Note: Descriptions are shown in the official language in which they were submitted.
.a~ .3~
:
La presente invention. concerne de nouveaux dérives
steroïdes ll~-substitues, répondant a la formule générale (I): ;
R2
R~ R3
E~O
dans laquelle Rl représente un radical alcényle renfermant de
2 à 8 atomes de caxbone; un radical phényle; un radical
phényle substitué par un ou plusieurs radicaux al.coxy; un
radical phénylalkyle renfermant de 7 à 13 atomes de carbone;
ou un radical thiényle, R2 représente un radical alcoyle
renfermant de 1 à 4 atomes de carbone, R3 represente un
radical hydroxyle, un radical acyle renfermant de 1 à 18
atomes de carbone~ ou un radical acvloxy renfermant de 1 a 18
atomes decarbcneetR4represente un radical alkyle renfermant
de 1 a8 atomes de carbone ou un radical alcynyle renfermant
de 2 a 8 atomes de carbone.
L'invention vise également un procédé de prépara-
tion de ces nouveaux dérives.
Lorsque Rl represente un radical alcényle il
s'ayit, de preference, du radical vinyle, isopropenyle ou
allyle, du radical 2-methyl allyle ou isobutenyle.
Lorsque Rl represente un radical phenyle ou
phenylalkyle il s'agit, de preférence, du rad.ical benzyle ou
du radical phenyl, eventuellement substitué en ortho, méta
ou para par un ou plusieurs radicaux alcoxy renfermant de
1 a 4 atomes de carbone, comme par exemple, un radical methoxy.
Lorsque R3 repr.ésente un radical acyle ou acyloxy
on entend, de preférence, par acyle le reste d'un acide
~1 4 f~
aliphatique ou cycloaliphatique, saturé ou insaturé, et
notamment le reste d'un acide alcanolque, tel que, par
exemple, l'acide acétique, propionique, butyrique ou isobutyri-
que ou undécylique; le reste d'un acide hydroxy alcanolque,
tel que, par exemple, l'acide hydroxyacétique; le reste
d'un acide cycloalcoylcarboxylique ou (cycloalcoyl)
alcanoique, tel que, par exemple, l'acide cyclopropyl,
cyclopentyl ou cyc~ohexylcarboxylique, cyclopentyl ou cyclohexyl
acétique ou propionique, le reste d'un acide benzoique ou
d'un acide phénylalcanoique, tel que l'acide phényl acétique
ou phényl propionique; le reste d'un amino acide, tel que
l'acide diéthylamino acétique ou aspartique ou le reste de
l'acide formique.
Lorsque R4 représente un radical alkyle, il
s'agit, de pxéférence, du radical méthyle, éthyle, propyle
ou butyle.
Lorsque R4 représente un radical alcynyle, il s'agit,
de préférence, du radical éthynyle, l-propynyle, 2-propynyle,
2-butynyle ou butadiynyle.
Parmi les composés de l'invention, on peut citer,
en particulier, ceux pour lesquels R2 représente un radical
méthyle r ceux pour lesquels R3 représente un radical hydroxyle,
ceux pour lesquels R4 représente un radical alcynyle renfex-
mant de 2 à ~ atomes de carbone, comme par exemple, un radi-
cal éthynyle, ceux pour lesquels R3 représente un xadical
acyle renfermant de 1 à 8 atomes de carbone, comme par
exemple, un radical acétyle, ainsi que ceux pour lesquels R4
représente un radical alkyle ren~ermant de 1 à 8 atomes de
carbone, comme exemple~ un radical méthyle.
Parmi les composés de llinvention, on peut encore
citer ceux pour lesquels Rl représente un radic.al alcényle,
linéaire ou ramifié, ren~ermant de 2 à 4 atomes de carbone,
- 2 -
'~r ~
comme par exemple, un radical vinyle ou un radical allyle.
On peut également citer les composes de formule (I?,
pour lesquels Rl représente un radical phenyle éventuellement
substitues sur le noyau phényle par un radical alcoxy renfer-
mant de 1 a 4 atomes de carbone ou un radical benzyle,
ainsi que ceux pour lesquels Rl représente un radical thiényle.
Parmi les composés de l'invention, on peut citer
tout particulierement les composes dont les noms suivent:
- Le 3,17 ~-dihydroxy 11 ~-vinyl 17~-ethynyl estra
ly3,5 (10) triene;
- Le 3,17 ~-dihydroxy 11 ~-allyl 17~-éthynyl estr~
1,3,5 (10) triene;
- Le 3,17 B-dihydroxy 11 ~-(p-méthoxy phényl)
17a-éthynyl estra 1,3,5 (10) trienei
- Le 3,17 ~-dihydroxy 11 ~-(o-méthoxy phényl)
17~-éthynyl estra 1,3,5 (10) triene,
- Le 3,17 ~-dihydroxy 11 ~-benzyl 17~-éthynyl
estra 1,3,5 ~10) triene;
- Le 3,17 ~-dihydroxy 11 ~-(2-thienyl) 17a-éthynyl
20 estra 1,3,5 (10) triene;
- Le 3-hydroxy ll~-vinyl 17~-methyl 17~-acé-tyl
estra 1,3,5 (10) triene;
Selon l'invention, les composes de formule (I)
sont préparés par un procedé caractérise en ce que llon
soumet Ull composé de formule (II):
Rl ~ (II)
~ ~
dans laquelle Rl, R R3, et. R4 conservent la même signifi-
cation que precedemment, a l'action d'un agen-t d'aromatisation,
- 3
,~,
~L d . ;Z ~
puis de saponification, pour obtenir un compose de formule (I):
~ R3 ~ I ~
~10 /~/1
L'agent d'aromatisation est, de preference, un
halogenure d'acyle, par exemple, le bromure d'acetyle ou bien
l'anhydride ace~ique. On peut egalement utiliser un melange
d'halogenure d'acetyle et d'anhydride acetique.
L'action de cet agent d'aromatisation est suivie
de celle d'un agent de saponi~ication. L'agent de saponifi-
cation utilise est, de préference, une base alcaline comme
la soude ou la potasse, l'amidure de sodium, le terbutylate
de potassium ou l'acetylure de lithium dans l'ethylène
diamine. La réaction de saponification a lieu, de preference,
au sein d'un alcool inerieur, comme le méthanol ou l'e-thanol.
Dans un mode de réalisation préférée du procede de
2 0 1 1 invention r
- l'agen-t d'aromatisation est un mélange de hromure
d'acetyle et d'anhydride acetique;
- l'agent de saponification est la soude.
Les produits de depart de formule (II):
l ~ 2 ~ R3 (II)
0~
sont des produits nouveaux; ils peuven-t e-tre préparés selon
un procéde semblable au procéde decri-t dans la demande de
brevet canadienne noO 294,879 du 12 janvier 1978 deposée par
-- 4 --
~.Z~3;~
la Societe demanderesse et intitulee " Procede de préparation
de nou~eaux derives steroides 4lg~dieniques 11 -substitues" .
Ce procede consiste a soumettre un compose de
formule (III):
Rl ~ R3 ~III)
R4
L OH
~ Rl, R2, R3 et R4 conservent leur signification
precedente et L represente un groupement cetal, a l'action
_ .. _ __ ,......... _ _, .... . ...... .. ~_ .. ... _. __ ...
d'un agent ~ .
.. ...
~D3~
de déshydratation capable de libérer la fonction c~tone, pour
obtenir le composé de formule II correspondant.
Les composés de formule (III), utilisés comme pro-
duits de depart du procédé indiqué ci-dessus, sont également
des produits nouveaux; ils peuv~nt être préparés selon un pro~-
cédé semblable au procédé décrit dans la demande de brevet cana~dienne no. 294,843 du 12 j~nvier 1978 déposee par la Sociéte
demanderesse et intitulée "Nouveaux dérivés steroides substi-
tués en 11 ~, ainsi que leur procédé de préparationl'. Ce pro-
cédé consiste à soumettre un composé de formule ~IV);
, R4 (IV)
L
dans laquelle I., R2, R3 et R4 conservent leur significationprécédente, a l'action d'un composé choisi dans le groupe cons-
titué par les composés de formule (Rl)2 CuLi, les composés de
formule Rl MgHal et les composés de formule RlLi, Rl conservant
la même signification que précédemment. et Hal représentant unatome d'halogene, le cas échéant, en présence d'une quantité
catalytique d'halogénure cuivreux, pour obtenir le composé de
formule (III) correspondant.
Les produits de formule (IVj sont, en général, des
produits connus; ils peuvent être prépares selon les procédes
indiqués dans les brevets francais no. 15S0 974, 2 201 287 et
2 082 129.
Il sexa donné plus loin dans la partie expérimentale,
3~ des exemples de prépara-tion détaillés des composes de formule
II, u~ilisés comme produits de départ du procedé de la présente
invention.
Z~3~
Les composes de ~ormule (I) pr~sentent d'int~ressa~es
propri~tes pharmacologiques et no~amment une remarquable ac-
tivit~ estrogène qui justifi~nt l'application et th~rapeutique,
à titre de méd.icaments, des compos~s de formule tI) r
., ~
3;3~
Ces composes peuVent donc être utilises, par exemple,
pour le traitement des troubles menstruels, comme l'amenorrhee, la
dysmenorrhee ou l'oligoménorrhee, le traitement des troubles ~onc-
tionnels de la menopause, comme les paresthesies, les palpitations,
les vertiges ou le traitement des troubles metaboliques de la meno-
pause, comme la troph.icite cutanee ou llosteoporose. `
Parmi les medicaments de l'invention, on peut citer, enparticulier~ le 3,17 ~-dihydroxy 11~ vinyl 17~-ethynyl estra 1,3,5
(10) triene.
La posologie utile varie en fonction de l'affection à -trai-
ter et de la voie d'administration; elle peut aller, par exemple,
de 0,01 mg à 0,5 mg par jour, par voie orale,
Les composés de formule (I) sont utilisés par voie bucca-
le, rectale, transcutanee ou intraveineuse. Ils peuvent etre pres-
crits sous forme de comprimes, de comprimes enrobes, de cachets, de
capsules, de granules, d'emulsions, de sirops~ de suppositoires, de
solutes et de suspensions injectables.
Les composes de formule ~I), tels que definis ci~dessus,
peuvent être employés pour preparer des compositions pharmaceuti--
ques renfermant, comme principe actif, au moins un composé de for-
mule I.
Le ou les principes actifs peuvent y être incorpores a
des excipients habituellement employes dans ces compositions phar-
maceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'ami-
don, le stearate de magnesium, le beurre de cacao, les vehicules
- aqueux ou non, lescorps gras d'origine animale ou végetale, les de~
rivés paraffiniques, les glycols, les divers agen-ts mouillants
dispersants ou emulsi~iants, les conservateurs.
Les exemples suivant illustrent l'invention sans toute-
fois la limiterOPreparation 1: 3-/(1,2,-ethanediyl) acetal/ de 5~-hydroxy 1~ -
vinyl 17~-trimethylsilyloxy 17/~ cyano estr-9--ene 3-one
~ 2~3~3~
On ajoute à -10C, 22 mg de chlorure cuivreux dans 4 cm3
d'une solution 1,5 M de bromure de vinyl magnesium dans le tétra-
hydrofuranne. On ajoute 1,30 g de 3- ~1,2-ethanediyl) acétal7 de
5a, 10a-époxy 17a-trimethylsilyloxy 17~-cyano estr-9(11) ène 3-
one en solution dans 6 cm3 de tetrahydrofuranne. On laisse 15
heures à -10C et verse dans une solution aqueuse de chlorure d'am-
monium et extrait à l'ether, on sèche, evapore à sec, cristallise
dans l'ether et obtient 1,21 g du produit recherché fondant à 213C.
Preparation 2: 3_~I,2-ethanediyl) acetal7 de 5a-hydroxy ll~-allyl
17a-trimethylsilyloxy 17~-c~ano estr-9-ene_3-one
Stade A: Pré~aration d'une solution d'allyl lithium:
_____ _ ___ .______ _ ___ ________ ___ _ _______
On dissout 26,8 g d'allyl phényl ether dans 75 cm3 d'ether.
On verse à - 15C cette solution dans une suspension de 5,6 g de
lithium dans 150 cm3 de tétrahydro~uranne.
Stade B: 3-~(1,2-ethanedi~l) acetal7 de 5a-hydroxy ll~-all~l 17a-
___~_ _ __ _____________ __ ______ __ ____ ____ __ _ __ _ ____
trimethylsilylox~ 17~-c~ano estr-9-ène 3-one:
_______ __ _ ___ __ __ ___ ___.______ _____
On ajoute à -~8C, ~3 cm3 de la solution d'allyl lithium
preparee au stade A dans une suspension rengermant 5,15 g de com-
plexe de dime-thyl sul~ure-bromure de cuivre, dans 20 cm3 de tetra-
hydrofuranne. Après 15 minutes à - 70C, on ajoute à la solution
ainsi obtenue, 4,13 g de 3-/(1,2-e-thanediyl) acetal~ de 5a, 10a-
epoxy 17a-trimethylsilyloxy 17~-cyano estr-9(11) ène 3-one dissous
dans 20 cm3 de tetrahydro~uranne. Apres 30 minutes, on verse dans
une solution aqueuse de chlorure dIammonium et extrait à l'ether.
On sèche, evapore a sec et obtient 4,2 g du produit recherche.
a (0,6 ~ CIIC1 ) = - 52 -~ 2.
~ 3
Preparation 3: 3-/1,2-ethanediyl) acetal7 de 5a hydro~y 11~-(p-
me-thox~ phenyl) 17a-trime-thylsilyloxy 17~-cyano es-tr-9-ene 3-one
On opere comme indique à la preparation 1, à partir de
3-/tl,2-ethanediyl) acetal7 de 5a, 10a-epoxy 17a-trimethylsilyloxy
3~
17~-cyano estr-9(11) ène 3-one et de bromure de (p-méthoxy phényl)
magnésium.
F = 210C.~ D ~0~4 % CHC13) = - 12 + 2.
Préparation 4: 3-/(1,2-éthanediyl) acétal7 de 5a-hydroxy ll~-(o-
métho~y phényl) 17a-triméthylsilyloxy-l7~-cyano _str-9-ène 3-one
On opère comme indiqué à la préparation 1, à partir de
~
3-/~1,2-éthanediyl) acéta~ de 5a,10a-époxy 17a-triméthylsilyloxy
17~-cyano es-tx-9(11) ène 3-one et de bromure d'(o-méthoxy phényl)
magnésium.
a D (0,55 % CHC13) = - 16,5 + 1.
Préparation 5: 3- ~ 1,2 éthanediyl) acétal7 de 5a-hydroxy 11~-
_ _ _ _ _ ,
benzyl 17a-triméthylsilyloxy 17~-cyano estr-9-ène 3-one
On opère comme indiqué à la préparation 1, à partir de
3- ~ 1,2-éthanediyl) acéta ~ de 5a,10a-époxy 17a-triméthylsilyloxy
17~-cyano estr-9(11) ène 3-one e-t de bromure de benzyl magnésium.
F = 160C. a D (0-3 % CHC13) = - 86 + 3-
Préparation 6 3-/(1,2-éthanediyl) acé-ta~ de 5a-hydroxy 11~-(2
On opere comme indiqué à la préparation 1, à partir de
3-~(1,2-éthanediyl) acéta ~ de 5~,10a-époxy 17a-triméthylsilyloxy
17~-cyano estr-9(11) ène 3-one et de bromure de (2-thiényl) magné-
sium.
F = 260C. a D (0~4 % CHC13) = + 34 -~ 2,5.
Prépara-tion 7: 3-~ 1,2-éthanediyl) acét ~ de_5a,10~-épo~y 17a-
17~-acétyl estr-9(11) ène 3-one
On introduit 10 g de 3-/(1,2-éthanediyl) acétal7 de 17a-
méthyl 17~-acétyl es-tr 5(10),9(11) diène 3-one préparé selon le
procédé indiqué dans le brevet français n 2 149 302, dans une so-
lu-tion de 0,5 cm3 de pyridine, dans 240 cm3 de chlorure de méthyl-
ène. On refroidit à 0C et ajoute 40 cm3 d'une solution d'hexa-
fluoroacetone (30 millimoles) et on verse, apres 10 minutes, dans
une solution aqueuse de -thiosulfate de sodium et de bicarbonate de
~ d .Z~33~
sodium. On extrait au chlorure de méthylène, sèche, évapore ~ sec,
crlstallise dans l'éther isopropylique et obtien-t8,2 g du produit
recherché.
Préparation 8: 3-/(1,2-éthanediyl) acétal7 de 5a,17~-dihydroxy
vinyl 17~-éthynyl estr-9-ène 3-one
On dissout 3,5 g de 3-/(1,2-éthanediyl) acéta ~ de 5a-
hydroxy ll~-vinyl 17~cyano 17a-triméthylsilyloxy estr-9-ène 3-one
(obtenu à la préparation 1), dans 145 cm3 d'éthylène diamine. On
ajoute à la solution obtenue 6 g de complexe acétylure de lithium-
éthylène diamine. On chauffe à 50 - 60C pendant une nuit. On
verse dans l'eau glacée, extrait à l'éther, sèche, évapore à sec
chromatographie sur silice dans le mélan~e éther de pétrole-acétate
dié-thyle ~6- 4) et obtient 2,85 g du produit recherché fondant à
160C.
Préparation 9: 3-/1,2-é-thanediyl) acétal7 de 5a,17~-dihydroxy 11~-
allyl 17a-éthynyl estr-9-ène 3=one
On opère de la manière décrite ~ la préparation 8, à partir
de 2,4 g du produit obtenu à la préparation 2 et obtient 2,02 g de
produit attendu.
Préparation 10: 3- ~ 1,2-éthanediyl) acétal7 de 5a,17~-dihydroxy
-
ll~-(p-méthoxy phényl) 17a-éthynyl estr-9-ène 3-one
On opère de la manière décrite à la préparation 8, à partir
de 3,3 g du produit obtenu à la préparation 3 et obtient 2,4 g de
produit attendu F = 150C.
Préapration 11: 3- ~ 1,2 éthanediyl) acéta ~ de 5a, 17~-dihydroxy
.
11~-(o-méthoxy phényl) 17a-éthynyl estr-9-ène 3-one
On opère de la manière décrite ~ la préparation 8, à
partir du produit obtenu à la préparation 4 et obtient le produit
attendu.
Préparation 12: 3-~(1,2-éthanediyl) acétal/ de 5a,17~-dihydroxy
ll~-benzyl 17a-éthynyl estr-9-ène 3-one
On opère de la manière décrite à la préparation 8,
--10--
,3~
partir de 2,8 g du produit obtenu à la prépara-tion 5 et obtient
2,05 g de produit attendu F = 152C.
Préparation 13: 3- ~ 1,2-éthanediyl) acétal7 de 5a,17~-dihydroxy
_ _ _
2-thiényl) 17a-éthynyl estr-9-ène 3-one
On opère de la manière décrite à la pr~paration 8, à
partir de 3 g du produit obtenu ~ la préparation 6 et ohtient 2,37 g
de produit attendu F = 140C.
Préparat on 14: 3-~ 1,2-éthanediyl) acéta~ de 5~-hydroxy 11~-
vinyl_l7a~méthyl 17~-acetyl estr-9-ene 3-one
On a~ou-te ~ - 40C, 150 mg de chlorure cuivreux à 17,6 cm3
d une solution de bromure de vinyl magnésium. On ajoute ensuite 4 g
de 3-~ 1,2-éthanediyl) acéta ~ de 5a,10a~époxy 17a-méthyl 17~-acétyl
estr-9(11) ène 3-one (obtenu à la préparation 7) dissous dans 15 cm3
de tétrahydrofurrane. Après 2 heures à - 40C, on verse le mélange
reactionnel sur une solution aqueuse de chlorure d ammonium et
extrait à l éther, on sèche, évapore à sec, cristailise dans l éther
isopropylique et obtient ainsi 2,68 g du produit recherché.
Préparation 15~ vinyl 17a-éthynyl 17~-hydroxy estra 4,_9-diène
3-one
On chauffe au reflux pendant 30 minutes, un mélange de
2,85 g de 3-~(1,2-éthanediyl) acétal7 de 5a,17a-dihydroxy ll~-vinyl
17a-éthynyl estr-9-~ne (obtenu à la pré~aration 8), 3 g de résine
Redex CF et 200 cm3 d éthanol à 95. On ~iltre la résine et éva-
pore le solvant . On chromatographie le résidu sur silice en éluant
au mélange éther de pétrole-acétage d éthyle t6 - 4) et obtient
2,02 g du produït recherché fondant à 125C.
Pré~arat.~ons 16 à 21:
En opérant comme ~ la préparation 15, les prduits suivants
ont été obtenus:
* Marque de commerce
:
~ Z~33~
. .
PRODUITS DE DEPART : PRODUITS FINALS
__~___________________________.____.._________ _ _ _________________
3-~ 1,2-éthanediyl) acétal~ de ~ -allyl 17~-éthynyl 17~-
5~,17~-dihydroxy ll~-allyl : hydroxy estra 4,9 diène 3-one
17~-éthynyl estr-9-ène 3-one
~obtenu à la préparation 9) : F = 167C.
___________.______________________ ___________ ______________~____
3-/(1,2-éthanediyl) acétal7 de : ll~-(p-méthoxy phényl) 17~-
5~,17~-dihydroxy ll~-(p mé~hoxy : éthynyl 17 ~-hydroxy es-tra
phényl) 17a-éthynyl : 4,9-diène 3-one
estr-9-ène 3-one
(obtenu à la préparation 10) : F = 200C.
________________________________._________________________________
3- ~ 1,2-éthanediyl) acétal7 de ~ -(o-méthoxy phényl) 17~-
5a,17~-dihydroxy ll~-(o-mé- : éthynyl 17~-hydroxy estra
thoxy phényl) 17~-éthynyl : 4,9-di~ne 3-one
estr-9-ène 3-one
~obtenu à la préparation 11) : F = 253C.
____ _____________________________________________________________
3- ~ 1,2-éthanediyl) acétal7 de : ll~-benzyl 17~-éthynyl 17~-
5~,17~-dihydroxy ll~-benzyl : hydroxy estra 4,9-diène 3-one
17~-éthynyl estr-9-ène 3-one
(obtenu à la préparation 12~ : F = 179C.
____._____________________________________________________________
3-/(1,2-éthanediyl) acétal7 de ~ -(2-thiényl) 17~-éthynyl
5a,17~-dihydroxy 11~-(2- : 17~-hydroxy estra 4,9-diène
thiényl) 17~-éthynyl estr-9- : 3-one
ène 3-one
obtenu à la préparation 13) : F = 209C.
__________ _~______ __ ___ _ ____________ ______________________
3- ~ 1,2-éthanediyl) acéta ~ de ~ -vinyl 17~-méthyl 17~-
5~-hydroxy ll~-vinyl 17~- : acétyl estra 4,9-diène 3-one
méthyl 17~-acétyl estr-9-ène
3-one : F = 105C.
(obtenu à la préparation 14)
Exemple: 3,17~-dihydroxy ll~-vinyl 17~-é-thynyl estra 1,3,5 (10)
triène
On dissout 1,10 g de ll~-vinyl 17~-éthynyl 17~-hydroxy
estra 4,9-diène 3-one (obtenu à la préparation 15) dans 7,5 cm3 de
chlorure de méthylène. On ajoute à 0C, 1,2 cm3 d'anhydride acéti-
que et 0,6 cm3 de bromure dlacétyle. On laisse remonter la tempé-
rature à 25C. On maintient le mélange réactionnel sous agitationpendant une heure, verse dans un mélange de bicarbonate de sodium,
d'eau et de glace et ex-trait à l'éther. On évapore à sec, dissout
-~2-
33~
le produit huileux obtenu dans 60 cm3 de méthanol, ajoute 4,8 cm3
de lessive de soude. On maintient le mélange réactionnel à la tem-
pérature ambiante pendant une heure, neutralise, verse dans l'eau
et extrait au chloroforme. On évapore à sec, chromatographie .sur
silice en éluant au mélange éther de pétrole-acétate dléthyle
(6 - 4) et obtient 0.742 g du produit recherché fondarrt à 112C.
Exemples 2 à 7:
En opérant comme il est indiqué à l'exemple 1, ~ partir
des produits de formule ~II), on a obtenu les produits de formule
(I) suivants:
Image
- 14 -
l l
fd
~~ l co l
a
p~
l l
l l i
l ~ l
l l l
I r~ I
I ,~ . I
l o l
, ~ ~ !
I ~ ~,
,
^ I ~a) a) o
H
(U O I
I ~-rl r~ I
E~
H I rl ~) + I
~ I r~
O I ~`10
~ r-~
Pl I ~rl~~
I ~ U~ r-l I
I I ~
I ~L~ C) ~ I
I r~ ~ O C,3 1
I r~ ~1 0
I r~ ~ I
I ~(d~
I O ~
I S~ O I
I ~ O ~ I
I ~ ~LI I
I ~ r~ O
I I ~ ~
'''''' ' l ''""''";'
l l
I rd
I ~ I
I U~ I
(I)
1 ~1 1
~_ I ~) . I
1~
H I ~) r-l
_, I rd ~ I
E~ I c~ ~ I
H I 1~ 0
I r-l rl
I
ri ~d
I $ ~ ~ '
I ~ o
I ~, ~ I
I r~
I ,~ a) ~ I
I ~ I
I rl l~l 1~ 1
I ~> ~ (I) I
I I I ~
i ~fL~ ~ I
I r~ ` O
I r ~
~ 2~3~
Exemple 8: Compositions pharmaceutiques
- On a préparé des comprimés à 0,05 mg de produit de l'ex-
emple 1 comme principe actif;
- Excipient (talc, amidon, stéarate de magnésium) q.s.
pour un comprimé terminé à 120 mg.
Etude pharmacoloqique du 3,17~-dihydroxy ll~-vinyl 17~-éthynyl
estra 1,3,5~10) triene (~roduit A)
1) L'activité estrog~ne du produit a été étudiée par la
méthode des récepteurs hormonaux décrlte par J. P. RAYNAUD et Coll
dans "J. STER. BIOCHEM" 1975, 6, 615 - 622.
La technique est la suivante:
L'utérus, prélevé sur des souris femelles impubères,agées
de 18 - 21 jours, est homogénéisé dans un tampon trométhamine 10
millimoles, saccharose 0,25 M, HCl pH 7,4.
Llhomogénat est centri~ugé ~ 105 000 g pendant une heure.
Le liquide surnageant ou "cytosol" est alors ajusté de façon à
avoir une dilution 1/25 (poids/volume).
On incube à 25C pendant 5 heures, le cytosol avec une
concentration fixe d'estradiol tritié en présence ou non de concen-
trations croissantes d'estradiol froid ou de produit à tester.
On détermine au bout de 5 heures, la radioactivité de
l'estradiol radioactif lié au récep-teur par la technique d'adsorp-
tion au charbon dextran (1,25 % - 0,625 %~.
On trace ensuite:
- Les courbes représentant les pourcentages d'estradiol
tritié lié en fonction du logarythme de la concentration d'estra-
diol froid ou du produit à tester ajouté~
- Et la droite I50, parallèle à l'axe des abscisses et
d'ordonnée B = B/T Max. + B/T Min.
T 2
B/T Max. est le pourcentage d'estradiol tritié lié quand aucun
produit n'est ajouté.
-16-
3~
B/T Min. est le pourcentage d'estradiol tritié lié quand la quanti-
té maximale d'estradiol froid est ajoutée.
Les intersections de cette droite I50 et des courbes per-
mettent de déterminer les valeurs CE et CX.
CE = concentration d'estradiol froid qui inhihe de 50 % la fixation
d'estradiol tritie.
CX = concentration du produit testé qui inhibe de 50 % la fixation
d'estradiol tritié.
L'affinité relative du produit testé ou ARL est donnée
par la formule:
ARI, = 100 x CE
CX
Les résultats obtenus sont les suivants:
PRODUITS ARL
___________ ____________________________
Estradiol............ ~.......... 100
Produit A........................ 240
Le produit étudié présente donc une affinité pour le ré-
cepteur spécifique utérin de l'estradiol supérieure à celle de
l'estradiol, donc est un produit estrogène.
2) L'activité estrogène du 3,17~-dihydroxy ll~-vinyl 17~-
éthynyl estra 1,3,5(10)-triène a été déterminée par le test de
RUBIN, ~ndocrinology, 1951, 49, 429. La technique utilisée est la
suivante:
Des souris femelles, âgées de 19 à 21 jours, sont traitées
une fois par jour pendant trois jours, par voie sous-cutanée. Les
animau~ sont sacrifi~s le quatrième jour et les u-térus sont prélevées,
disséqués et pesés. Le produit a été administré par voie sous-
cutanée, en solution huileuse, sous le volume de 0,1 cm3, aux dosestotale de 0,01~, 0,03~, 0,09~ et 0,27Y.
Le tableau suivant réunit les résultats obtenus:
3~
Doses : Poids de l'utérus en mg
_____________________.______________________________
0 ~ :11,4 + 0,5
o,olr:25,8 + 1,7
o,o3r:90,1 ~ 5,7
0,09~ :12~,8 +1~,1
0,27r .107,6+ 7,4
Concluslon:
Le produit A présente une très nette activité utérotro-
phique.
-18-
