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COMBINAISON COMPRENANT DE LA COMBRETASTATINE ET DES
AGENTS ANTICANCEREUX
La présente invention concerne des combinaisons
thérapeutiques comprenant un dérivé de stilbène et un
agent anticancéreux tel qu'un inhibiteur de VEGF.
Les inhibiteurs de VEGF qui sont des inhibiteurs du
facteur de croissance vasculaire endothélial sont dans la
majorité des cas des produits biologiques choisis parmi
les récepteurs solubles, les antisens, les aptamères de
RNA et les anticorps.
L'invention concerne le traitement de cancers, plus
spécialement des tumeurs solides, avec des associations
de dérivés de stilbène et un inhibiteur de VEGF ;
l'utilisation de cette association pour un traitement
amélioré contre des cancers et des utilisations de ces
composants efficaces pour le traitement (thérapie), la
suppression et l'amélioration de tumeurs et analogues.
Aujourd'hui, une large variété d'agents
chimiothérapeutiques sont utilisés pour le traitement et
la suppression de tumeurs, spécialement des tumeurs
solides malignes. Bien que ces agents puissent avoir un
effet réducteur sur les tumeurs, il est souvent
impossible à ces agents connus d'entraîner une guérison à
cause de l'acquisition d'une résistance contre l'agent
par le cancer, de la récidive des tumeurs et ainsi de
suite. Par conséquent, d'autres agents antitumoraux
supérieurs sont nécessaires.
Alors que l'on sait que les dérivés de stilbène,
ayant un stilbène en cis comme squelette principal,
présentent de fortes activités inhibitrices de la mitose
et une cytotoxicité, la plupart des dérivés de stilbène
ne sont pas encore disponibles en tant qu'agents
pharmaceutiques à cause de leur faible solubilité dans
l'eau.
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Récemment, il a été découvert que certains dérivés
de stilbène ayant une activité d'inhibition de la
polymérisation des tubulines ont également une
hydrosolubilité améliorée. Ceux-ci comprennent le
précurseur phosphorylé de la combretastatine-A4 (voir le
brevet US n 5 561 122) et les dérivés de stilbène
décrits dans le brevet US n 5 674 906. L'utilisation en
clinique de ces dérivés de stilbène est perçue comme
étant prometteuse.
Un objet de la présente invention est de développer
une combinaison d'agents antitumoraux qui soit d'une
efficacite supérieure, spécifiquement, de développer une
préparation pharmaceutique capable d'améliorer
l'efficacité d'un dérivé de stilbène et, en particulier,
de développer et de fournir des agents antitumoraux
présentant une sécurité d'emploi et une efficacité
supérieures dans le traitement de tumeurs malignes.
Il a été trouvé qu'un dérivé de stilbène, administré
conjointement avec un autre agent anticancéreux tel
qu'un inhibiteur de VEGF présente des effets
thérapeutiques améliorés pour inhiber le développement de
tumeurs.
La description et la préparation de l'inhibiteur du
VEGF utilisé de préférence dans l'invention qui est une
protéine chimère VEGF-Trap est décrite dans la demande de
brevet W000/75319. Il y a plusieurs formes de
réalisation de la protéine chimère.
La forme de réalisation correspondant au VEGF-Trap est
celle décrite à la figure 24 (séquence). Le VEGF Trap
utilisé dans l'invention est une protéine de fusion
comprenant la séquence signal du VEGFR1 fusionnée au
domaine Ig D2 du récepteur VEGFR1, elle-même fusionnée au
domaine Ig D3 du récepteur VEGFR2 fusionnée à son tour au
domaine Fc de IgGl encore appelée VEGFRlR2-FcdCl ou le
Flt1D2.F1k1D3.FcOC1.
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Il a été maintenant trouvé que ce nouvel agent
anticancéreux en combinaison avec un dérivé de stilbène
est spécialement efficace dans le traitement de tumeurs
solides. Parmi les dérivés de stilbène efficaces, il y a
la combretastatine A-4 et un dérivé du composé, le (Z)-1-
(3-amino-4-méthoxyphényl)-2-(3,4,5-
triméthoxyphényl)éthène, qui sera appelé produit de
formule II. Ces deux composés présentent de fortes
activités inhibitrices de la mitose, une cytotoxicité et
ils inhibent la polymérisation des tubulines.
La combretastatine A-4 a la formule suivante
.............. ........... .. ..........
............... .... .....................
...................................... ..............
...................................................
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Le produit de formule (II) a la formule suivante
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. . ::: ~..:..... . : ..
..
....
.................... ............. .................... ......... . ........
Ces combretastatines sont à peine solubles dans
l'eau et elles peuvent être utilisées sous la forme d'un
sel, par exemple, chlorhydrate, acétate, phosphate,
méthane sulfonate et le sel d'acide aminé.
La fabrication des dérivés de stilbène qui peuvent
être sous la forme de sels pharmaceutiquement acceptables,
d'hydrates et de solvates, et la fabrication de
composition pharmaceutique orale et/ou parentérale
contenant le composé ci-dessus, son (ou ses) véhicule(s)
et/ou diluant(s) pharmaceutiquement acceptable(s), sont
décrites dans les brevets US n 5 525 632, n 5 731 353
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et n 5 674 906 pour le produit de formule (II) et le
précurseur. Ces brevets, qui sont incorporés dans ce
document en référence, révèlent que les dérivés de
stilbène, y compris le produit de combretastatine de
formule (II), lorsqu'ils sont utilisés seuls, ont des
effets cancérostatiques in vivo.
Il a été récemment découvert que la combinaison de
du sel de sérine de la combretastatine de formule (II)
avec le VEGF Trap réduit de manière significative le
développement du volume des tumeurs par rapport à ce qui
est prédit d'après l'administration à des mammifères
porteurs de tumeurs de chaque composé seul.
Par conséquent, la présente invention est
prometteuse car elle fournit un nouvel agent antitumoral,
par exemple, un médicament chimiothérapeutique contre le
cancer (agent de la chimiothérapie du cancer), comprenant
simultanément ou séparément deux types de principes
actifs, à savoir un dérivé de stilbène et le VEGF Trap.
La présente invention englobe également une thérapie
de combinaison dans laquelle le dérivé de stilbène et le
VEGF Trap sont préparés comme deux préparations
pharmaceutiques distinctes et administrés à un patient en
ayant besoin, simultanément, semi-simultanément,
séparément ou espacés dans le temps.
La tumeur contre laquelle les agents antitumoraux de
la présente invention sont administrés, englobe toutes
sortes de tumeurs apparaissant chez un animal,
spécialement chez un être humain. De préférence, les
agents antitumoraux de la présente invention peuvent être
utilisés pour inhiber la prolifération des cellules
tumorales chez un être humain. Les agents antitumoraux de
la présente invention sont des préparations
pharmaceutiques dans lesquelles au moins deux composés
sont utilisés pour guérir (traiter) ou supprimer des
tumeurs.
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Il n'existe aucune limitation particulière à la
forme d'administration des agents antitumoraux. Les
agents anticancéreux sont administrés en routine par voie
intraveineuse, parentérale et orale. La présente
5 invention englobe également un agent antitumoral
comprenant la combinaison de deux composés ayant des
formes distinctes d'administration.
Le dérivé de stilbène utilisé dans la présente
invention a un stilbène en cis comme squelette principal
et il présente une activité in vivo d'inhibition de la
polymérisation des tubulines et/ou une activité
antitumorale. Les dérivés de stilbène de la présente
invention comprennent également des précurseurs qui
peuvent être convertis in vivo en un dérivé de stilbène.
Toutes les formes de dérivés pharmaceutiquement
admissibles appropriés, telles que des sels, des esters,
des amides, des solvates (produits de solvatation) et des
hydrates de ceux-ci, peuvent être utilisées comme dérivés
de stilbène dans la présente invention, pourvu que les
dérivés présentent une activité antitumorale lorsqu'ils
sont utilisés in vivo.
Les précurseurs du produit de formule (II) sont de
préférences des sels d'acides aminés.
Les acides aminés peuvent être énumérés par des
acides aminés a, des acides aminés R et des acides
aminés y. Les exemples d'acides aminés préférés
comprennent la glycine, l'alanine, la leucine, la sérine,
la lysine, l'acide glutamique, l'acide aspartique, la
thréonine, la valine, l'isoleucine, l'ornithine, la
glutamine, l'asparagine, la tyrosine, la phénylalanine,
la cystéine, la méthionine, l'arginine, -alanine, le
tryptophane, la proline, l'histidine, etc. En particulier,
la thréonine et la sérine sont préférées au vu des effets
pharmaceutiques et de la sécurité d'emploi. Bien que tous
ces acides aminés puissent être sous la forme L, D ou DL,
la forme L est préférée.
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Comme il a été décrit ci-dessus, le dérivé de
stilbène de la présente invention est un composé ayant un
squelette de stilbène en cis dans sa structure et il
présente une activité d'inhibition de la polymérisation
des tubulines et/ou une activité antitumorale. De tels
dérivés de stilbène sont illustrés par la
combretastatine A-4 et le produit de formule (II) décrits
dans des publications de l'art antérieur, telles que les
brevets US n 4 996 237, n 5 561 122 et n 5 430 062.
Les dérivés de stilbène de l'art antérieur, décrits dans
ces publications de brevets et la combretastatine de
formule (II) décrite dans les brevets US n 5 525 632 et
n 5 731 353, peuvent être utilisés pour les dérivés de
stilbène de la présente invention, dans la mesure où ils
répondent à la définition des dérivés de stilbène dans la
présente invention.
Les dérivés de stilbène susmentionnés peuvent être
fabriqués par la technique de routine comprenant le
procédé décrit dans les publications connues
susmentionnées.
Parmi les dérivés de stilbène de la présente
invention, il y a des sels, des esters et d'autres
dérivés de stilbène, et des dérivés qui peuvent être
convertis in vivo en dérivés de stilbène, dans la mesure
où les dérivés de stilbène manifestent les activités
objectives susmentionnées dans un corps d'animal.
Parmi les composés représentés par la formule
générale (II) ci-dessus, il y a les composés représentés
par la formule (Iia) suivante :
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Un composé de formule (Iia) est soluble dans l'eau
et il peut être sous la forme d'un sel, par exemple,
chlorhydrate, acétate, méthane sulfonate et analogues.
Comme résultat, pour les objectifs de la présente
invention, les combinaisons ne sont pas exclusivement
limitées à celles qui sont obtenues par une association
physique des constituants, mais elles englobent également
celles qui permettent une administration séparée, qui
peut être simultanée ou espacée sur une période de temps.
L'un des modes de réalisation préférés dans la
présente invention est l'utilisation d'un composé IIa en
quantité efficace pour inhiber la croissance tumorale en
combinaison avec le VEGF Trap.
Les agents antitumoraux de la présente invention
peuvent être administrés par voie parentérale, comme il a
été discuté ci-dessus. Dans ce cas, l'agent antitumoral
peut être administré par voie intraveineuse en bolus ou
préparé dans une poche de perfusion intraveineuse, avec
des vecteurs pharmaceutiquement acceptables par
différents procédés connus de l'homme du métier. De
préférence, l'agent pharmaceutique est fabriqué par une
technique de routine, par exemple, sous une forme
galénique unitaire et sous la forme d'une préparation
lyophilisée et il est de nouveau préparé dans de l'eau ou
dans une autre perfusion liquide appropriée en
administration.
Le rapport des deux composants pour la préparation
pharmaceutique pour l'agent antitumoral de la présente
invention peut varier dans une large plage, selon un
certain nombre de facteurs, tels que la quantité
souhaitée d'administration et du vecteur
pharmaceutiquement acceptable en utilisation. En ce qui
concerne les quantités ou la combinaison dans
l'administration du dérivé de stilbène dans la
préparation pharmaceutique en tant qu'agent antitumoral
de la présente invention, on préfère utiliser le dérivé
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de stilbène en quantité d'approximativement 0,01 à 100 et,
en particulier, approximativement 0,1 à 10 parties en
poids pour 1 partie en poids de VEGF Trap présent dans la
préparation pharmaceutique. Ainsi, lorsque la préparation
pharmaceutique dans la présente invention contenant
deux principes actifs doit être administrée au patient,
elle est administrée en une quantité qui donnera la plage
d'administration définie ci-dessus.
Si la préparation pharmaceutique doit être
administrée par étapes, la plage d'administration définie
ci-dessus peut être établie comme le rapport moyen pour
les préparations pharmaceutiques séparées.
La présente invention est maintenant expliquée plus
en détail en référence à des modes de réalisation
préférés de celle-ci. Il faut noter que ceux-ci ne sont
donnés qu'à titre d'exemple et ils ne sont pas destinés.à
limiter l'invention.
L'efficacité d'une combinaison peut être démontrée
par la détermination de sa synergie thérapeutique. Une
combinaison manifeste une synergie thérapeutique si elle
est thérapeutiquement supérieure au meilleur agent
utilisé seul à sa dose optimale (T.H. Corbett et al.,
Cancer Treatment Reports, 66, 1187 (1982)).
L'efficacité d'une combinaison peut être également
démontrée par comparaison de la dose maximale tolérée de
la combinaison avec la dose maximale tolérée de chacun
des constituants séparés dans l'étude en question. Cette
efficacité peut être quantifiée, par exemple, par le log,.o
des cellules tuées, lequel est déterminé par la formule
suivante :
loglo des cellules tuées = T-C(jours)/3,32 x Td
dans laquelle T-C représente le délai de croissance
tumorale, ce qui est le temps moyen en jours pour que les
tumeurs du groupe traité (T) atteignent une valeur
prédéterminée (1 g par exemple) et pour que les tumeurs
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du groupe contrôle (C) atteignent la même valeur et Td
représente le temps en jours nécessaire pour que le
volume des tumeurs du groupe contrôle double. Pendant la
phase exponentielle de la croissance tumorale
(T.H. Corbett et al., Cancer, 40, 2660.2680 (1977) ;
F.M. Schabel et al., Cancer Drug Development, Part B,
Methods in Cancer Research, 17, 3-51, New York, Academic
Press Inc. (1979) ). Un produit est considéré actif si le
log,.o des cellules tuées est supérieur ou égal à 0,7. Un
produit est considéré très actif si le log,.o des cellules
tuées est supérieur à 2,8.
La combinaison, utilisée à sa propre dose maximale
tolérée, dans laquelle chacun des constituants sera
présent à une dose généralement n'excédant pas sa dose
maximale tolérée, manifestera une synergie thérapeutique
lorsque le log,.o des cellules tuées est supérieur d'au
moins 1 1og10 quand il est comparé à la valeur du log,.o
des cellules tuées du meilleur constituant lorsqu'il est
administré seul.
L'inhibition de la croissance tumorale résulte d'une
réponse à une thérapie comprenant l'administration d'une
quantité efficace de combretastatine et d'une quantité
efficace d'un second composé anticancéreux tel que décrit
ci-dessous à un être humain souffrant d'un cancer. Dans
un cas acceptable, cette administration supprime la
croissance tumorale et, de ce fait, diminue la taille
mesurable des tumeurs. Dans un cas optimal, la tumeur
subit une régression complète.
Comme il a été décrit ci-dessus, il n'existe aucune
limitation particulière au procédé d'administration des
agents antitumoraux de la présente invention au mammifère
traité. Ils peuvent être administrés par voie orale ou
parentérale, comme par voie intraveineuse, sous-cutanée
ou intramusculaire. Pour une efficacité rapide,
l'administration parentérale de combretastatine, telle
que par administration intraveineuse, en bolus ou par
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perfusion est préférée. Dans le procédé d'administration
de la préparation pharmaceutique selon la présente
invention, la combretastatine peut être administrée
simultanément avec un autre agent anticancéreux ou les
5 deux peuvent être administrés séquentiellement dans un
ordre facultatif. Le procédé et la séquence optimaux pour
l'administration de combretastatine et du second agent
anticancéreux peuvent être choisis de manière appropriée
par un homme du métier avec l'aide de la technique de
10 routine et des informations contenues dans le présent
mémoire.
Une quantité efficace, combinant la combretastatine
avec le VEGF Trap et inhibant la croissance tumorale,
correspond à une unité curative pouvant être administrée
à l'être humain souffrant d'une tumeur sensible aux
constituants de cette combinaison. L'unité curative
souhaitable de manière pratique varie selon les formes
galéniques individuelles de la combretastatine utilisée,
les formes galéniques individuelles de l'agent
anticancéreux auxiliaire utilisé, les cellules tumorales
individuelles étant traitées et les hôtes individuels
étant traités. Les doses curatives optimales pour des
conditions données pré-établies peuvent être choisies de
manière appropriée par un homme du métier avec l'aide
d'unités curatives de tests et les informations contenues
dans le présent mémoire.
L'agent antitumoral de la présente invention est une
préparation pharmaceutique comprenant au moins de la
combretastatine et le VEGF Trap tels que décrits
ci-dessus, de telle manière que les deux principes actifs
puissent être contenus sous la forme d'un mélange dans
une préparation pharmaceutique. Toutefois, les
deux principes actifs dans la présente invention peuvent
être également contenus séparément dans des préparations
pharmaceutiques distinctes à utiliser séquentiellement et
en combinaison. Il est noté qu'une telle préparation
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pharmaceutique contenant d'autres agents (troisième et
quatrième composants médicaux et ainsi de suite) tels que
d'autres agents antitumoraux, peut être naturellement
comprise par la présente invention, dans la mesure où les
composants efficaces utilisés dans la présente invention
sont contenus dans la préparation pharmaceutique. En
outre, il est possible que les vecteurs, diluants et
autres substances, pharmaceutiquement acceptables pour
l'une quelconque des préparations pharmaceutiques dans la
présente invention (une seule préparation pharmaceutique
contenant les deux composants dans la présente invention
et des préparations pharmaceutiques séparées contenant
chacune séparément l'un des deux composants pour une
utilisation en combinaison) soient contenus dans l'agent
antitumoral de la présente invention.
La présente invention est maintenant expliquée plus
en détail en référence à des modes de réalisations
préférés de celle-ci. Il faut noter que ceux-ci ne sont
donnés qu'à titre d'exemples et ils ne sont pas destinés
à limiter l'invention.
Les préparations pharmaceutiques pour perfusion ont
été préparées conformément à la composition suivante
utilisant les composés, combretastatines de formule (IIa)
et A4, représentés, respectivement, par les formules
chimiques qui suivent
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Composé (I) (sous la forme de phosphate) 10 mg
et
Sérum physiologique 9,5 ml
Composé (Iia) (sous la forme de chlorhydrate) 5 mg
0,5 ml et
Sérum physiologique 9,5 ml
Effet antitumoral et tests
L'efficacité des combinaisons sur des tumeurs
solides peut être déterminée expérimentalement de la
manière suivante :
Les animaux soumis à l'expérience, des souris
femelle C3H/HeN qui sont greffés bilatéralement par voie
sous-cutanée avec 30 à 60 mg d'un fragment de tumeur
adénocarcinome mammaire murin MA13/C au jour 0. Dans le
cas d'un traitement d'une tumeur précoce, les animaux
implantés sont distribués aléatoirement dans différents
groupes destinés à recevoir, ou non (contrôles), le ou
les traitements. Ici où il s'agit d'un traitement de
tumeurs avancées, Les animaux porteurs de tumeurs ayant
atteint une taille tumorale préalablement définie et
supérieure à 200 mg, sont distribués dans les différents
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groupes, de traitements et contrôles, de manière à ce que
la gamme de taille tumorale soit comparable d'un groupe à
l'autre. Les animaux ne portant pas de tumeurs peuvent
être également soumis aux mêmes traitements que les
animaux portant des tumeurs afin d'être capable de
dissocier l'effet toxique de l'effet spécifique sur la
tumeur. Généralement, la chimiothérapie commence de 3*à
22 jours après la greffe, selon le type de tumeur et la
taille tumorale désirée. Les animaux sont observés et
pesés tous les jours. Une dose induisant une perte de
poids de 20% ou plus au nadir (moyenne du groupe) ou une
mortalité de 10-0. ou plus est considérée comme toxique.
L'évaluation de l'activité tumorale est réalisée à la
plus forte dose non toxique.
Les tumeurs sont mesurées 2 ou 3 fois par semaine
jusqu'à ce que la tumeur atteigne approximativement 2 g
ou jusqu'à ce que l'animal meure si cela survient avant
que la tumeur atteigne 2 g. Les animaux sont autopsiés
lorsqu'ils sont sacrifiés.
L'activité antitumorale est déterminêe conformément
à différents paramètres enregistrés tels que la dose
(mg/kg), le mode d'administration, le temps
d'administration, la toxicité et le log des cellules
tuées qui est fonction du délai de croissance tumorale
ainsi que du temps de doublement de la tumeur.
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