV.4) (IV.S)
NH40H
~ A'-O-(CHz q=11 COZH ~ A'-O-(CHz q_1 CONHz
(IV.6) (IV.7)
A'-O_(CHz)-NHz
q
(IV)
Schéma 2.2
C) Par ailleurs, lorsque Y = -(CH2)t- (avec t ~ 0) et W = -NR45-, les amines
de formule
générale (IV), schéma 2.3, sont également accessibles, par exemple, en deux
étapes à
partir des acides carboxyliques de formule générale (IV.B) selon une stratégie
analogue
à celle décrite au schéma 2.2 pour l'intermédiaire (IV.6). Les synthèses des
acides
carboxyliques de formule générale (IV.B), non commerciaux, sont décrites au
chapitre
Préparation des intermédiaires de formule générale (IX).
NH40H O
A'-COZH ---~ A'-~ ---~ A'~
NHz NHz
(IV.B) (IV.9) (IV)
1o Schéma 2.3
Préparation des intermédiaires de formule générale (VI)
A) Lorsque A est tel que défini ci-dessus et X = -(CHZ)n- ou X = -CH=CH-(CH2)p-
avec
n=1 ou p = l, les aldéhydes de formule générale (VI) peuvent être préparés à
partir des
nitriles ou des esters carboxyliques correspondants lors d'une étape de
réduction en
présence, par exemple, de DIBAL ou d'un autre dérivé du Bore, dans un solvant
anhydre tel que, par exemple, le THF ou le dichlorométhane, à une température
variant
de -78 °C à 20° C. Certains aldéhydes sont également accessibles
à partir de méthodes
décrites dans la littérature : Bull. Chem. Soc. Jpn. (1978) 51 (8), 2433-2434,
Bioorg.
Med. Chem. Lett. (1998) 8, 3453-3458.
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B) Alternativement, lorsque A est tel que défini ci-dessus et X = -O-(CH2)p ,
les
aldéhydes de formule générale (VI), schéma 3.1 (dans lequel Alk représente un
radical
alkyle), peuvent être préparés à partir des hydroquinones de formule générale
(VL1)
obtenues selon la littérature (J. Chem. Soc. Perkin 1 (1981) 303-306). La
condensation
sur des halogénoesters commerciaux de formule générale (VL2) est effectuée
dans les
conditions précédemment décrites (schéma 2.2) ainsi que la réduction de
l'ester en
aldéhyde (paragraphe A).
A-OH + Hal-(CHZ p=11 COZAIk A-O-(CHZ p_ 1 COZAlk
(VL1) (VL2) (VL3)
H
A O (CHZ) _~
p O
Schéma 3.1
1o Préparation des intermédiaires de formule générale (VIIL
Les composés de formule générale (VII), schéma 4.1, peuvent être préparés à
partir des
intermédiaires de formule générale (IILB), décrits dans le schéma 1.1, où D, V
et R'
sont tels que définis ci-dessus, Gp, étant un groupe protecteur de type
carbamate et Gp2
est un groupement alkyle ou arylalkyle. La déprotection de la fonction amine
est
classiquement effectuée en fonction de la nature de Gp" par exemple, à l'aide
d'un
acide fort, tel que par exemple HCl 4N dans le dioxane, ou bien selon des
méthodes
décrites dans la littérature (T.W. Greene et P.G.M. Wuts, Protective Groups in
Organic
Synthesis, Second edition (Wiley-Interscience, 1991)).
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HN'\ /D HN'\/D
~ ~
NH NH
V V
GpI.N~OGp2 ~ H,N~OGpz
I I
R' O R'
O
(IILB) (~I)
Schéma 4.1
Préparation des intermédiaires de formule générale (IXl
Les acides de formule générale (IX), non commerciaux, sont accessibles à
partir de
méthodes de la littérature. Par exemple, l'acide trisnorlipoïque [acide 2-(1,2-
dithiolan-
3-yl) acétique] est obtenu en 5 étapes selon un protocole expérimental décrit
dans
Tetrahedron Letters.(1997), 38 (33), 5785-5788. Les synthèses des acides
dérivés de la
phénothiazine sont notamment décrites dans J. Med. Chem. (1998), 41(2), 148-
156 ou
Bull. Soc. Chim. Fr. (1960), 1049-1066.
A moins qu'ils ne soient définis d'une autre manière, tous les termes
techniques et
1o scientifiques utilisés ici ont la même signification que celle couramment
comprise par
un spécialiste ordinaire du domaine auquel appartient cette invention. De
même, toutes
les publications, demandes de brevets, tous les brevets et toutes autres
références
mentionnées ici sont incorporées par référence.
Les exemples suivants sont présentés pour illustrer les procédures ci-dessus
et ne
doivent en aucun cas être considérés comme une limite à la portée de
l'invention.
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EXEMPLES
Exemple 1 : (2S~-2-amino-N (4-anilinophényl)-5-{[imino(2-oxido-2-
oxohydrazino)méthyl]amino}pentanamide
1.1) tert-butyl (IS)-1-~(4-anilinoanilino)carbonylJ-4-(~imino(2-oxido-2-
oxohydrazino)méthylJamino)butylcarbamate
On ajoute 1,03 g (5 mmol) de 1,3-dicyclohexylcarbodümide à une solution de 1,6
g
(5 mmol) de N-tert-butoxycarbonyl-L-nitroarginine et de 0,92 g (5 mmol) N'-
phényl-
1,4-benzènediamine dans 50 ml de DMF. Le mélange réactionnel est agité pendant
15
heures et finalement concentré sous vide. Le résidu d'évaporation est repris
par 50 ml
1o d'AcOEt et filtré pour éliminer le précipité. Le filtrat est ensuite lavé
par 2 fois 50 ml
d'une solution saturée de carbonate de sodium et 50 ml de saumure. Après
séchage sur
sulfate de sodium, la solution organique est filtrée et concentrée à sec sous
vide. Le
résidu obtenu est purifié sur une colonne de silice (éluant : heptane/AcOEt :
3/7 à 0/10).
On obtient 0,8 g d'une poudre beige. Point de fusion : 93-94°C.
1.2) (2S)-2-amino-N (4-anilinophényl)-5-(~imino(2-oxido-2-oxohydrazino)méthylJ-
amino~pentanamide
A une solution de 0,4 g (0,8 mmol) de l'intermédiaire 1.1 dans 10 ml de
méthanol,
refroidi à 0 °C, on ajoute 2 ml (8 mmol) d'une solution 4N de HCl dans
le 1,4-dioxane.
Le mélange réactionnel est ensuite agité pendant 4 heures à 23 °C. A la
fin de la
2o réaction, l'ensemble est concentré sous vide pour conduire à une poudre
beige qui est
purifiée par chromatographie sur une colonne de silice (éluant CHZCI, / MeOH :
9/1 à
8/2). Le produit attendu est obtenu sous forme d'une poudre gris clair. Point
de
fusion : 68-72 °C.
Exemple 2 : (2S~-2-amino-5-{[imino(2-oxido-2-oxohydrazino)méthyl]amino}-N (1-
méthyl-2,3-dihydro-1H indol-5-yl)pentanamide
2.1) 1-méthyl-5-nitroindoline
Dans un tricot de 150 ml, sous atmosphère inerte, on introduit 25 ml de DMF
anhydre
suivi de 0,84 g (21 mmol) de NaH à 60%. Le mélange réactionnel est refroidi à
l'aide
d'un bain de glace avant l'addition goutte-à-goutte d'une solution de 3,28 g
(20 mmol)
3o de 5-nitroindoline dans 5 ml de DMF anhydre. A la fin de l'addition,
l'agitation est
maintenue 1 heure à 23 °C, avant d'introduire goutte-à-goutte une
solution de 1,31 ml
(21 mmol) de MeI dans 5 ml de DMF anhydre. L'agitation est poursuivie pendant
15
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heures à 23 °C. La réaction est finalement neutralisée, à 0 °C,
par 20 ml d'une solution
saturée de NH4C1. Le mélange réactionnel est ensuite dilué par 20 ml d'eau et
50 ml
d'AcOEt. Après décantation, la phase organique est lavée successivement par 20
ml
d'eau, 20 ml de saumure, séchée sur sulfate de magnésium, filtrée et
concentrée sous
vide. On obtient une poudre jaune foncée.
2.2) 1-méthyl-5-aminoindoline
A un mélange de 2,84 g (15,9 mmol) de 1-méthyl-5-nitroindoline et de 4 ml (80
mmol)
d'hydrate d'hydrazine dans 60 ml d'éthanol absolu, on ajoute environ 400 mg de
nickel
de Raney. Le mélange réactionnel est chauffé à reflux pendant 5 heures. Après
retour à
23 °C, on ajoute un peu de silice dans le ballon et on évapore le
solvant sous vide. Le
résidu d'évaporation est placé directement au sommet d'une colonne de
chromatographie. Le produit attendu est élué à l'aide d'un mélange
heptane/AcOEt
(3/7). On obtient une poudre violette (65%) qui est investie directement dans
l'étape
suivante.
2.3) (2S)-2-amino-5-~~imino(2-oxido-2-oxohydrazino)méthylJamino~-N (1-méthyl-
2,3-
dihydro-IH indol-5 yl)pentanamide
Le protocole expérimental utilisé est le même que celui décrit pour l'Exemple
1,
l'intermédiaire 2.2 remplaçant la N'-phényl-1,4-benzènediamine. Après
purification sur
une colonne de silice (éluant : CHZC12/ EtOH : 10/1), on obtient un solide
blanc cassé.
2o Point de fusion : 140-142 °C.
Exemple 3 : acide (2S)-2-[(3,5-ditert-butyl-4-hydroxybenzyl)amino]-5-][imino(2-
oxido-2-oxohydrazino)méthyl]amino}pentanoïque
3.1) (2S)-2-~(3,5-ditert-butyl-4-hydroxybenzyl)aminoJ-5-~~imino(2-oxido-2-
oxohydrazino)méthylJamino~pentanoate de méthyle
Dans un tricot, sous atmosphère d'argon, contenant 3 g de tamis moléculaire 3~
pulvérulent, préalablement activé, en suspension dans 50 ml de MeOH anhydre,
on
introduit successivement 1,17 g (5 mmol) de 3,5-ditert-butyl-4-
hydroxybenzaldéhyde,
1,35 g (5 mmol) de l'ester méthylique de la L-nitroarginine suivi de 0,7 ml (5
mmol) de
Et3N. Le mélange réactionnel est agité pendant 15 heures, à 23 °C,
avant l'addition, à
0 °C, de 0,35 g (5,5 mmol) de cyanoborohydrure de sodium. L'agitation
est maintenue
pendant 4 heures supplémentaires à 23 °C. La suspension est ensuite
filtrée sur Büchner
et le filtrat est dilué par 150 ml d'AcOEt et 50 ml d'eau. Après agitation et
décantation,
la phase organique est lavée par 50 ml de saumure. La solution organique est
ensuite
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séchée sur sulfate de sodium, filtrée et concentrée à sec sous vide. Le résidu
d'évaporation est ensuite purifié sur une colonne de silice (éluant :
heptane/AcOEt 1/9).
On obtient une poudre saumon clair avec un rendement de 31 %. Point de
fusion : 55-56 °C.
3.2) acide (2S)-2-~(3,5-ditert-butyl-4-hydroxybenzyl)aminoJ-5-~~imino(2-oxido-
2-
oxohydrazino)méthylJaminoJpentanoi'que
On ajoute, à 0 °C, une solution de 90 mg (2,1 mmol) de LiOH dans 10 ml
d'eau à une
solution de 0,45 g (1 mmol) de l'intermédiaire 3.1 dans 10 ml de THF. Le
mélange est
agité pendant 1 heure à 23 °C avant dilution par 25 ml d'AcOEt. Après
agitation,
l0 l'ensemble est décanté et la phase aqueuse, basique, est à nouveau lavée
par 25 ml
d'AcOEt. La solution basique est ensuite neutralisée, à 0 °C, par HCl
1N. Le précipité
apparu est ensuite filtré et lavé successivement par 25 ml d'eau et 25 ml
d'AcOEt.
Après séchage, on obtient une poudre blanche avec un rendement de 35%. Point
de
fusion : 196-197 °C.
Exemple 4 : (2S)-2-{[5-(1,2-dithiolan-3-yl)pentanoyl]amino}-5-{[imino(2-oxido-
2-
oxohydrazino)méthyl]amino}pentanoate de méthyle
A une solution de 1,03 g (5 mmol) d'acide (DL)-thioctique dans 50 ml de
dichlorométhane, on ajoute successivement 1,35 g (5 mmol) du chlorhydrate de
l'ester
méthylique de la L-nitroarginine, de la triéthylamine (2,1 ml), 0,676 g (5
mmol)
2o d'hydroxybenzotriazole et 0,956 g (5 mmol) de chlorhydrate de
1-(3-diméthylaminopropyl)-3-éthyl-carbodümide. Après avoir agité le mélange
réactionnel une nuit à 25 °C, on dilue l'ensemble avec 400 ml d'eau et
l'agitation est
maintenue 30 minutes supplémentaires. Le produit est extrait à l'aide de 3
fois 200 ml
de dichlorométhane. La solution organique est séchée sur sulfate de magnésium,
filtrée
et concentrée sous vide. Le solide obtenu est purifié par recristillation dans
un mélange
d'acétate d'isopropyle et de dichlorométhane (80/20), filtré et rincé à
l'éther diéthylique
pour obtenir, après séchage, 1,77 g d'un solide jaune avec un rendement de 84
%. Point
de fusion : 96,6-97 °C.
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Exemple 5 : acide (2S)-2-{[5-(1,2-dithiolan-3-yl)pentanoyl]amino}-5-{[imino(2-
oxido-2-oxohydrazino)méthyl]amino}pentanoïque
A une solution de 0,632g (1,50 mmol) du composé 4 dans lOmls de THF, on ajoute
goutte à goutte 2,3 ml d'une solution (1M dans H20) d'hydroxyde de lithium et
on laisse
agiter à température ambiante pendant une heure. Le pH est ajusté à 5-6 avec
HC1 (1M)
puis l'on extrait à l'éther diéthylique. La solution organique est séchée sur
sulfate de
magnésium, filtrée et évaporée sous pression réduite. Le solide obtenu est
purifié par
recristallisation dans l'éthanol filtré et rincé à l'éther diéthylique pour
obtenir, après
séchage, 0,370 g d'un solide jaune pâle avec un rendement de 61 %. Point de
fusion
140-143.1 °C.
Etude pharmacologigue des produits de l'invention
Etude des effets sur la NO s~nthase constitutive neuronale de cervelet de rat
L'activité inhibitrice des produits de l'invention est déterminée par la
mesure de leur
effets sur la transformation par la NO synthase de la [3H]L-arginine en [3H]L-
citrulline
en accord avec la méthode modifiée de Bredt et Snyder (froc. Natl. Acad. Sci.
USA,
(1990) 87: 682-685). Des cervelets de rats Sprague-Dawley (300g - Charles
River) sont
rapidement prélevés, disséqués à 4 °C et homogénéisés dans un volume de
tampon
d'extraction (HEPES 50 mM, EDTA 1 mM, pH 7,4, pepstatin A 10 mg/ml, leupeptine
10 mg/ml). Les homogénats sont ensuite centrifugés à 21000 g pendant 15 min à
4 °C.
2o Le dosage se fait dans des tubes à essai en verre dans lesquels sont
distribués 100 p1 de
tampon d'incubation contenant 100 mM d'HEPES (pH 7,4), 2 mM d'EDTA, 2.5 mM
de CaCl2, 2 mM de dithiotréitol, 2 mM de NADPH réduit et 10 pg/ml de
calmoduline.
On ajoute 25 p1 d'une solution contenant 100 nM de [3H]L-arginine (Activité
spécifique
56.4 Ci/mmole, Amersham) et 40 ~M de L-arginine non radioactive. La réaction
est
initiée en ajoutant 50 ~1 d'homogénat, le volume final étant de 200 ~l (les 25
~l
manquants sont soit de l'eau, soit le produit testé. Après 15 min, la réaction
est stoppée
avec 2 ml de tampon d'arrêt (20 mM d'HEPES, pH 5,5, 2 mM d'EDTA). Après
passage
des échantillons sur une colonne de 1 ml de résine DOWEX, la radioactivité est
quantifiée par un spectromètre à scintillation liquide. Les composés des
exemples 1 et 2
3o décrits ci-dessus présentent une CIS° inférieure à 10 ~M.
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Etude des effets sur le stress oxidatif induit par le glutamate sur des
cellules en culture
HT-22 .
L'activité inhibitrice des produits de l'invention est déterminée par la
mesure de leur
capacité à protéger les cellules d'une lignée hippocampale de souris (HT-22)
d'un stress
oxidatif provoqué par le glutamate. La biosynthèse de glutathion, élément
essentiel de
détoxification cellulaire des radicaux libres, nécessite le transport actif de
cystine à
l'intérieur de la cellule. Le glutamate en s'opposant à la pénétration de la
cystine
provoque une réduction du taux de glutathion qui conduit à la mort de la
cellule par
stress oxidatif (Demerlé-Pallardy, C. et coll., J. Neurochem. (2000) 74, 2079-
2086 ;
1o Murphy, T.H. et coll., Neuron, (1989) 2: 1547-1558). Les cellules sont
cultivées à
37 °C dans un milieu DMEM additionné de 10% de sérum de veau foetal.
Les essais
sont réalisés dans des plaques 96 puits contenant 5000 cellules par puits. Le
glutamate
(5 mM) est ajouté au milieu contenant ou non les produits à tester. La
viabilité cellulaire
est testée après 24 h par la méthode du MTT (Hansen, M.B. et al., J
Immunol.Methods
(1989), 119, 203-210). La capacité des composés à protéger les cellules de
l'action
toxique du glutamate est estimée en CESO, calculée par rapport à la viabilité
de cellules
non soumises à l'action du glutamate considérée comme viabilité 100%. Les
composés
des exemples 1 et 2 décrits ci-dessus présentent une CESO inférieure à 25 ~M.
