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38Z4
Dans sa demande de brevet canadienne déposée le 21
Janvier 1977 sous le numéro 270,375, la Société demanderesse
décrit et revendique de nouvelles oximes dérivées de l'acide
7-amino thiazolyl acétamido céphalosporanique, leur procédé de
préparation et leur application comme médicaments.
Cette demande de brevet principal décrit les produits
de formule I:
NH-R
~ I / ~ \ 3H ~ (I)
OR' O ~ CH2-0-C-CH3
CO 2A O
dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un groupement
facilement éliminable par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse,
R' représente un atome d'hydrogène, un groupement facilement
éliminable par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse ou un radical
alkyle saturé ou insaturé, ayant de 1 à 4 atomes de carbone, A
représente, soit un atome d'hydrogène, soit un équivalent de
métal alcalin, alcalino-terreux, de magnésium ou d'une base
organique aminée, le trait ondulé signifie que le groupement OR'
peut se trouver dans l'une ou l'autre des deux positions possibles
syn ou anti, étant entendu que, lorsque R' représente un groupe-
ment facilement éliminable par hydrolyse acide ou par hydro-
génolyse, R représente un groupement facilement éliminable par
hydrolyse acide ou par hydrogénolyse et, lorsque R' représente
un atome d'hydrogène, R représente également un atome d'hydrogène.
Il est entendu que les produits de formule I, précé-
demment cités, peuvent exister:
- soit sous la forme indiquée par ladite formule I,
- soit sous la forme de produits de formule Iz:
.
Z313Z4
~ H (Iz)
i~
CH2 0 ~ CH
. OR' 02A
dans laquelle R, Rl et A ont la signification précitée.
~ La présente demande décrit de nouveaux produits entrant
dans la formule générale I de la demande de brevet No. 27p.,375.
Elle concerne les produits dont les noms suivent:
- L'acide 3 -acétoxyméthyl 7 - ~2-(2-tritylamino 4 -
- -thiazolyl) 2 - vinyloxyimino acétamido~céph 3ème 4 - carboxyli-
que isomère syn~
- Le sel de sodium de l'acide 3 - acétoxyméthyl 7,-
~2-(2-tritylamino 4 - thiazolyl) 2 - vinyloxyimino acétamido~
céph 3ème 4-carboxylique isomère syn~
8 - L'acide 3 - acétoxyméthyl 7 - ~2-(2-amino 4-thiazo-
lyl) 2 vinyloxyimino acétamido~ céph 3ème 4-carboxylique isomère
syn et ses sels avec les métaux alcalins, alcalino-terreux,
le magnésium ou les bases organiques aminées~
et plus particulièrement:
- L'acide 3 - acétoxymét~yl 7-~2-(2-amino 4- thiazolyl)
2 yinyloxyimino acétamido~ céph 3ème 4-carboxylique isomère syn,
et`
- Le sel de sodium de l'acide 3 - acétoxyméthyl 7-
~2-(2-amino 4- thiazolyl) 2 - vinyloxyimino acétamido7 céph 3ème
4 - carboxylique isomère syn.
.. .. = _ . . . . . _ . .. . _ , .
~123824
La présente demande concerne également un :
procédé de préparation des produits de formule I5
NH-R3
~N 0
I 5
--~ /
~NH S~
CH = CH2 ~--CH2-0-~C-CH3
dans laquelle R3 représente un atome d'hydrogène ou
un radical trityle et A représente un atome d'hydrogène ou un
équivalent de métal alcalin, alcalino-terreux de magnésium ou
d'une base organique aminée caractérisé en ce que l'on fait
réagir l'acide 7 - amino céphalosporanique de formule
H2N-~
o~7 \~~ CH2 -0-S-CH3
Co2H b
avec un acide de formule II5
NH C ( 6 5 ) 3
SJ~N
C2H II5
0 -CH = CH2
ou un dérivé fonctionnel de cet acide, pour obtenir un produit
de formule I ' 5
NH-C (C6H5)3
~N
NH ~S I ~ 5
0-CH=CH2 0~ ~ CH2-0-~CI-cH3
C2H
~1238Z4
acide de formule I'5 que l'on traite éventuellement, selon
les méthodes usuelles, pour obtenir le sel de métal alcalin,
alcalinoterreux de magnésium ou d'une base organique aminée
correspondant, acide de formule I'5 ou sel de cet acide que l'on
traite, le cas ~ch~ant, par un acide pour obtenir le produit de
formule I"s
~H2
0 I"5
H ~ S~
C o 2 H
que l'on salifie éventuellement selon les méthodes usuelles pour
obtenir le sel correspondant de l'acide I"5.
Le dérivé fonctionnel de l'acide de formule IIs est
préférentiellement l'anhydride formé in situ par action de la di-
cyclohexyl carbodiimide. La salification des produits de
formule I'5 ou I"5 est réalisée de préférence par action sur
ces acides d'une base minérale, préférentiellement le carbonate
acide de sodium.
L'acide avec lequel on traite préférentiellement
l'acide de formule I'5 ou un sel de cet acide est l'acide
formique.
La présente demande a également pour objet un procédé
caractérisé en ce que le produit de formule II5
NH--C (C6H5)3
CO2H II5
0 - CH~ CH2
est préparé en faisant agir en présence d'une base un produit
dè formule X-CH2-CH2-X dans laquelle X représente un atome de
chlore, de brome ou d'iode sur un produit de formule:
:
~lZ38Z~
NH-C (C6H5)3
III5
\~= <~ ~ C02alc
1~ .
OH
dans laquelle alc représente un radical alkyle ayant de 1 à 4
atomes de carbone, pour obtenir un produit de formule -
~H-C (C6H5)3
~
~ / CO2alc IV5
Il . ` '' , .
~ - CH -CH X
produit que l'on traite par une ~ase forte pour obtenir un ;
produit de formule
NH-C (C6H5)3
\==(~C02alc V -':
o -CH = CH2
produit que l'on traite par une base puis par un acide pour
obtenir le produit de formule II5 attendu. Parmi les produits
de formule XCH2 - CH2X, le produit préféré est celui dans
lequel X représente un atome de brome.
La base en présence de laquelle on fait agir le
produit XCH2 - C~2X sur le produit III5 est de préférence le
carbonate de potassium dans le diméthyl formamide.
On peut utiliser également le tert-butylate de potas-
sium dans le diméthyl formamide ou le tétrahydrofuranne. On
peut de même utiliser la triéthylamine.
La base forte avec laquelle on traite le produit de
formule IV5 pour obtenir le produit de formule V5 est préféren-
-- 5 --
,
~ ~23824
tiellement le tert-butylate de potassium dans le diméthyl
sulfoxyde à température ambiante.
La base en présence de laquelle on opère la trans-
formation des produits de formule V5 en produits de formule
II5 est préférentiellement le potasse dans un mélange dioxane-
éthanol. On peut également utiliser d'autres bases telles
que la soude ou la baryte.
L'acide que l'on utilise pour isoler l'acide de
formule II5 est de préférence l'acide chlorhydrique dilué,
mais on peut également utiliser l'acide acétique ou l'acide
formique.
La présente invention a également pour objet les
procédés décrits ci-dessus de préparation des produits de formule
II5 et I5 caractérisé en ce que le groupement oxygéné porté
par l'azote est dans la position syn.
Pour ce faire on part des produits de formule III
dans lesquels le groupement OH est dans la position syn.
Cette configuration syn du produit III5 peut être
conservée dans la suite de la synthèse lors de la préparation
des produits IV5, V5, II5 et I5.
Les produits, objet de la présente demande comme
ceux de la demande principale, possèdent une très bonne
activité antibiotique, d'une part, sur les bactéries gram+,
telles que les staphylocoques, les streptocoques et notamment
sur les staphylocoques pénicilino-résistants et d'autre part,
sur les bactéries gram- notamment sur les bactéries coliformes,
les Klebsiella, les Salmonella et les Proteus.
Ces propriétés rendent aptes lesdits produits à être
utilisés comme médicaments dans le traitement des affections
à germes sensibles et notamment dans celui des staphylococcies,
telles que septicémies à staphylocoques, staphylococcies
malignes de la face ou cutanées, pyodermites, plaies septiques
~ .
: ,,. ~ ;
~LlZ3824
ou suppurantes, anthrax, phlegmons, érésipèles, staphylococcies
aiguës primitives ou post grippales, bronchopneumonies, suppu-
rations pulmonaires.
Ces produits peuvent également être utilisés comme
médicaments dans le traitement des collibacilloses et infections
associées, dans les infections à Proteus, à Klebsiella et
Salmonella, et dans d'autres affections provoquées par des
bactéries à gram-.
Les propriétés justifient l'utilisation, à titres-
de médicaments et notamment de médicaments antibiotiques, des
produits de formule I5 cités-ci-dessus et plus'particulière-
ment de:
- l'acide 3- acétoxyméthyl 7-/2-(2 amino 4-thiazolyl)
2 vinyloxyimino acétamid~J céph 3ème 4 - carboxylique isomère
syn, et le sel de sodium de l'acide 3 - acétoxyméthyl 7 /2 (2
amino 4 - thiazolyl) a vinyloxyimino acétamid~céph 3ème 4-
carboxylique isomère syn.
Les dérives obtenus par le procédé de l~'invention,
peuvent être utilisés pour préparer des compositions pharmaceu-
tiques renfermant comme principe actif, au moins un des'médica-
ments définis ci-dessus.
Ces compositions peuvent être administrées par voie
buccale, rectale, parentérale ou par voie locale en application
topique sur la peau et les ...muqueuses.
Elles peuvent être solides ou liq~ides et se présenter
sous les formes pharmaceutiques couramment utilisées en médecine
humaine comme, par exemple, les comprimés simples ou dragéifiés,
les gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations,
injectables, les pommades, les crèmes, les gels, elles sont pré-
parées selon les méthodes usuelles. Le ou les principes actifspeuvent y être incorporés à des excipients habituellement employés
dans ces compositions pharmaceutiques, tel que le talc, la gomme
-- 7 --
~238Z4
arabique, le lactose, l~'amidon, le stéarate de magnésium, ~ie
beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'o-
rigine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les gly-
cols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants,
les conservateurs.
La dose administrée est variable selon l'affection
traitée, le sujet en cause, la voie d'administration et le pro- r
duit consid~ré. Elle peut être par exemple, comprise entre
0,500 g et 1 g, trois fois par jour, par voie intramusculaire,
chez l'homme avec le produit décrit à l'exemple 3.
Le procédé de l'invention permet de préparer les pro-
duits nouveaux suivants:
es produits de formule IV5
~H-C (C6H5)3
S ~ CO2alc 5
O CH2_ CH2X
dans laquelle X représente un atome de chlore, brome ou iode et
alc représente un radical alkyl ayant de 1 à 4 atomes de carbone,
et les produits de formule VI5
~ ( 6 5)3
S
C2 R5 VI5
O-CH=CH2
dans laquelle R5 représente un atome d'hydrogène ou un radical
alkyl ayant de 1 à 4 atomes de carbone.
Les produits de formule VI5 sont obtenus par déshydro-
halogénation des produits de formule IV5 par une base forte et,
dans le cas où R5 représente un atome d'hydrogène, par saponifi-
cation des produits obtenus.
Les produits de formule III5 utilisés au départ de l'in- ,
vention peuvent être préparés comme suit:
On fait agir la thiourée sur un produit de formule
Cl-C~2-~-fi-CO2alC A
OH
-, - ,~
~123824
pour obtenir un produit de formule
NH2
S ~N
C2 alc B
N
OH
produit que l'on traite par un équivalent de chlorure
de trityle pour obtenir le produit de formule III5 attendu.
On obtient les produits de formule B et III5 dans
lesquels le groupement ~ est dans la position syn lorsque
l'action de la thiourée~H sur les produits de formule A est
conduite soit dans un solvant aqueux tel que l'acétone aqueuse
ou l'éthanol aqueux, soit à température ambiante, en faisant
agir une quantité sensiblement stoéchiométrique de thiourée
et pendant une durée assez courte de l'ordre de une à trois
heures, soit enfin lorsque toutes les conditions précédentes
sont réunies.
Un exemple d'une telle préparation est donnée plus
loin dans la partie expérimentale.
Les exemples suivants illustrent l'invention sans
toutefois la limiter.
Exemple 1 :
Acide 3 - acétoxvméthyl 7 - /2 (2 tritylamino 4 -
.
thiazolyl) 2 vinvloxYimino acétamid~/ céPh 3ème 4-carboxvli~ue
isomère syn.
Stade A = Ester ~thylique de l'acide 2-(2-bromoéthoxyi-
mino) 2 -(2-tritylamino 4 - thiazolyl) acétique isomère syn.
On place sous argon un mélange de 4,94 g de chlor-
hydrate de l'ester éthylique de l'acide 2 - hydroxyimino 2-(2
tritylamino 4 - thiazolyl) acétique isomère syn dans 10 cm3
de diméthyl formamide et introduit à température ambiante en
_ g _
~1238Z4
3 minutes 4,14 g de carbonate de potassium. On agite 20
minutes à 20C et ajoute 8,65 cm de 1,2 dibromoéthane.
On agite 30 heures et verse dans un milieu comprenant 100 cm3
d'eau distillée et 20 cm de chlorure de méthylène, on décante,
réextrait au chlorure de méthylène, lave à l'eau distillée,
réextrait, sèche les solutions organiques, essore, rince et
distille à sec. On obtient le produit brut que l'on chromato-
graphie sur silice en éluant avec du benzène à 5% d'éther. ~On
recueille une première fraction que l'on recristallise dans
le méthanol après dissolution à 50-60C et essorage à 0, + 5C
et obtient 1,16 g de produit blanc crème F = 117C.
On obtient ensuite une fraction homogène de 1,258 g.
RMN = pp~ (CDC13)
triplet = 3,55 J = 7 Hz CH2 Br
triplet = 4,51 J = 6 Hz N-O-CH2
singulet à 6,55, proton cycle thiazolique.
Stade B = Ester éthylique de l'acide 2 -(tritylamino-
4-thiazolyl) 2 - vinyloxyimino acétique isomère syn.
On place 6,9 g d'ester éthylique de l'acide 2 -(bromo-
éthoxyimino) 2 -(2 tritylamino 4 - thiazolyl) acétique isomère
syn préparé au stade A dans 35 cm de diméthyl sulfoxyde. On
introduit ensuite à 20-25C en 5 minutes 16 cm3 d'une solution
de tert-butylate de potassium à 1 M dansle tétrahydrofuranne.
On agite 30 minutes et introduit à température ambiante 3 cm3
de solution de tert-butylate de potassium à 1 M dans le tétra-
hydrofuranne. On agite de nouveau 30 minutes, introduit de
nouveau 3 cm3 de la même solution de tert-butylate de potassium
puis après 30 minutes une troisième fois 3 cm3 de la solution.
Après la dernière introduction on agite 30 minutes
et verse dans un mélange de 350 cm3 d'eau et glace et de 90 cm3
de chlorure de méthylène.
On acidifie à pH2 par 28 cm3 d'acide chlorhydrique
-- 10 --
~ i
~L~2382',4
normal, décante et réextrait par 3 fois 50 cm3 de chlorure
de méthylène. On lave à l'eau distillée sèche, essore, rince
et distille à sec. On obtient une résine noire que l'on
purifie par chromatographie sur colonne de silice en éluant
au chlorure de méthylène. On recueille ainsi 3,227 g de
produit atte~du utilisé tel quel pour le stade suivant.
RMN=ppm (CDC13) `
massif de : 4,16 à 4,83 ppm = CH2
massif de : 6,66 à 7,33 ppm = CH
singulet à 6,65 proton cycle thiazolique.
Après recristallisation dans l'éthanol absolu on
obtient un produit F = 114C
Analy_e (C28 H25 3 N3 S~
calculé : C %: 69,54 H %: 5,21 N %: 8,69 S %: 6,36
trouvé : 69,2 5,2 8,3 6,6
Stade C: Acide 2- (2 tritylamino 4- thiazolyl) 2
vinyloxyimino acétique isomère syn.
On place 3,227 g d'ester éthylique de l'acide 2-(2 tri- -
tylamino 4 -thiazolyl) 2-vinyloxyimino acétique isomère syn'
préparé au stade B dans 3,2 cm3 de dioxanne. On ajoute à
température ambiante 20 cm3 d'une solution 0,5 M de potasse ~
dans l'éthanol absolu et 12 cm d'éthanol absolu. On porte
à 50C sous agitation et argon et maintient 1 heure,le sel
de potassium cristallise. On ram~ne à 20C essore, rince à
l'éthanol et reprend le produit par un mélange de 50 cm3
d'acétate d'éthyle et 50 cm3 d'eau distillée.
On acidifie à l'aide de 6 cm3 d'acide chlorhydrique
2N. On agite jusqu'à obtention de deux phases homogènes. On
décante, lave par trois fois 20 cm3 d'eau distillée, réextrait
à l'acétate d'éthyle, sèche, essore et rince à l'acétate
d'éthyle. On concentre jusqu'à 15 cm et glace à 0, + 5C.
On essore et rince à l'acétate d'éthyle. On sèche et obtient
-- 11 --
~23824
2,53 g de produit attendu. Le produit est utilisé tel quel
pour le stade suivant.
Après recristallisation on obtient un échantillon
purifié F = 150C.
Stade D = Acide 3 - acétoxyméthyl 7-/2-(2 tritylamino
4 - thiazolyl) 2 - vinyloxyimino acétamid~/ céph 3ème 4-carbo-
xylique isomère syn.
On introduit 2,53 g d'acide 2-(2 tritylamino 4-
thiazolyl) 2-vinyloxyimino acétique isomère syn préparé au
stade C dans 20 cm3 de chlorure de méthylène. On refroidit à +
5C et introduit en une fois 0,632 g de dicyclohexylcarbodiimide.
On laisse revenir à température ambiante. On agite sous argon
1 heure pour obtenir la suspension A. De façon séparée, on
introduit sous argon 0,718 g d'acide 7 amino cephalosporanique
dans 10 cm3 de chlorure de méthylène. On refroidit à + 10C
et introduit 1,1 cm3 de triéthylamine pour obtenir la solution B.
On introduit la suspension A en 10 minutes à + 5,
+ 10C dans la solution B. On agite en laissant revenir à
température ambiante (en 35 minutes). Puis agite 3 heures à
20-25C.
On ajoute ensuite 0,6 cm3 d'acide acétique agite 10
minutes puis essore la dicyclohexylurée formée. On lave la
solution organique à l'eau, sèche et distille sous vide. On
obtient une résine jaune que l'on reprend à l'acétate d'éthyle
en filtrant un léger insoluble. On amène à sec et obtient
3,475 g de produit attendu.
Le chlorhydrate de l'ester éthylique de l'acide
2-hydroxyimino 2-(2-tritylamino 4-thiazolyl) acétique isomère
syn utilisé au départ de l'exemple 1 a été préparé comme suit:
2(2 amino 4-thiazolyl) 2-hydroxyimino acétate d'éthyle isomère
On dissout 0,8 g de thiourée dans 2,4 cm3 d'éthanol
- 12 -
~123~324
et 4,8 cm3 d'eau. On ajoute en 5 minutes, la solution de 2 g
de 4-chloro 2-hydroxyimino acétyl acétate d'éthyle et agite une
heure à température ambiante. On chasse la majeure partie de
l'éthanol sous vide partiel et neutralise à pH6 en ajoutant
du carbonate acide de sodium solide. On glace, essore, lave à
l'eau, sèche sous vide à 40C. On obtient 1,32 g de produit
attendu. F = 232C.
Analyse: C5 Hg 03 N3 S
calculé: C%: 39,06 H%: 4,21 ~/O 19,52 S%: 14,9
trouvé : 38,9 4,4 19,7 14,6
- Chlorhydrate de 2(2-tritylamino 4-thiazolYl)
2-hydroxyimino acétate d'éthvle, isomère syn.
On introduit 43,2 g de 2 (2-amino 4-thiazolyl) 2-
hydroxyimino acétate d'éthyle isomère syn préparé ci-dessus
dans 120 cm3 de diméthyl formamide sec.
On refroidit à -35C, introduit 32 cm3 de triéthyl-
amine, puis en 30 minutes par fractions, 60 g de chlorure de
trityle. On laisse remonter la température, observe une dissolu-
tion totale, puis un échauffement jusqu'à 30C. Après une
heure, on verse sur 1,2 1 d'eau glacée contenant 40 cm3 d'aclde
chlorhydrique 22 B=.
On agite dans un bain d'eau glacée, essore, rince à
l'acide chlorhydrique normal, empâte à l'éther, On obtient
69,3 g de chlorhydrate.
Exemple 2
Sel de sodium de l'acide 3- acétoxyméthyl 7-/2 (2-
tritvlamino 4 - thiazolyl) 2-vinyloxyimino acétamido7 céph
3ème 4-carboxylique isomère syn. `
On dissout à température ambiante 2,628 g de produit
obtenu à l'exemple 1 sous forme de résine, dans 5,2 cm3 d'acétone.
On ajoute en une fois 10,4 cm3 d'une solution molaire de carbona-
te acide de sodium dans l'eau. On essore le sel de sodium
- 13 -
~238Z4
après 1 heure de contact à 20C, et on rince par 2 fois 2 cm~3
d'un mélange eau-acétone 1-1 et par 2 cm3 d'eau distlllée. On
sèche sous vide à 40C et obtient 1,612 de produit brut attendu.
Exemple 3
Acide 3-acétoxyméthyl 7-/2 (2 amino 4-thiazolvl) 2
vinyloxyimino acétamido7 céph 3ème 4-carboxYlique isomère syn.
On place 1,612g de sel de sodium de l'acide 3-acéto-
xyméthyl 7 /2 tritylamino 4- thiazolyl) 2-vinyloxyimino acétami-
-
d~J céph 3ème 4-carboxylique isomère syn obtenu à l'exemple
2 dans 4 cm3 d'acide formique à 98%. On ajoute aussitôt après
4 cm3 d'eau distillée. On agite à 40C pendant 15 minutes.
On triture la suspension hétérogène 30 minutes à température
ambiante. On essore à 20C et rince par deux fois avec 1,6 cm3
d'acide formique à 50%. On distille à sec et reprend par 5 cm3
d'eau distillée. On essore ~ température ambiante et rince
à l'eau distillée puis à l'éther sulfurique. On sèche et
obtient 300 mg de produit attendu. On retraite l'insoluble de
la même façon que ci-dessus à l'aide de l'acide formique à 50 %
On récupère ainsi 0,214 g d'acide supplémentaire.
analyse : (C17 H17 07 N5 2)
calculé : C%: 43,68 H% 3,66 N~/o: 14,98 S%: 13,72
trouvé : 44,2 3,9 15,1 13,0
RMN=ppm (DMSO)
6,91 (proton cycle thiazolique)
7,28 (amine libre MH2)
Exemple 4
Sel de sodium de l'acide 3-acétoxyméthyl 7-/2 (2-
amino 4-thiazolYl) 2 -vinvloxvimino acétamido7 céph 3ème 4-
carboxylique isomère syn. :
On ajoute à 5,08 g d'acide 3-acétoxyméthvl 7-/2
(2-amino 4-thiazolyl) 2-vinvloxyimino acétamido7 céph 3ème
4-carboxylique isomère syn préparé selon l'exemple 3, 5 cm3
- 14 -
~L~238Z~
d'éthanol, puis sous agitation en bain d'eau glacée 10 cm3 d'une
solution molaire aqueuse (lM) de carbonate acide de sodium,
Après dissolution on ajoute 15 cm3 d'éthanol, concentre à 30C
sous vide, reprend à l'éthanol et sèche à poids constant. On
obtient le produit attendu.
Exemple 5
On a réalisé une préparation pour injection de formule:
- acide 3 -acétoxyméthvl 7-/2 (2 amino 4-thiazolvl) 2 vinyloxv-
imino acétamido7 céph 3ème 4-carboxylique isomère svn... 500 mg
- excipient aqueux stérile .......................... qsp 5 cm3
Exemple 6
On a réalisé des gélules répondant à la formule:
- acide 3-acétoxvméthyl 7-/2 (2 amino 4-thiazolvl) 2-vinvl-
oxvimino acétamido7 céph 3ème 4-carboxvlique isomère syn...250 mg
- excipient qs pour une gélule terminée à ........... .......400 mg
Etude pharmacoloqique des produits de l'invention
Activite in vitro :
Methode des dilutions en milieu liquide :
On prépare une série de tubes dans lesquels on
répartit une même quantité de milieu nutritif stérile. On
distribue dans chaque tube des quantités croissantes du produit
à étudier, puis chaque tube est ensemencé avec une souche
bactérienne.
Après incubation de vingt-quatre ou quarante-huit
heures à l'étuve à 37C, l'inhibition de la croissance est
appréciée par transillumination ce qui permet de déterminer les
concentrations minimales inhibitrices (C.M.I.) exprimées en
,ug/cm3.
Les résultats suivants ont été obtenus:
-- 15 -
3L~Z3~Z4
Produit de l'exemple 3
SOUCHES 24 H 48H
.
Staphylococcus aureus ATCC 6 538 Pen- . -
Sensibles .............................. 1 1
Staphylococcus aureus UC 1 128 Pen-
Résistant............................... 1 1
Staphylococcus aureus exp. N 54 146.... 1 2 ~.
Streptococcus pyogènes A 561 ........... ~ 0,02 ~0,02
Streptococcus faecalis 5 432............ 3 5
Streptococcus faecalis 99 F 74 ......... 5 10
Bacillus subtilis ATCC 6 633 ........... 2 5
Escherichia Coli Sensible Tétracycline
ATCC 9 637 .............................. 0,5 0,5
Escherichia coli Résistant Tétracycline
ATCC 11 303 ............................ 0,05 0,05
Escherichia Coli Exp. TO26B6............ 0,2 0,2
Escherichia Coli Résistant Gentamicine,
Tobramycine R 55 123 D.................. 0,5 0,5.
Klebsiella pneumoniae Exp. 52 145....... ~0,02 ~0,02
Klebsiella pneumoniae 2 536 Résistant .
Gentamycine............................. 1 2 .
Proteus mirabilis (indol-) A 235 ....... ~0,02 ~0,02
Salmonella typhimurium 420 ............. 0,5 0,5 ,
-Ent~robacter cloacae 681 ............... 5
Providencia Du 48.....................
Serratia Résistant Gentamicine 2 532.... 1 2
- 16 -
