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UTILISATION DU METRONIDAZOLE POUR LA PREPARATION D'UNE
COMPOSITION PHARMACEUTIQUE DESTINEE A TRAITER UNE INFLAMMATION
CUTANEE
La présente invention concerne le domaine du traitement des inflammations
cutanées,
et plus particulièrement le traitement des inflammations cutanées dans la
rosacée.
L'invention vise à fournir de nouvelles compositions pharmaceutiques, plus
particulièrement dermatologiques, utiles pour le traitement des inflammations
cutanées, et plus particulièrement le traitement des inflammations cutanées
dans la
rosacée et comprenant à titre d'agent actif le métronidazole.
La rosacée est une dermatose inflammatoire commune chronique et progressive
liée à
une relaxation vasculaire. Elle affecte principalement la partie centrale du
visage et se
caractérise par le rougissement du visage ou les bouffées de chaleur,
l'érythème facial,
les papules, les pustules, et la télangiectasie. Dans les cas graves,
particulièrement
chez l'homme, le tissu mou du nez peut enfler et produire un gonflement
bulbeux
appelé rhinophyma.
La rosacée survient généralement entre l'âge de 25 et 70 ans, et elle est
beaucoup
2 0 plus commune chez les gens au teint clair. Elle touche plus
particulièrement les
femmes, bien pue cette affection soit généralement plus sévère chez l'homme.
La
rosacée est chronique et persiste des années avec des périodes d'exacerbation
et de
rémission.
2 5 La rosacée a originellement été appelée "acné rosacée" parce que ses
papules
(légères surélévations de la peau) et ses pustules inflammatoires (croûtes de
pus)
ressemblent beaucoup à celles de l'acné vulgaire. Contrairement à l'acné
vulgaire,
dont l'étiologie est fondée à la fois sur une kératinisation anormale, une
augmentation
de la production de sébum et une inflammation bactérienne, l'inflammation de
la
3 0 rosacée est de nature vasculaire et mal comprise. II résulte de cette
anomalie
vasculaire faciale, un oedème permanent du derme qui pourrait accompagner une
colonisation accrue par Demodex folliculorum, acarien qu'on trouve
habituellement
dans les follicules du visage.
Selon différents travaux, Demodex folliculorum aurait un rôle étiologique dans
la
35 rosacée (Erbagi et al., 1998, Int J Dermatol, vo1.37, pages 421-425;
Purcell et al, 1986,
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J Am Acad Dermatol, vo1.15, pages 1159-1162; Sibenge et al., 1992, J Am Acad
Dermatol, vo1.26, pages 590-593). II semble que Demodex folliculorum cause ou
aggrave des réactions inflammatoires, se traduisant par des papules et des
pustules,
en bloquant les follicules pilo-sébacés du visage (Roihu et al., 1998, J Cutan
Pathol,
vo1.25, pages 550-552). Ce parasite déclencherait par ailleurs une réponse
immune
humorale (Nunzi et al., 1980, Br J Dermatol, vol 103, pages 543-551; Manna et
al.,
1982, Br J Dermatol, vol 107, pages 203-208).
La pathogenèse de la rosacée est mal connue. De nombreux facteurs peuvent être
impliqués sans forcément induire cette affection. Ce sont par exemple des
facteurs
psychologiques, des troubles gastro-intestinaux, des facteurs environnementaux
(exposition au soleil, température, humidité) et émotionnels (stress),
alimentaires
(alcool, épices), hormonaux, vasculaires, voire une infection par Helicobacter
pilori.
La rosacée évolue en 4 stades, mats le passage par tous les stades n'est pas
obligatoire
- stade 1 des relaxations vasculaires (vers 20 ans). Les patients ont des
poussées
soudaines de rougeur paroxystique du visage et du cou, avec sensation de
chaleur,
mais sans signes systémiques. Après les crises, la peau du visage redevient
normale.
Ces « flushes » sont déclenchés par les changements de température (entraînant
parfois une thermophobie), l'absorption de boissons chaudes ou d'alcool.
- stade 2 érythémato-télangiectasique (vers 30 ans). Les zones malaires sont
diffusément rouges. On y observe des capillaires dilatés constituant la
classique
couperose. A la différence du stade 1, la rougeur est permanente. Outre les
joues, le
menton et la partie médiane du front peuvent ëtre touchés.
- stade 3 des papulo-pustules (vers 40 ans). Sur un fond d'érythème se
développent
des papules et des pustules de quelques millimètres de diamètre, sans comédons
associés. Cette dermatose peut être très étendue, parfois à la partie glabre
du cuir
chevelu chez l'homme, mais respecte le pourtour de la bouche et des yeux. Les
patients se plaignent d'une peau sensible, avec intolérance subjective à la
plupart des
topiques et des cosmétiques gras.
- stade 4 du rhinophyma (vers 50 ans ou plus tard). Cette phase tardive touche
principalement les hommes, contrairement aux autres stades. Le nez est
augmenté de
volume, diffusément rouge et les orifices folliculaires sont dilatés. La peau
s'épaissit
progressivement.
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Les formes mineures de la rosacée peuvent être traitées par des actifs tels
que les
anti-séborrhéiques et les anti-infectieux, par exemple le peroxyde de
benzoyle, l'acide
rétinoïque. Quant aux formes les plus diffuses de l'affection, elles répondent
bien à une
antibiothérapie générale par les cyclines. Cependant, ces traitements
présentent des
effets secondaires désagréables pour le patient tels des phénomènes
d'irritation ou
d'intolérance.
De plus, en raison de l'aspect multi-factoriel de la rosacée, il existe de
très nombreuses
thérapies contre cette affection, mais on est encore à la recherche d'un
traitement
efficace et sans risque pour le patient.
Les travaux de la Demanderesse ont permis de mettre en évidence l'interaction
du
métronidazole avec la sécrétion de certaines interleukines, et tout
particulièrement
avec la sécrétion de l'interleukine 5, de finterleukine 6 et de finterleukine
10,
impliquées notamment dans le processus inflammatoire de la rosacée.
Une infection par Demodex folliculorum déclenche une réponse immunitaire
humorale.
La réponse immunitaire humorale implique une activation des cellules T
auxiliaires de
type 2 (Th2). La différenciation des cellules T naïves en cellules Th2 est
induite par
l'interleukine 6. Les cellules Th2 produisent alors l'interleukine 4,
l'interleukine 5 et
l'interleukine 10, qui stimulent l'activation des cellules B et la production
d'anticorps.
L'interleukine 5 (IL-5), également appelée "eosinophil colony stimulating
factor", est
sécrétée par les lymphocytes T. Elle peut être classée parmi les facteurs de
croissance
de type hématopoïétique car elle stimule la croissance, la différenciation et
l'activité
des éosinophiles qui jouent un rôle important dans la lutte contre les
infections
parasitaires. L'interleukine 5 agit également sur les éosinophiles comme un
agent
chimiotactique. L'IL-5 induit la prolifération des lymphocytes B et leur
sécrétion
d'immunoglobulines.
L'interleukine 6 (IL-6), aussi appelée "hepatocyte stimulating factor",
"hybridoma
growth factor" ou "B cell stimulating factor", est une glycoprotéine sécrétée
notamment
par les cellules T, les monocytes et les fibroblastes. Elle stimule la
croissance et la
différenciation des lymphocytes B en plasmocytes et augmente la génération des
3 5 plaquettes. Elle provoque, par activation des hépatocytes, la sécrétion
des protéines
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de l'inflammation comme le fibrinogène et la protéine C réactive. Elle a un
rôle pro-
inflammatoire.
L'interleukine 10 (IL-10) est produite par les lymphocytes T, les lymphocytes
B et les
mastocytes. L'IL-10 agit notamment au niveau des lymphocytes B : augmentation
de la
viabilité des petits lymphocytes B et augmentation de l'expression des
molécules HLA
de classe II. Cette interleukine est également impliquée dans la régulation de
la
prolifération des mastocytes.
Le métronidazole, ou (methyl-2-nitro-5-imidazolyl)-2-ethanol, est connu dans
l'art
antérieur pour ses propriétés antibactérienne, antiparasitaire et
antiprotozoaire. II
exerce une toxicité sélective vis à vis des microorganismes anaérobies ainsi
que des
cellules hypoxiques. Au niveau de ces dernières, le métronidazole est réduit
en dérivés
capables d'altérer la structure ADN de ces cellules.
Les travaux de la Demanderesse ont permis de mettre en évidence l'implication
de
certaines interleukines dans un processus inflammatoire cutané, et plus
particulièrement l'implication de l'interleukine 5, de l'interleukine 6 et de
l'interleukine 10
dans une inflammation cutanée, et plus particulièrement dans la composante
inflammatoire de la rosacée.
La Demanderesse a maintenant mis en évidence les propriétés intéressantes du
métronidazole sur l'inflammation cutanée, et plus particulièrement sur la
composante
inflammatoire dans la rosacée.
II a été constaté de façon surprenante que l'utilisation du métronidazole
avait pour
conséquence une modification de la sécrétion des interleukines, et plus
particulièrement de la sécrétion de l'IL-5, l'IL-6 et l'IL-10. II a également
été constaté
que l'utilisation du métronidazole avait pour conséquence une inhibition de la
sécrétion
des interleukines, et plus particulièrement de la sécrétion de l'IL-5, l'IL-6
et l'IL-10.
Comme indiqué précédemment, l'invention vise à offrir une nouvelle méthode de
traitement d'une inflammation cutanée consistant à administrer à un sujet
atteint d'une
telle inflammation, une quantité efficace de métronidazole, dans laquelle le
métronidazole est capable de modifier et/ou d'inhiber la sécrétion d'au moins
une
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interleukine_ Plus particulièrement, l'invention vise à offrir une nouvelle
méthode de
traitement d'une inflammation cutanée consistant à administrer à un sujet
atteint d'un
telle inflammation, une quantité efficace de métronidazole, dans laquelle le
métronïdazole est capable de modifier et/ou d'inhiber la sécrétion d'une, de
deux ou de
5 trois interleukines choisies) dans le groupe comprenant 1'IL-5, IL-6 et l'IL-
10.
En conséquence, l'invention se rapporte plus particulièrement à l'utilisation
du
métronidazole pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée au
traitement d'une inflammation cutanée, et préférentiellement de la composante
inflammatoire dans la rosacée.
Plus particulièrement, l'invention se rapporte à l'utilisation du
métronidazole pour la
préparation d'une composition pharmaceutique, destinée au traitement d'une
inflammation cutanée, ladite inflammation résultant de la sécrétion d'au moins
une
interleukine, de deux ou de trois interleukines choisies) dans le groupe
comprenant IL-
5, IL-6 et IL-10.
L'invention concerne plus particulièrement l'utilisation du métronidazole pour
la
préparation d'une composition pharmaceutique destinée à traiter la composante
inflammatoire de la rosacée ; composition dans laquelle le métronidazole est
capable
de modifier, de façon avantageuse d'inhiber, la sécrétion d'au moins une
interleukine
choisie dans le groupe comprenant IL-5, IL-6 et IL-10.
L'invention concerne également l'utilisation du métronidazole pour la
préparation d'une
composition pharmaceutique telle que définie précédemment, dans laquelle le
métronidazole est capable de modifier, de façon avantageuse d'inhiber, la
sécrétion de
deux ou de trois interleukines choisies dans le groupe comprenant IL-5, IL-6
et IL-10.
Plus particulièrement, la composition pharmaceutique objet de la présente
invention
est une composition dermatologique, pour application topique sur la peau.
Par traitement d'une inflammation cutanée, on entend selon la présente
invention le
traitement et/ou la prévention d'une inflammation cutanée.
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Par traitement de la composante inflammatoire de la rosacée, on entend selon
la
présente invention, le traitement et/ou la prévention de la rosacée, à l'un ou
plusieurs
des stades décrits précédemment.
Suivant un premier mode de mise en oeuvre de (invention, la composition est
destinée
au traitement du premier stade de la rosacée.
Suivant un deuxième mode de mise en oeuvre de l'invention, la composition est
destinée au traitement du deuxième stade de la rosacée.
Suivant un troisième mode de mise en oeuvre de l'invention, la composition est
destinée au traitement du troisième stade de la rosacée.
Suivant un quatrième mode de mise en oeuvre de l'invention, la composition est
destinée au traitement du quatrième stade de la rosacée.
Suivant un mode préférentiel de mise en oeuvre, la composition contient 0,0001
à 20%
de métronidazole, de préférence de 0,1 à 2% de métronidazole, et plus
préférentiellement de l'ordre de 0,75 à 1% de métronidazole exprimé en poids
par
3 0 rapport au poids total de la composition.
Bien entendu la présente invention concerne, outre l'utilisation du
métronidazole,
l'utilisation de dérivés de celui-ci. On entend par dérivés des composés qui
se
distinguent du rnétronidazole, par substitution, addition ou suppression d'un
ou
plusieurs groupements chimiques et présentant sensiblement la même activité.
Avantageusement, les compositions de l'invention comprennent outre le
métronidazole
au moins un autre agent thérapeutique susceptible d'augmenter l'efficacité du
traitement. A titre d'exemples non limitatifs de tels agents, on peut citer
des
antibiotiques, des antibactériens, des antiviraux, des antiparasitaires, des
antifongiques, des anesthésiques, des analgésiques, des antiallergiques, des
rétinoïdes, des anti-radicaux libres, des antiprurigineux, des kératolytiques,
des
antiséborrhéiques, des anti-histaminiques, des sulfures, des produits
immunosuppresseurs ou antiprolifératifs.
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Les compositions de l'invention peuvent comprendre en outre tout additif
usuellement
utilisé dans le domaine pharmaceutique, dermatologique, compatible avec le
métronidazole. On peut citer notamment des séquestrants, des antioxydants, des
filtres
solaires, des conservateurs, par exemple la DL-alpha-tocophérol, des charges,
des
électrolytes, des humectants, des colorants, de bases ou d'acides usuels,
minéraux ou
organiques, des parfums, des huiles essentielles, des actifs cosmétiques, des
hydratants, des vitamines, des acides gras essentiels, des sphingolipides, des
composés autobronzants tels que la DHA, des agents apaisants et protecteurs de
la
peau tels que l'allantoïne, des agents propénétrants, des gélifiants. Bien
entendu
l'homme du métier veillera à choisir ce ou ces éventuels composés
complémentaires,
et/ou leur quantité, de manière telle, que les propriétés avantageuses de la
composition selon l'invention ne soient pas, ou substantiellement pas,
altérées.
Ces additifs peuvent être présents dans la composition à raison de 0 à 20 % en
poids
par rapport au poids total de la composition.
On peut citer comme exemples d'agents séquestrants, l'acide éthylènediamine
tétracétique (EDTA), ainsi pue ses dérivés ou ses sels, la
dihydroxyethylglycine, l'acide
citrique, l'acide tartrique, ou leurs mélanges.
2 0 On peut citer comme exemples de conservateurs le chlorure de benzalkonium,
le
phénoxyéthanol, l'alcool benzylique, la diazolidinylurée, les parabens, ou
leurs
mélanges.
On peut citer comme exemples d'agents humectants, la glycérine et le sorbitol.
~5
Les compositions de l'invention peuvent contenir un ou plusieurs agents
propénétrants
dans des concentrations préférentielles allant de 0 à 20 % et plus
préférentiellement
allant de 0,6 à 3°So en poids par rapport au poids total de la
composition. Parmi les
agents propénétrants, on utilise préférentiellement, sans que cette liste soit
limitative,
30 des composés tels que le propylène glycol, le dipropylène glycol, le
propylène glycol
dipélargonate, le lauroglycol, l'éthoxydiglycol.
Avantageusement, les compositions selon l'invention peuvent contenir également
un
ou plusieurs agents tensioactifs dans des concentrations préférentielles
allant de 0 à
35 10 % et plus préférentiellement allant de 0,1 à 2 %.
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Les compositions de la présente invention peuvent se présenter sous toutes les
formes
galéniques normalement utilisées pour une application topique, notamment sous
forme
de solutions aqueuses, hydroalcooliques ou huileuses, de dispersions du type
lotion,
de gels aqueux, anhydres ou lipophiles, d'émulsions de consistance liquide ou
semi
liquide du type lait, obtenues par dispersion d'une phase grasse dans une
phase
aqueuse (H/E) ou inversement (E/H), ou de suspensions ou émulsions de
consistance
molle, semi-liquide ou solide du type crème, gel ou pommade ou encore de micro
émulsions, de micro capsules, de micro particules ou de dispersions
vésiculaires de
type ionique et/ou non ionique.
De préférence les crèmes peuvent être formulées à partir d'un mélange d'huile
minérale, ou d'un mélange de cire d'abeille et d'eau qui s'émulsifie
instantanément,
dans lequel on additionne le métronidazole, dissout dans une petite quantité
d'huile
telle que l'huile d'amande.
Les pommades peuvent être formulées en mélangeant une solution de
métronidazole
dans une huile telle que l'huile d'amande dans de la paraffine chauffée, puis
en
laissant refroidir le mélange.
A titre d'exemples de compositions selon l'invention, on peut citer celles
comprenant
une phase active contenant (exprimé en pourcentage en poids)
- 0 à 90 %, préférentiellement 5 à 25 %, notamment 10 à 20 %, d'eau ;
- 0 à 10 %, préférentiellement 0 à 2 %, notamment 0 à 0,5 %, de tensioactif ;
- 0 à 20 %, préférentiellement 0 à 10 %, notamment 2 à 5 %, de propénétrant ;
- 0,0001 à 20 %, préférentiellement 0,1 à 2 %, de métronidazole ;
et une phase aqueuse comprenant un gélifiant, et de l'eau.
La phase aqueuse d'une composition selon l'invention se présentant sous la
forme
d'une émulsion peut comprendre de l'eau, une eau florale telle que l'eau de
bleuet, ou
une eau thermale ou minérale naturelle, par exemple choisie parmi l'eau de
Vittel, les
eaux du bassin de Vichy, l'eau d'Uriage, l'eau de la Roche Posay, l'eau de la
Bourboule, l'eau d'Enghien-les-Bains, l'eau de Saint Gervais-les-Bains, l'eau
de Néris-
les-Bains, l'eau d'Allevard-les-Bains, l'eau de Digne, l'eau de Maizières,
l'eau de
Neyrac-les-Bains, l'eau de Lons-le-Saunier, les Eaux Bonnes, l'eau de
Rochefort, l'eau
de Saint Christau, l'eau des Fumades et l'eau de Tercis-les-bains, l'eau
d'Avène ou
l'eau d'Aix les Bains.
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Ladite phase aqueuse peut être présente à une teneur comprise entre 10 et 90 %
en
poids par rapport au poids total de la composition, de préférence comprise
entre 20 et
80 % en poids.
A titre d'exemples non limitatifs, on peut citer les gélifiants de la famille
des
polyacrylamides tels que le mélange Sodium acryloyldimethyltaurate copolymer /
isohexadecane / polysorbate 80 vendu sous le nom Simulgel 600 par la société
Seppic, le mélange polyacrylamide / isoparaffine C13-14 / laureth-7 comme, par
exemple, celui vendu sous le nom de Sepigel 305 par la société Seppic, la
famille des
polymères acryliques couplés à des chaînes hydrophobes tel pue le PEG-
150/decyl/SMDI copolymère vendu sous le nom de Aculyn 44 (polycondensat
comprenant au moins comme éléments, un polyéthylèneglycol à 150 ou 180 moles
d'oxyde d'éthylène, de l'alcool décylique et du méthylène bis(4-
cyclohexylisocyanate)
(SMDI), à 35% en poids dans un mélange de propylèneglycol (39%) et d'eau
(26°!°)), la
famille des amidons modifiés tels que l'amidon de pomme de terre modifié vendu
sous
le nom de Structure Solanace ou bien leurs mélanges.
Les gélifiants préférés sont issus de la famille des polyacrylamides tel pue
le Simulgel
600 ou le Sepigel 305 ou leurs mélanges.
Le gélifiant tel que décrit ci-dessus peut être utilisé aux concentrations
préférentielles
2 0 allant de 0,1 à 15 % et, plus préférentiellement, allant de 0,5 à 5 %.
Les gels peuvent être préparës de préférence en dispersant ou en dissolvant le
métronidazole dans un rapport approprié, dans un gel de type carbomère,
poloxamère
ou cellulosique.
D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaitront des
exemples ci-
après concernant l'activité du métronidazole.
Exemple 1 - Activité du métronidazole sur la sécrétion des interleukines
Matériels et méthodes
La mesure de la sécrétion de l'IL-5, l'IL-6 et l'IL-10 a été réalisée sur des
cellules
mononucléaires de sang périphériques (PBMC) selon la méthode utilisée par Endo
(Endo et al., 1993, Int Arch Allergy Immunol, vo1.101, pages 425-430). Les
PBMC sont
isolées à partir de sang veineux périphérique traité à l'héparine, séparées
par
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centrifugation en gradient de densité et suspendues dans du milieu RPMI 1640.
Pour
stimuler la sécrétion des interleukines, les PBMC sont cultivées en présence
de
Concavalin A à 20p,g/ml. Puis les cellules sont incubées pendant 48h à
37°C en
présence de métronidazole. Le surnageant de culture est alors récupéré et
utilisé pour
5 tester le niveau de sécrétion des interfeukines. Les productions d'IL-5,
d'IL-6 et d'IL-10
sont quantifiées à l'aide de kits enzymatiques d'immuno-essai (R&D System).
Les tests
sont réalisés en dupliqué selon les recommandations du fabricant. Les
résultats sont
exprimés (tableau 1) en pourcentage de valeur contrôle et en pourcentage de
variation
de valeurs contrôle.
10 Les productions d'IL-5, d'IL-6 et d'IL-10 par les PBMC sont étudiées en
présence de
métronidazole à 10 ~M.
Tableau 1
Mtronidazole (p.M)I de valeur contrle
(+/- SD)
Scrtion IL-5 10 73,7 +/- 3,5
Scrtion I L-6 10 69,2 +/- 7,1
Scrtion IL-10 10 76,6 +l- 7,8
Le métronidazole inhibe donc la sécrétion de l'interleukine-5, de
l'interleukine-6 et de
l'interleukine-10
