Note : Les descriptions sont présentées dans la langue officielle dans laquelle elles ont été soumises.
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UTILISATION DU METRONIDAZOLE POUR LA PREPARATION D'UNE
COMPOSITION PHARMACEUTIQUE DESTINEE A TRAITER UN DESORDRE DE
LA VASCULARISATION CUTANEE
La présente invention concerne le domaine du traitement des désordres de la
vascularisation cutanée, et plus particulièrement le traitement des désordres
de la
vascularisation cutanée dans la rosacée. L'invention vise à fournir de
nouvelles
compositions pharmaceutiques, plus particulièrement dermatologiques, utiles
pour le
traitement des désordres de la vascularisation cutanée, et plus
particulièrement le
traitement des désordres de la vascularisation cutanée dans la rosacée et
comprenant
à titre d'agent actif le métronidazole.
La rosacée est une dermatose inflammatoire commune chronique et progressive
liée à
une relaxation vasculaire. Elle affecte principalement la partie centrale du
visage et se
caractérise par le rougissement du visage ou les bouffées de chaleur,
l'érythème facial,
les papules, les pustules, et la télangiectasie. Dans les cas graves,
particulièrement
chez l'homme, le tissu mou du nez peut enfler et produire un gonflement
bulbeux
appelé rhinophyma.
2 0 La rosacée survient généralement entre l'âge de 25 et 70 ans, et elle est
beaucoup
plus commune chez les gens au teint clair. Elle touche plus particulièrement
les
femmes, bien que cette affection soit généralement plus sévère chez l'homme.
La
rosacée est chronique et persiste des années avec des périodes d'exacerbation
et de
rémission.
La rosacée a originellement été appelée "acné rosacée" parce que ses papules
(légères surélévations de la peau) et ses pustules inflammatoires (croûtes de
pus)
ressemblent beaucoup à celles de l'acné vulgaire. Contrairement à l'acné
vulgaire,
dont l'étiologie est fondée à la fois sur une kératinisation anormale, une
augmentation
de la production de sébum et une inflammation bactérienne, l'inflammation de
la
rosacée est de nature vasculaire et mal comprise. II résulte de cette anomalie
vasculaire faciale un oedème permanent du derme qui pourrait accompagner une
colonisation accrue par Demodex folliculorum, acarien qu'on trouve
habituellement
dans les follicules du visage.
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Selon différents travaux, Demodex folliculorum aurait un rôle étiologique dans
la
rosacée (Erbagi et al., 1998, Int J Dermatol, vo1.37, pages 421-425; Purcell
et al, 1986,
J Am Acad Dermatol, vo1.15, pages 1159-1162; Sibenge et al., 1992, J Am Acad
Dermatol, vo1.26, pages 590-593). II semble que Demodex folliculorum cause ou
aggrave des réactions inflammatoires, se traduisant par des papules et des
pustules,
en bloquant les follicules pilo-sébacés du visage (Roihu et al., 1998, J Cutan
Pathol,
vo1.25, pages 550-552). Ce parasite déclencherait par ailleurs une réponse
immune
humorale (Nunzi et al., 1980, Br J Derrnatol, vol 103, pages 543-551; Manna et
al.,
1982, Br J Dermatol, vol 107, pages 203-208).
La pathogenèse de la rosacée est mal connue. De nombreux facteurs peuvent être
impliqués sans forcément induire cette affection. Ce sont par exemple des
facteurs
psychologiques, des troubles gastro-intestinaux, des facteurs environnementaux
(exposition au soleil, température, humidité) et émotionnels (stress),
alimentaires
(alcool, épices), hormonaux, vasculaires, voire une infection par Helicobacter
pilori.
La rosacée évolue en 4 stades, mais le passage par tous les stades n'est pas
obligatoire
- stade 1 des relaxations vasculaires (vers 20 ans). Les patients ont des
poussées
soudaines de rougeur paroxystique du visage et du cou, avec sensation de
chaleur,
2 0 mais sans signes systémiques. Après les crises, la peau du visage
redevient normale.
Ces « flushes » sont déclenchés par les changements de température (entraînant
parfois une thermophobie), l'absorption de boissons chaudes ou d'alcool.
- stade 2 érythémato-télangiectasique (vers 30 ans). Les zones malaires sont
diffusément rouges. On y observe des capillaires dilatés constituant la
classique
couperose. A la différence du stade 1, la rougeur est permanente. Outre les
joues, le
menton et la partie médiane du front peuvent étre touchés.
- stade 3 des papulo-pustules (vers 40 ans). Sur un fond d'érythème se
développent
des papules et des pustules de quelques millimètres de diamètre, sans comédons
associés. Cette dermatose peut être très étendue, parfois à la partie glabre
du cuir
chevelu chez l'homme, mais respecte le pourtour de la bouche et des yeux. Les
patients se plaignent d'une peau sensible, avec intolérance subjective à la
plupart des
topiques et des cosmétiques gras.
- stade 4 du rhinophyma (vers 50 ans ou plus tard). Cette phase tardive touche
principalement les hommes, contrairement aux autres stades. Le nez est
augmenté de
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volume, diffusément rouge et les orifices folliculaires sont dilatés. La peau
s'épaissit
progressivement.
Les formes mineures de la rosacée peuvent ëtre traitées par des actifs tels
que les
anti-séborrhéiques et les anti-infectieux, par exemple le peroxyde de
benzoyle, l'acide
rétinoïque. Quant aux formes les plus diffuses de l'affection, elles répondent
bien à une
antibiothérapie générale par les cyclines. Cependant, ces traitements
présentent des
effets secondaires désagréables pour le patient tels des phénomènes
d'irritation ou
d'intolérance.
De plus, en raison de l'aspect multi-factoriel de la rosacée, il existe de
très nombreuses
thérapies contre cette affection, mais on est encore à la recherche d'un
traitement
efficace et sans risque pour le patient.
Les travaux de la Demanderesse ont permis de mettre en évidence l'interaction
du
métronidazole avec les récepteurs choisis dans le groupe comprenant les
récepteurs
bêta-adrénergiques, le récepteur AT1, le récepteur 5-HT2, le récepteur 5-HTS,
le
récepteur de la galanine dans le traitement de la rosacée.
Les récepteurs bêta-adrenergiques sont impliqués dans la régulation de
diverses
fonctions physiologiques, telles que l'activité métabolique, l'activité
cardiaque, la
respiration, l'activité du système nerveux central, la pression sanguine et le
tonus
vasculaire.
Les récepteurs 5-HT2, les récepteurs 5-HT5 appartiennent à la famille des
récepteurs
de la sérotonine (5-HT). L'ensemble des récepteurs de la 5-HT sont couplés aux
protéines G, sauf la 5HT3 qui est un canal ionique. L'activation des
récepteurs 5-HT2
stimule l'activité de la phospholipase C. Le système de transduction des
récepteurs 5-
HT5 est associé positivement à l'adénylate cyclase.
Le récepteur AT1 est impliqué dans la régulation de la vasoconstriction par
l'angiotensine II. Chez l'homme, l'angiotensine II augmente le tonus des
artères
subcutanées.
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La galanine est un peptide de 29 acides aminés présent dans le système nerveux
central. Selon certains travaux, la galanine aurait un rôle dans la modulation
de la
réaction vasculaire cutanée et dans l'inflammation (Pincetli, 1990, Br J
dermatol,
vo1.122, pages 745-750).
Le métronidazole, ou (methyl-2-nitro-5-imidazolyl)-2-éthanol, est connu dans
l'art
antérieur pour ses propriétés antibactérienne, antiparasitaire et
antiprotozoaire. II
exerce une toxicité sélective vis à vis des microorganismes anaérobies ainsi
que des
cellules hypoxiques. Au niveau de ces dernières, le métronidazole est réduit
en dérivés
capables d'altérer la structure ADN de ces cellules.
Les travaux de la Demanderesse ont permis de mettre en évidence l'implication
des
récepteurs bêta-adrénergiques, du récepteur AT1, du récepteur 5-HT2, du
récepteur 5-
HTS, et du récepteur de la galanine dans les désordres de la vascularisation
cutanée.
La Demanderesse a maintenant mis en évidence les propriétés intéressantes du
métronidazole sur les désordres de la vascularisation cutanée et plus
particulièrement
sur les désordres de la vascularisation cutanée dans la rosacée.
2 0 II a été constaté de façon surprenante que l'utilisation du métronidazole
avait pour
conséquence une interaction avec les récepteurs bêta-adrénergiques, le
récepteur
AT1, le récepteur 5-HT2, le récepteur 5-HTS, et le récepteur de la galanine.
De façon
plus particulière, il a été constaté que l'utilisation du métronidazole inhibe
la fixation
des ligands naturels sur ces récepteurs.
Comme indiqué précédemment, l'invention vise à offrir une nouvelle méthode de
traitement d'un désordre vasculaire cutané consistant à administrer à un
sujet, atteint
de désordres de la vascularisation cutanée, une quantité efficace de
métronidazole,
dans laquelle le métronidazole est capable d'interagir avec au moins un
récepteur
choisi dans le groupe comprenant les récepteurs bêta-adrénergiques, le
récepteur
AT1, le récepteur 5-HT2, le récepteur 5-HTS, et le récepteur de la galanine.
En conséquence l'invention se rapporte plus particulièrement à l'utilisation
du
métronidazole pour la préparation d'une composition pharmaceutique, destinée
au
3 5 traitement d'un désordre de la vascularisation cutanée.
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Plus particulièrement, l'invention se rapporte à l'utilisation du
métronidazole pour la
préparation d'une composition pharmaceutique destinée au traitement d'un
désordre
vasculaire cutané, impliquant au moins un récepteur choisi le groupe
comprenant les
5 récepteurs bêta-adrénergiques, le récepteur AT1, le récepteur 5-HT2, le
récepteur 5-
HTS, et le récepteur de la galanine.
L'invention se rapporte également à l'utilisation du métronidazole pour la
préparation
d'une composition pharmaceutique destinée au traitement d'un désordre
vasculaire
cutané, impliquant au moins deux récepteurs choisis le groupe comprenant les
récepteurs bêta-adrénergiques, le récepteur AT1, le récepteur 5-HT2, le
récepteur 5-
HTS, et le récepteur de la galanine.
L'invention se rapporte également à l'utilisation du métronidazole pour la
préparation
d'une composition pharmaceutique destinée au traitement d'un désordre
vasculaire
cutané, impliquant au moins trois récepteurs choisis le groupe comprenant les
récepteurs bêta-adrénergiques, le récepteur AT1, le récepteur 5-HT2, le
récepteur 5-
HTS, et le récepteur de la galanine.
2 0 L'invention se rapporte également à l'utilisation du métronidazole pour la
préparation
d'une composition pharmaceutique destinée au traitement d'un désordre
vasculaire
cutané, impliquant au moins quatre récepteurs choisis le groupe comprenant les
récepteurs bêta-adrénergiques, le récepteur AT1, le récepteur 5-HT2, le
récepteur 5-
HTS, et le récepteur de la galanine.
L'invention se rapporte également à l'utilisation du métronidazole pour la
préparation
d'une composition pharmaceutique destinée au traitement d'un désordre
vasculaire
cutané, impliquant au moins cinq récepteurs choisis le groupe comprenant les
récepteurs bêta-adrénergiques, le récepteur AT1, le récepteur 5-HT2, le
récepteur 5-
3 0 HTS, et le récepteur de la galanine.
Plus particulièrement, l'invention se rapporte à l'utilisation du
métronidazole pour la
préparation d'une composition pharmaceutique destinée au traitement d'un
désordre
vasculaire cutané, ledit désordre vasculaire étant une composante de la
rosacée et le
métronidazole de ladite composition étant capable d'interagir avec au moins un
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récepteur choisi dans le groupe comprenant les récepteurs bêta-adrénergiques,
le
récepteur AT1, le récepteur 5-HT2, le récepteur 5-HTS, et le récepteur de la
galanine.
L'invention se rapporte également à l'utilisation du métronidazole pour la
préparation
d'une composition pharmaceutique telle que définie précédemment, dans laquelle
le
métronidazole est capable d'interagir avec au moins deux récepteurs choisis
dans le
groupe comprenant les récepteurs bêta-adrénergiques, le récepteur AT1, le
récepteur
5-HT2, le récepteur 5-HTS, et le récepteur de la galanine.
L'invention se rapporte également à l'utilisation du métronidazole pour la
préparation
d'une composition pharmaceutique telle que définie précédemment, dans laquelle
le
métronidazole est capable d'interagir avec au moins trois récepteurs choisis
dans le
groupe comprenant les récepteurs bêta-adrénergiques, le récepteur AT1, le
récepteur
5-HT2, le récepteur 5-HTS, et le récepteur de la galanine.
L'invention se rapporte également à l'utilisation du métronidazole pour la
préparation
d'une composition pharmaceutique telle que définie précédemment, dans laquelle
le
métronidazole est capable d'interagir avec au moins quatre récepteurs choisis
dans le
groupe comprenant les récepteurs bêta-adrénergiques, le récepteur AT1, le
récepteur
2 0 5-HT2, le récepteur 5-HTS, et le récepteur de la galanine.
L'invention se rapporte également à l'utilisation du métronidazole pour la
préparation
d'une composition pharmaceutique définie précédemment, dans laquelle le
métronidazole est capable d'interagir avec au moins cinq récepteurs choisis
dans le
groupe comprenant les récepteurs bêta-adrénergiques, le récepteur AT1, le
récepteur
5-HT2, le récepteur 5-HTS, et le récepteur de la galanine.
Plus particulièrement, l'invention se rapporte à l'utilisation du
métronidazole pou r la
préparation d'une composition pharmaceutique dans laquelle le métronidazole
inhibe la
3 0 fixation d'au moins un ligand naturel sur son récepteur, ledit récepteur
étant ch oisi
dans le groupe comprenant les récepteurs bêta-adrénergiques, le récepteur AT1
, le
récepteur 5-HT2, le récepteur 5-HTS, et le récepteur de la galanine.
La composition objet de la présente invention est une composition
dermatologique,
pour administration topique sur la peau.
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Par traitement des désordres de la vascularisation cutanée, on entend selon la
présente invention, le traitement et/ou la prévention d'un tel désordre.
Par traitement de la rosacée, on entend selon la présente invention, le
traitement et/ou
la prévention de la rosacée, à l'un ou plusieurs des stades décrits
précédemment.
Suivant un premier mode de mise en oeuvre de l'invention, la composition est
destinée
au traitement du premier stade de la rosacée.
l0
Suivant un deuxième mode de mise en oeuvre de l'invention, la composition est
destinée au traitement du deuxième stade de la rosacée.
Suivant un troisième mode de mise en oeuvre de l'invention, la composition est
l5 destinée au traitement du troisième stade de la rosacée.
Suivant un quatrième mode de mise en oeuvre de l'invention, la composition est
destinée au traitement du quatrième stade de la rosacée.
20 Suivant un mode préférentiel de mise en oeuvre, la composition contient
0,0001 à 20%
en poids de métronidazole, de préférence de 0,1 à 2%, et plus
préférentiellement de
l'ordre de 0,75 à 1% de métronidazole exprimé en pourcentage en poids par
rapport au
poids total de la composition.
2 5 Bien entendu la présente invention concerne, outre l'utilisation du
métronidazole,
l'utilisation de dérivés de celui-ci. On entend par dérivés des composés qui
se
distinguent du métronidazole, par substitution, addition ou suppression d'un
ou
plusieurs groupements chimiques et présentant sensiblement la même activité.
30 Avantageusement, les compositions de l'invention comprennent outre le
métronidazole
au moins un autre agent thérapeutique susceptible d'augmenter l'efficacité du
traitement. A titre d'exemples non iimifiatifs de tels agents, on peut citer
des
antibiotiques, des antibactériens, des antiviraux, des antiparasitaires, des
antifongiques, des anesthésiques, des analgésiques, des antiallergiques, des
35 rétinoïdes, des anti-radicaux libres, des antiprurigineux, des
ieérafolytiques, des
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antiséborrhéiques, des anti-histaminiques, des sulfures, des produits
immunosuppresseurs ou antiprolifératifs.
Les compositions de l'invention peuvent comprendre en outre tout additif
usuellement
utilisé dans le domaine pharmaceutique, dermatologique, compatible avec le
métronidazole. On peut citer notamment des séquestrants, des antioxydants, des
filtres
solaires, des conservateurs, par exemple la DL-alpha-tocophérol, des charges,
des
électrolytes, des humectants, des colorants, de bases ou d'acides usuels,
minéraux ou
organiques, des parFums, des huiles essentielles, des actifs cosmétiques, des
hydratants, des vitamines, des acides gras essentiels, des sphingolipides, des
composés autobronzants tels que la DHA, des agents apaisants et protecteurs de
la
peau tels que l'allantoïne, des agents propénétrants, des gélifiants. Bien
entendu
l'homme du métier veillera à choisir ce ou ces éventuels composés
complémentaires,
et/ou leur quantité, de manière telle, que les propriétés avantageuses de la
composition selon l'invention ne soient pas, ou substantiellement pas,
altérées.
Ces additifs peuvent être présents dans la composition à raison de 0 à 20 % en
poids
par rapport au poids total de la composition.
2 0 On peut citer comme exemples d'agents séquestrants, l'acide
éthylènediamine
tétracétique (EDTA), ainsi que ses dérivés ou ses sels, la
dihydroxyethylglycine, l'acide
citrique, l'acide tartrique, ou leurs mélanges.
On peut citer comme exemples de conservateurs le chlorure de benzalkonium, le
phénoxyéthanol, l'alcool benzylique, la diazolidinylurée, les parabens, ou
leurs
mélanges.
On peut citer comme exemples d'agents humectants, la glycérine et le sorbitol.
Les compositions de l'invention peuvent contenir un ou plusieurs agents
propénétrants
dans des concentrations préférentielles allant de 0 à 20 % et plus
préférentiellement
allant de 0,6 à 3% en poids par rapport au poids total de la composition.
Parmi les
agents propénétrants, on utilise préférentiellement, sans que cette liste soit
limitative,
des composés tels que le propylène glycol, le dipropylène glycol, le propylène
glycol
dipélargonate, le lauroglycol, l'éthoxydiglycol.
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Avantageusement, les compositions selon l'invention peuvent conten ~r
également un
ou plusieurs agents tensioactifs dans des concentrations préférentielles
allant de 0 à
% et plus préférentiellement allant de 0,1 à 2 %.
5
Les compositions de la présente invention peuvent se présenter sous toutes les
formes
galéniques normalement utilisées pour une application topique, notamment sous
forme
de solutions aqueuses, hydroalcooliques ou huileuses, de dispersions du type
lotion,
de gels aqueux, anhydres ou lipophiles, d'émulsions de consistance liquide ou
semi-
10 liquide du type lait, obtenues par dispersion d'une phase grasse dans une
phase
aqueuse (H/E) ou inversement (E/H), ou de suspensions ou émulsions de
consistance
molle, semi-liquide ou solide du type crème, gel ou pommade ou encore de micro-
émulsions, de micro-capsules, de micro-particules ou de dispersions
vésiculaires de
type ionique et/ou non ionique.
De préférence les crèmes peuvent être formulées à partir d'un mélange d'huile
minérale, ou d'un mélange de cire d'abeille et d'eau qui s'émulsifie
instantanément,
dans lequel on additionne métronidazole, dissout dans une petite quantité
d'huile telle
que l'huile d'amande.
Les pommades peuvent être formulées en mélangeant une solution d e
métronidazole
dans une huile telle pue l'huile d'amande dans de la paraffine chEauffée, puis
en
laissant refroidir le mélange.
A titre d'exemples de compositions selon l'invention, on peut citer ce Iles
comprenant
une phase active contenant (exprimé en pourcentage en poids)
- 0 à 90 %, préférentiellement 5 à 25 %, notamment 10 à 20 %, d'eau ;
- 0 à 10 %, préférentiellement 0 à 2 %, notamment 0 à 0,5 %, de tensio actif ;
- 0 à 20 %, préférentiellement 0 à 10 %, notamment 2 à 5 %, de propénétrant ;
- 0,0001 à 20% préférentiellement 0,1 à 2%, de métronidazole ;
et une phase aqueuse comprenant un gélifiant et de l'eau.
La phase aqueuse d'une composition selon l'invention se présentar~t sous la
forme
d'une émulsion peut comprendre de l'eau, une eau florale telle que l'eau de
bleuet, ou
une eau thermale ou minérale naturelle, par exemple choisie parmi l'eau de
Vittel, les
eaux du bassin de Vichy, l'eau d'Uriage, l'eau de la Roche Pos ay, l'eau de la
Bourboule, l'eau d'Enghien-les-Bains, l'eau de Saint Gervais-les-Bains, l'eau
de Néris-
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les-Bains, l'eau d'Allevard-les-Bains, l'eau de Digne, l'eau de Maizières,
l'eau de
Neyrac-les-Bains, l'eau de Lons-le-Saunier, les Eaux Bonnes, l'eau de
Rochefort, l'eau
de Saint Christau, l'eau des Fumades et l'eau de Terris-les-bains, l'eau
d'Avène ou
l'eau d'Aix les Bains.
5 Ladite phase aqueuse peut être présente à une teneur comprise entre 10 et 90
% en
poids par rapport au poids total de la composition, de préférence comprise
entre 20 et
80 % en poids.
A titre d'exemples non limitatifs, on peut citer les gélifiants de la famille
des
10 polyacrylamides tels que le mélange Sodium acryloyldimethyltaurate
copolymer /
isohexadecane / polysorbate 80 vendu sous le nom Simulgel 600 par la société
Seppic, le mélange polyacrylamide / isoparaffine C13-14 / laureth-7 comme, par
exemple, celui vendu sous le nom de Sepigel 305 par la société Seppic, la
famille des
polymères acryliques couplés à des chaînes hydrophobes tel que le PEG-
150/decyl/SMDI copolymère vendu sous le nom de Aculyn 44 (polycondensat
comprenant au moins comme éléments, un polyéthylèrieglycol à 150 ou 180 moles
d'oxyde d'éthylène, de l'alcool décylique et du méthylène bis(4-
cyclohexylisocyanate)
(SMDI), à 35% en poids dans un mélange de propylèneglycol (39%) et d'eau
(26%)), la
famille des amidons modifiés tels que l'amidon de pomme de terre modifié vendu
sous
2 0 le nom de Structure Solanace ou bien leurs mélanges.
Les gélifiants préférés sont issus de la famille des polyacrylamides tel que
le Simulgel
600 ou le Sepigel 305 ou leurs mélanges.
Le gélifiant tel que décrit ci-dessus peut être utilisé aux concentrations
préférentielles
allant de 0,1 à 15 % et, plus préférentiellement, allant de 0,5 à 5 %.
2 5 Les gels peuvent être préparés de préférence en dispersant ou en
dissolvant le
métronidazole dans un rapport approprié, dans un gel de type carbomère,
poloxamère
ou cellulosique.
D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront des
exemples ci-
30 après concernant l'activité du métronidazole.
Exemple 1 : Activité du métronidazole
3 5 1 ) Protocole
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Le test de liaison aux récepteurs bëta-1 et bêta-2 adrénergiques a été réalisé
suivant la
méthode décrite par Smith et Teiler 1999, Cardiovasc Drug Ther, vo1.13, pages
123-
126.
Le test de liaison au récepteur AT1 a été réalisé suivant la méthode décrite
par
Bergsma et al, 1992, Biochem Biophys Res Comm, vo1.183, pages 989-995.
Le test de liaison au récepteur 5-HTSA a été réalisé suivant la méthode
décrite par Ress
et al, 1994, FEBS Lett, vo1.355, pages 242-246.
Le test de liaison au récepteur 5-HT~ a été réalisé suivant la méthode décrite
par
Bonhauss et af, 1995, Brit J Pharmacol, vo1.1155, pages 622-628.
Le test de liaison au récepteur de la galanine a été réalisé suivant la
méthode décrite
par Sullivan et al, 1997, Biochem Biophys Res Comm, vo1.233, pages 823-828.
2) Conditions expérimentales
La liaison de métronidazole sur chaque récepteur a été déterminée par des
expériences de compétition. Le récepteur, protéine humaine recombinaEnte, a
été
incubé selon des temps indiqués dans le tableau 1 ci-dessous, avec une simple
concentration de ligand spécifique marqué, en présence du métronidazole à 10
p,M. La
radioactivité liée a été mesurée par comptage de la scintillation.
2 0 Tableau 1
Rcepteur Ligand spcifiqueLigand non Co, nditions
radio marqu spcifique d'in cubation
bta~ ['H]CGP 12177 Aprenolol 60 min / 22C
(50 ~M)
adrnergique (0,15 nM)
Btas [H]CGP 12177 Aprenolol 60 rein /
(50 ~,M) 22C
adrnergique (0,15 nM)
AT1 ["I][Sar'lle] Angiotensine 60 min / 22C
All II
(0,05 nM) (10 wM)
5-HT2A ['H]ketanserin Ketanserin 15 r~nin /
(1 ~,M) 37C
(0,5 nM)
5-HTSA [H]LSD (1 nM) Srotonine 30 rr~in /
37C
(100 ~,M)
Galanine 1 ("I]galanine Galanine (1 60 rr-~in
p,M) / 22C
(0,03 nM)
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3) Analyse et expression des résultats
La liaison spécifique du ligand au récepteur est définie comme la différence
entre la
liaison totale et la liaison non spécifique déterminée en présence d'un excès
de ligand
non marqué.
Les résultats sont exprimés en pourcentage de liaison spécifique contrôle et
en
pourcentage d'inhibition de la liaison spécifique contrôle obtenue en présence
du
métronidazole (tableau 2).
Tableau 2
Rcepteur Mtronidazole % de liaison spcifique
(wM) contrle
(+/-S D)
Btas adrnergique10 85,1 +/- 1,9
Bta2 adrnergique10 85,9 +/- 4,3
AT1 10 79,7 +/- 2,0
5-HT2A 10 81,6+/- 0,8
5-HTSA 10 83,2+/- 3,1
Galanine 1 10 81,1 +/- 3,4
Le métronidazole interagit et donc inhibe la liaison aux récepteurs bêta
adrénergiques,
au récepteur AT1, au récepteur 5-HT2, au récepteur 5-HTS, et au récepteur de
la
galanine.
